1、第八章第八章 生物制品判定生物制品判定1/63一、一、掌握掌握消毒、灭菌、滤过除菌、无菌试验消毒、灭菌、滤过除菌、无菌试验 及热原质试验概念。及热原质试验概念。二、二、掌握掌握生物制品惯用防腐剂。生物制品惯用防腐剂。三、三、掌握掌握无菌试验抽样标准；无菌试验抽样标准；熟悉熟悉无菌试无菌试 验方法；验方法；了解了解无菌试验用培养基无菌试验用培养基。四、四、掌握掌握生物制品热原质试验合格标准。生物制品热原质试验合格标准。【目要求】2/63第一节第一节 消毒灭菌与滤过除菌消毒灭菌与滤过除菌消毒消毒杀死物体上致病性微生物，杀死物体上致病性微生物，但不但不 一定杀死全部微生物。一定杀死全部微生物。灭菌灭
2、菌将物体上全部微生物，包含致病和将物体上全部微生物，包含致病和 非致病，以及细菌芽胞在内，全部杀死。非致病，以及细菌芽胞在内，全部杀死。一、消毒灭菌基本概念一、消毒灭菌基本概念（一）定义（一）定义3/63防腐防腐:预防或抑制体外细菌生长繁殖方法。预防或抑制体外细菌生长繁殖方法。防腐剂防腐剂用以抑制细菌生长繁殖物质用以抑制细菌生长繁殖物质。杀菌剂杀菌剂用以杀死细菌物质称为杀菌剂。漂白用以杀死细菌物质称为杀菌剂。漂白粉、亚硫酸盐等粉、亚硫酸盐等无菌无菌:不含活菌。预防细菌进入机体或物品不含活菌。预防细菌进入机体或物品 技术，称无菌操作。技术，称无菌操作。4/634消毒灭菌消毒灭菌方法方法物理法物理
3、法化学法化学法生物学法生物学法二、消毒灭菌二、消毒灭菌5/63（一）物理消毒灭菌法（一）物理消毒灭菌法 1 1、热力消毒灭菌法、热力消毒灭菌法（干热、湿热）（干热、湿热）2 2、辐射杀菌法、辐射杀菌法（紫外线、电离幅射、微波）（紫外线、电离幅射、微波）3 3、滤过除菌法、滤过除菌法（除菌滤器、适用物品）（除菌滤器、适用物品）4 4、超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细、超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细 胞、提取抗原）胞、提取抗原）5 5、低温抑菌、低温抑菌6/63（一）物理消毒灭菌法（一）物理消毒灭菌法 1、热力消毒灭菌法、热力消毒灭菌法高温杀灭细菌高温杀灭细菌干热灭菌法干热灭菌法焚烧
4、焚烧 最彻底灭菌方法最彻底灭菌方法烧灼烧灼 直接用火焰灭菌方法直接用火焰灭菌方法干烤干烤 加热加热 160-180；2 h红外线红外线 热效应热效应 与干烤类似与干烤类似7/637（一）物理消毒灭菌法（一）物理消毒灭菌法 热力消毒灭菌法热力消毒灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法巴氏消毒法巴氏消毒法 较低温度较低温度61 30min/71 15-30s 杀灭致病菌繁殖体杀灭致病菌繁殖体煮沸消毒法煮沸消毒法 100 5 mim(繁殖体繁殖体)；2h(芽胞芽胞)流动蒸汽消毒法流动蒸汽消毒法 水蒸气水蒸气100 15-30 mim(繁殖体繁殖体)高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 最有效灭菌方法最有效灭菌方法 12
5、1 20-30mim8/639/639湿热灭菌与干热灭菌效果比较湿热灭菌与干热灭菌效果比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好1 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固。、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固。2 2、湿热穿透力比干热大。、湿热穿透力比干热大。3 3、湿热蒸汽有潜热。、湿热蒸汽有潜热。10/63102、辐射灭菌法、辐射灭菌法日光：日光：污染衣物、被单等污染衣物、被单等紫外线：紫外线：不耐热物品表面不耐热物品表面 消毒消毒 手术室、传染病房、细菌试验室手术室、传染病房、细菌试验室电离辐射：电离辐射：一次性医用塑料制品一次性医用塑料制品 消毒、食品消毒消毒、食品消
