1、第第6 6章章 从杂交育种到基因工程从杂交育种到基因工程第第2 2节节 基因工程及其应用基因工程及其应用人教版必修21/27怎样让奶牛产出人奶呢？怎样让奶牛产出人奶呢？人细胞人细胞人乳铁蛋人乳铁蛋白基因白基因奶牛细奶牛细胞胞目基因供体细胞供体细胞受体细胞受体细胞剪刀剪刀运载体运载体针线针线2/27一、基因工程基本步骤一、基因工程基本步骤（一）提取目基因（二）目基因与运载体结合（三）将目基因导入受体细胞（四）目标基因检测和表示（四）目标基因检测和表示3/27 1、要想获得目基因必须用限制酶切几个切口？思索与讨论思索与讨论:目基因4/27目基因黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端GCTATAGCTAT
2、A5/27 2 2、会产生几个黏性末端？、会产生几个黏性末端？思索与讨论思索与讨论:目基因6/27基因运载体基因运载体7/27G C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GDNA连接酶连接酶8/27作为运载体必须具备哪些条件？作为运载体必须具备哪些条件？1.能够在宿主细胞中能够在宿主细胞中复制并稳定地保留复制并稳定地保留。2.具具多个限制酶切点多个限制酶切点，方便与外源基因连接。，方便
3、与外源基因连接。3.对宿主细胞无毒害作用。对宿主细胞无毒害作用。4.含有一些含有一些标识基因标识基因，便于进行，便于进行筛选筛选。9/271、惯用受体细胞：、惯用受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等酵母菌、动植物细胞等2、惯用微生物作受体细胞原因：、惯用微生物作受体细胞原因：微生物增殖快、代谢快、目产物多。3、若运载体是质粒，受体细胞为细菌应作何处理：、若运载体是质粒，受体细胞为细菌应作何处理：应用应用CaCl2处理处理目是：增大细胞壁通透性增大细胞壁通透性10/27操作过程中用操作过程中用到哪些工具？到哪些工具？11/27（一）基因（一）基因“剪刀剪刀”、分
4、布：、分布：主要在微生物中主要在微生物中专一性专一性3,5-3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键普通产生黏性末端（或产生平末端）普通产生黏性末端（或产生平末端）限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶 二、基因工程工具二、基因工程工具、结果：、结果：3 3、切割详细部位：、切割详细部位：、作用特点：、作用特点：12/27（二）基因针线（二）基因针线DNADNA连接酶连接酶GCTATAGCTATA作用：将互补配正确两个黏性末端连接起来，作用：将互补配正确两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整使之成为一个完整DNADNA分子。分子。连接是什么部位连接是什么部位?3,5-3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键13/27DNA
5、DNA聚合酶和聚合酶和DNADNA连接酶比较连接酶比较不不一一样样点点相同点相同点DNA聚合酶聚合酶DNA连接酶连接酶连接连接DNA片段片段不需要模板不需要模板连接是游离脱氧连接是游离脱氧核苷酸核苷酸需要模板需要模板连接不一样脱氧核苷酸之间磷酸和连接不一样脱氧核苷酸之间磷酸和脱氧核糖，形成磷酸二酯键脱氧核糖，形成磷酸二酯键14/27（三）基因运输工具（三）基因运输工具运载体运载体1 1、功效、功效：2 2、惯用运载体、惯用运载体：3 3、必须具备条件、必须具备条件15/27 1.1.原理：原理：基因重组基因重组DNADNA分子水平分子水平定向地改造生物遗传性状，取得人定向地改造生物遗传性状，取
6、得人类所需要品种。类所需要品种。三、基因工程概念三、基因工程概念体外体外4.4.结果：结果：3.3.操作环境：操作环境：2.2.操作水平：操作水平：16/27、基因工程与作物育种、基因工程与作物育种四、基因工程应用四、基因工程应用17/2718/27生长快、肉质好转基因鱼生长快、肉质好转基因鱼(中国中国)转基因紫番茄转基因紫番茄19/272 2、基因工程与药品研制、基因工程与药品研制20/273 3、环境保护、环境保护超级细菌超级细菌21/27讨论：转基因食品安全吗？讨论：转基因食品安全吗？22/27练习1.基因工程正确操作步骤是（）使目标基因与运载体结合使目标基因与运载体结合 将目标基因导入
7、受体细胞将目标基因导入受体细胞 检测目标基因表示是否符合特定性状要求检测目标基因表示是否符合特定性状要求 提取目标基因提取目标基因A.B.C.D.C23/272.2.要使目标基因与对应载体重组，所需两种要使目标基因与对应载体重组，所需两种酶是酶是()()限制酶限制酶连接酶连接酶解旋酶解旋酶还原还原酶酶 A24/273.3.基因工程技术中目标基因主要起源于基因工程技术中目标基因主要起源于 ()()A.A.自然界现存在生物体内基因自然界现存在生物体内基因B.B.自然突变产生新基因自然突变产生新基因C.C.人工诱变产生新基因人工诱变产生新基因D.D.科学家在试验室中人工合成基因科学家在试验室中人工合
8、成基因A25/274.4.以下关于基因工程叙述中以下关于基因工程叙述中,正确是正确是()()A.A.限制酶只用于提取目标基因限制酶只用于提取目标基因B.B.细菌体内环状细菌体内环状DNADNA均可作运载体均可作运载体C.DNAC.DNA连接酶可用于目标基因和运载体连接连接酶可用于目标基因和运载体连接D.D.重组重组DNADNA分子一旦进入受体细胞分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成基因工程则完成.5.5.以下说法正确是以下说法正确是()()A.A.目标基因是指重组目标基因是指重组DNA DNA B.B.一个限制酶只能识别一个特定核苷酸序列一个限制酶只能识别一个特定核苷酸序列C.DNAC.DNA重组所用工具酶是限制酶、连接酶和运载体重组所用工具酶是限制酶、连接酶和运载体D.D.只要受体细胞中含有目标基因，目标基因就一定能只要受体细胞中含有目标基因，目标基因就一定能够成功表示够成功表示 CB26/2727/27