6、毒 11/63113、滤过除菌法、滤过除菌法 定义：定义：许多可溶性抗原、毒素、类毒许多可溶性抗原、毒素、类毒素、免疫血清、抗毒素、细胞因子制品、素、免疫血清、抗毒素、细胞因子制品、血液制剂、酶制剂等血液制剂、酶制剂等不耐高温不耐高温溶液，多采溶液，多采取滤过除菌法到达灭菌目标。取滤过除菌法到达灭菌目标。用物理阻留方法将液体或空气中细菌除用物理阻留方法将液体或空气中细菌除去，以到达除菌目标。去，以到达除菌目标。12/6312 滤滤过过除除菌菌法法必必须须经经过过滤滤器器才才能能到到达达除除菌菌目目标标。滤滤菌菌器器种种类类很很多多，如如薄薄膜膜滤滤菌菌器器、SeitzSeitz滤滤菌菌器器、玻
7、玻璃璃滤滤菌器菌器等。等。13/63滤菌器滤菌器适用范围适用范围血清、毒素、抗生素以及空气等除菌。血清、毒素、抗生素以及空气等除菌。含有微细小孔含有微细小孔 0.22m，只允许液体或气体及，只允许液体或气体及孔径孔径 0.22m 颗粒经过，细菌不能滤过。颗粒经过，细菌不能滤过。14/6314 （1）薄膜滤菌器）薄膜滤菌器 滤膜都是由高分子聚合物制成，如滤膜都是由高分子聚合物制成，如醋酸纤维醋酸纤维、巨砜及聚亚乙烯氟等。这类、巨砜及聚亚乙烯氟等。这类滤膜可耐滤膜可耐121121高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌。用于除用于除菌膜孔径为菌膜孔径为0.220.22m m。（更高要求（更高要求0.150.15
8、m m）醋酸纤维平面膜装在不锈醋酸纤维平面膜装在不锈钢支架上进行除菌过滤。巨砜与聚亚乙钢支架上进行除菌过滤。巨砜与聚亚乙烯氟滤膜更含有化学稳定性，可用酸或烯氟滤膜更含有化学稳定性，可用酸或碱清洗处理，而且聚亚乙烯氟滤膜能够碱清洗处理，而且聚亚乙烯氟滤膜能够重复灭菌重复使用。重复灭菌重复使用。15/6316/6316（2 2）SeitzSeitz滤菌器滤菌器 滤菌器用金属制成，滤菌器用金属制成，中嵌以中嵌以石棉滤板石棉滤板。滤板。滤板孔径分三级：孔径分三级：K K最大，澄最大，澄清用；清用；EKEK较小，可除去较小，可除去普通细菌；普通细菌；EK-SEK-S最小，最小，可阻止全部细菌甚至大可阻止
9、全部细菌甚至大病毒经过。因为石棉是病毒经过。因为石棉是致癌物质，石棉滤板在致癌物质，石棉滤板在国际上已禁止使用。无国际上已禁止使用。无石棉石棉SeitzSeitz滤板仍可应用滤板仍可应用于生产。于生产。17/63（3）玻璃滤菌器）玻璃滤菌器 滤板系用玻璃细滤板系用玻璃细砂在一定温度下压成砂在一定温度下压成滤板，镶嵌在玻璃漏滤板，镶嵌在玻璃漏斗中制成玻璃滤菌器。斗中制成玻璃滤菌器。按孔径大小普通分为按孔径大小普通分为G1G1G6G6六种型号，六种型号，G5G5和和G6G6滤器能阻止细菌滤器能阻止细菌经过经过。18/63（二）（二）化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 （1 1）含氯消毒剂）含氯消毒剂 （
10、漂白粉）（漂白粉）（2 2）过氧化物类消毒剂）过氧化物类消毒剂 （3 3）醛类消毒剂（甲醛）醛类消毒剂（甲醛）（4 4）杂环类气体消毒剂（环氧乙烷）杂环类气体消毒剂（环氧乙烷）（5 5）醇类消毒剂）醇类消毒剂 （6 6）季铵盐类消毒剂）季铵盐类消毒剂 （新洁尔灭）（新洁尔灭）（7 7）其它消毒剂（洗必太、碘酊）其它消毒剂（洗必太、碘酊）19/63类别类别类别类别作用机制作用机制作用机制作用机制惯用种类酚类酚类蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸石炭酸醇类醇类蛋白变性蛋白变性乙醇乙醇氧化剂氧化剂氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒酸、碘酒重金属盐重金属盐
11、氧化、蛋白酶变性氧化、蛋白酶变性红汞、红汞、硫柳汞硫柳汞表面活性剂表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤新洁而灭新洁而灭染料染料干扰氧化、抑制繁殖干扰氧化、抑制繁殖龙胆紫龙胆紫酸碱类酸碱类破坏膜、壁，蛋白凝固破坏膜、壁，蛋白凝固醋酸、生石灰醋酸、生石灰烷化剂烷化剂蛋白质、核酸烷基化蛋白质、核酸烷基化环氧乙烷环氧乙烷20/63种类种类用途用途石炭酸石炭酸地面、器具表面、皮肤消毒地面、器具表面、皮肤消毒乙醇乙醇皮肤、体温计消毒皮肤、体温计消毒高锰酸钾高锰酸钾皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒红汞红汞皮肤、粘膜、小创伤消毒皮肤、粘膜、小创伤消毒硫柳汞硫柳汞皮肤消毒、手术
12、部位消毒皮肤消毒、手术部位消毒过氧乙酸过氧乙酸塑料、玻璃器材消毒塑料、玻璃器材消毒碘酒碘酒皮肤消毒皮肤消毒新洁而灭新洁而灭手术洗手、浸泡手术器械手术洗手、浸泡手术器械龙胆紫龙胆紫浅表创伤消毒浅表创伤消毒21/63四、生物制品抑菌防腐四、生物制品抑菌防腐(1)(1)硫柳汞（硫柳汞（0.01%0.01%）(2)(2)氯仿（氯仿（0.5%0.5%）(3)(3)硝酸汞苯硝酸汞苯 (4)(4)石炭酸石炭酸 (5)(5)福尔马林福尔马林 除活疫苗及冻干制品均加防腐剂除活疫苗及冻干制品均加防腐剂22/63惯用种类类别类别类别类别作用机制作用机制作用机制作用机制用途用途用途用途硫柳汞硫柳汞重金属盐重金属盐重金
13、属离子与菌体蛋白巯基结合使酶变性疫苗、类毒素疫苗、类毒素及血液制品及血液制品氯仿氯仿抗毒素、胎盘抗毒素、胎盘蛋白蛋白石炭酸石炭酸酚类酚类蛋白变性，细胞膜损蛋白变性，细胞膜损伤伤肠道死菌疫苗肠道死菌疫苗 甲醛 醛类对菌体蛋白进行烷化，使酶失活疫苗灭活剂、毒素解毒剂23/63臭氧臭氧O3（O3=O2+O）1、绿色消毒色消毒剂2、新生、新生态氧，破坏膜氧，破坏膜结构及膜内脂蛋白、脂多糖，构及膜内脂蛋白、脂多糖，直接破坏病毒直接破坏病毒DNA和和RNA3、瞬、瞬间杀毒，毒，杀菌能力是菌能力是氯6003000倍倍4、应用广泛用广泛24/63双锥常温臭氧灭菌罐双锥常温臭氧灭菌罐25/6325选择适当防腐剂
14、选择适当防腐剂低低毒毒低低破破坏坏有有效效价价廉廉方方便便易易贮贮存存26/6326第二节第二节 生物制品无菌试验生物制品无菌试验 生生物物制制品品不不得得含含有有杂杂菌菌（有有专专门门要要求求者者除除外外），灭灭活活菌菌苗苗、疫疫苗苗不不得得含含有有活活本本菌菌、本本毒毒。在在制制造造过过程程中中应应由由制制造造部部门门按按各各制制品品制制造造及及检检定定规规程程要要求求进进行行无无菌菌试试验验，分分装装后后制制品品须须经经质质量量检检定定部部门门做做最最终终检检定。定。生物制品无菌试验：生物制品在制造生物制品无菌试验：生物制品在制造过程中按各个制品制造及检定规程要求进过程中按各个制品制造及
15、检定规程要求进行无菌试验。行无菌试验。27/63一、抽样一、抽样（一）原液及半成品（一）原液及半成品 原液原液及及半成品半成品应应每瓶每瓶分别进行无菌试验，分别进行无菌试验，其抽样量应最少为其抽样量应最少为0.1%0.1%，但不得少于但不得少于1.0ml1.0ml。1 1、大罐稀释制品抽样数量不得少于、大罐稀释制品抽样数量不得少于10ml10ml。2 2、原液及半成品每开瓶一次，应如上法抽验。、原液及半成品每开瓶一次，应如上法抽验。28/631000110001支（瓶）以上者抽检支（瓶）以上者抽检4040支（瓶）支（瓶）（二）成品（二）成品 每亚批每亚批均应进行无菌试验，样品应随机抽取，均应进
16、行无菌试验，样品应随机抽取，应含有代表性（包含分装过程应含有代表性（包含分装过程前、中、后前、中、后样品）。样品）。分装量在分装量在100100支（瓶）或以下者抽检不少于支（瓶）或以下者抽检不少于5 5支支101101500500支（瓶）者抽检不少于支（瓶）者抽检不少于1010支（瓶）支（瓶）5015011000010000支（瓶）者抽检不少于支（瓶）者抽检不少于2020支（瓶支（瓶)29/63冻冻干干血血液液制制品品无无菌菌抽抽样样30/6330 冻干血液制品冻干血液制品1 1、单瓶装量、单瓶装量20ml20ml以上冻干血液制品以上冻干血液制品 每柜冻干每柜冻干200200瓶以下者抽检瓶以下
17、者抽检2 2瓶瓶 200 200瓶及以上者抽检瓶及以上者抽检4 4瓶瓶2 2、单瓶装量、单瓶装量6 620ml20ml冻干血液制品抽检量加倍。冻干血液制品抽检量加倍。3 3、单瓶装量、单瓶装量5ml5ml及及5ml5ml以下者，按普通成品抽检量以下者，按普通成品抽检量 抽检。抽检。（三）凡要求需作（三）凡要求需作支原体检验支原体检验制品，均应在制品，均应在半半成品成品时按亚批进行检验，成品可不再做。时按亚批进行检验，成品可不再做。31/63（1）检验制品中）检验制品中本身本身菌菌体体是否存活应采取适是否存活应采取适于本菌发育生长培养基（在半成品时检验，于本菌发育生长培养基（在半成品时检验，有专
18、门要求者除外）。有专门要求者除外）。检验需氧性和厌氧性杂菌应采取检验需氧性和厌氧性杂菌应采取硫乙醇酸硫乙醇酸盐盐培养基。检验不含汞类防腐剂制品中需氧培养基。检验不含汞类防腐剂制品中需氧性和厌氧性杂菌时，该培养基中可不加硫乙性和厌氧性杂菌时，该培养基中可不加硫乙醇酸盐。醇酸盐。二.无菌试验用培养基无菌试验用培养基 32/63 检验霉菌和腐生菌应采取改良马丁培检验霉菌和腐生菌应采取改良马丁培 养基。养基。检验混浊制品可采取不含琼脂硫乙检验混浊制品可采取不含琼脂硫乙 醇酸盐培养基。检验活菌苗时可加大醇酸盐培养基。检验活菌苗时可加大 琼脂含量，做成斜面。琼脂含量，做成斜面。（2）检验）检验支原体支原体
19、应采取猪胃消化液半固应采取猪胃消化液半固 体或牛心消化液半固体培养基。体或牛心消化液半固体培养基。33/63（3 3）生物制品无菌试验生物制品无菌试验用培养基可用用培养基可用经检定合格经检定合格干燥培养基干燥培养基配制。配制。（4 4）无菌试验培养基灵敏度）无菌试验培养基灵敏度。乙型溶乙型溶血性链球菌（血性链球菌（3221032210株）应到达株）应到达1010-8-8，短芽胞杆菌（短芽胞杆菌（73167316株）和生孢子梭状株）和生孢子梭状芽胞杆菌（芽胞杆菌（6494164941株）应到达株）应到达1010-7-7，白，白色念珠菌（色念珠菌（ATCc 10231ATCc 10231）和腊叶芽
20、枝）和腊叶芽枝霉应到达霉应到达1010-6-6。34/63（5 5）生物制品无菌试验培养基）生物制品无菌试验培养基由质量检由质量检定部门与培养基制造部门定部门与培养基制造部门一同进行灵敏一同进行灵敏度试验。每当更换主要原材料时，应进度试验。每当更换主要原材料时，应进行灵敏度试验，合格后方可应用。行灵敏度试验，合格后方可应用。（6 6）各）各生产单位质量检定部门生产单位质量检定部门应定时抽应定时抽检无菌试验培养基灵敏度，检无菌试验培养基灵敏度，检定所检定所应定应定时抽检各所无菌试验培养基。时抽检各所无菌试验培养基。35/63三、无菌试验方法三、无菌试验方法（一）直接接种法（一）直接接种法 1 1
21、、菌苗、疫苗、类毒素、抗毒素类制品、菌苗、疫苗、类毒素、抗毒素类制品 每安瓿装量每安瓿装量5.0ml5.0ml以上者（不含以上者（不含5.0ml5.0ml）取样不应少于取样不应少于1.0ml1.0ml 装量在装量在5.0ml5.0ml以下者（含以下者（含5.0ml5.0ml）取样不得）取样不得少于少于0.5ml0.5ml 装量不足装量不足0.5ml0.5ml者，全部吸收。者，全部吸收。36/63 含防腐剂制品接种量含防腐剂制品接种量与培养基与培养基百分比：百分比：用苯酚或氯仿作防腐剂者最少为用苯酚或氯仿作防腐剂者最少为1:201:20；用用汞汞作作防防腐腐剂剂者者或或制制品品内内含含有有甲甲醛
22、醛、抗抗生生素素者最少为者最少为1:501:50。先先按按此此百百分分比比接接种种于于硫硫乙乙醇醇酸酸盐盐培培养养基基内内增增菌菌，20202525培培育育3 34 4天天后后移移种种至至硫硫乙乙醇醇酸酸盐盐培培养养基基、适适宜宜琼琼脂脂斜斜面面、改改良良马马丁丁培培养养基基各各2 2管管，每管每管0.5ml0.5ml。（1 1）含防腐剂制品）含防腐剂制品37/63（2 2）不含防腐剂制品）不含防腐剂制品 不含防腐剂制品，装量在不含防腐剂制品，装量在5.0ml5.0ml以下者以下者（包含（包含5.0ml5.0ml）每）每1010支安瓿混合。支安瓿混合。装量在装量在5.0ml5.0ml以上者每以
23、上者每7 7支安瓿混合。支安瓿混合。将混合后样品直接接种一组培养基分别将混合后样品直接接种一组培养基分别置置20202525、30303535培育，培育时间共培育，培育时间共为为8 8天。天。38/63（3 3）混浊和接种后不能判定结果制品）混浊和接种后不能判定结果制品 可取要求量样品接种于不含琼脂硫乙醇可取要求量样品接种于不含琼脂硫乙醇酸盐培养基（酸盐培养基（200ml200ml）内进行增菌培养，）内进行增菌培养，3 34 4天后移种。培养基种类和支数、培育天后移种。培养基种类和支数、培育温度同含防腐剂制品，培育温度同含防腐剂制品，培育8 8天后判定结天后判定结果。果。39/63 样品每瓶装
24、量不足样品每瓶装量不足1.0ml1.0ml者，抽取全量者，抽取全量 1 120ml20ml以下者（不含以下者（不含20ml20ml），抽取），抽取1.0ml1.0ml以以上，每支装量为上，每支装量为15ml15ml培养基，接种培养基，接种1.0ml1.0ml。2 2、血液制品、血液制品 应接种培养基支数依取样总量而定。接种硫乙醇应接种培养基支数依取样总量而定。接种硫乙醇酸盐培养基与改良马丁培养基支数之比为酸盐培养基与改良马丁培养基支数之比为2:12:1。接种后将硫乙醇酸盐培养基总支数接种后将硫乙醇酸盐培养基总支数1/21/2置置30303535培育，其余置培育，其余置20202525培育，改良
25、马丁培养基置培育，改良马丁培养基置20202525培育，培育时间不少于培育，培育时间不少于1414天。天。40/63（二）薄（二）薄膜过滤法：膜过滤法：滤膜孔径为滤膜孔径为0.220.220.3m0.3m。要求抽检样品数：。要求抽检样品数：每瓶装量每瓶装量100ml100ml及及100ml100ml以下者取全量以下者取全量 100ml100ml以上者取半量以上者取半量 加入灭菌薄膜过滤器内，加压或减压过滤。加入灭菌薄膜过滤器内，加压或减压过滤。最好采取全封闭式一次性微孔过滤集菌器。最好采取全封闭式一次性微孔过滤集菌器。无菌取出过滤后滤膜在培养基中培养。无菌取出过滤后滤膜在培养基中培养。人血白蛋
26、白、人丙种球蛋白人血白蛋白、人丙种球蛋白41/63四、无菌试验判定四、无菌试验判定（1）无杂菌生长判为合格。）无杂菌生长判为合格。（2）如有杂菌生长，可复试，但抽样量加）如有杂菌生长，可复试，但抽样量加 倍。如复试仍有杂菌生长，判为不合格倍。如复试仍有杂菌生长，判为不合格42/6342 第三节第三节 生物制品热原质试验生物制品热原质试验热原质：热原质：菌体中脂多糖，多数由革菌体中脂多糖，多数由革兰阴性菌产生，注入人或动物体内兰阴性菌产生，注入人或动物体内能引发发烧反应物质。能引发发烧反应物质。43/63生物制品热原质试验概念生物制品热原质试验概念 将一定剂量供试品静脉注入家兔体内，在规定时间内
27、观察家兔体温升高情况，以判定供试品中所含热原质限度是否符合规定一种方法。X44/63一、供试家兔一、供试家兔 健康无伤，雌者无孕。体重健康无伤，雌者无孕。体重1.71.72.5kg2.5kg。测温前最少测温前最少3 3日应用同一饲料喂养。此日应用同一饲料喂养。此期间，体重应不减轻，精神、食欲、排泄期间，体重应不减轻，精神、食欲、排泄等不得有异常。等不得有异常。45/63 未曾用于热原质试验家兔，应在试验前未曾用于热原质试验家兔，应在试验前1 13 3日内预检体温一次，不注射药液。日内预检体温一次，不注射药液。1h1h测测温温1 1次，连续测次，连续测4h4h。4h4h内体温均在内体温均在38.
28、038.039.839.8 ，且最高与最低温差不超出，且最高与最低温差不超出0.5 0.5 者方可使用。者方可使用。46/63 动物自动测温仪动物自动测温仪47/63 凡热原质试验用过凡热原质试验用过家兔，若供试品判为符家兔，若供试品判为符合要求，家兔休息合要求，家兔休息4848小时后小时后可重复使用可重复使用。对。对血液制品、抗毒素和其它同一过敏原供试品血液制品、抗毒素和其它同一过敏原供试品在在5 5天内可重复使用。天内可重复使用。48/6348 二、试验前准备二、试验前准备(1)(1)试试验验用用注注射射器器、针针头头及及一一切切与与供供试试液液接接触触器器皿皿，洗洗净净后后应应经经250
29、250最最少少3030分分钟钟或或180180最少最少2 2小时干烤灭热原质。小时干烤灭热原质。(2)(2)测测温温探探头头准准确确度度应应为为0.10.1。每每只只家家兔注射前、后应使用同一支测温探头。兔注射前、后应使用同一支测温探头。49/63(3)(3)热热原原质质检检验验前前1 12 2日日，供供试试验验用用家家兔兔尽尽可可能能处处于于同同一一温温度度环环境境中中。试试验验室室温温度度保保持持在在15152525。试试验验全全过过程程中中室室温温改改变变不不得得大大于于33，(4)(4)应应保保持持平平静静，防防止止强强光光照照射射和和噪噪音音干干扰扰。空气中氨含量应低于空气中氨含量应
30、低于20ppm20ppm。50/63三、试验三、试验 试验前家兔应禁食试验前家兔应禁食2 2小时以上再开始测小时以上再开始测量正常体温，共测两次，间隔量正常体温，共测两次，间隔30306060分钟，分钟，两次温差不得大于两次温差不得大于0.20.2；同组兔间正常；同组兔间正常体温之差不得大于体温之差不得大于1.01.0。用测温探头测。用测温探头测量时，家兔固定量时，家兔固定30306060分钟后开始检温。分钟后开始检温。每批供试品初试用每批供试品初试用3 3只，复试用只，复试用5 5只家兔。只家兔。51/63 测家兔正常体温后测家兔正常体温后1515分钟内，按要分钟内，按要求剂量自耳边静脉缓缓
31、注入预热至求剂量自耳边静脉缓缓注入预热至3838供试品，每隔供试品，每隔3030分钟测量体温分钟测量体温1 1次，连次，连测测6 6次。次。52/63四、结果判断四、结果判断 每只兔正常体温与注射供试品后最高升每只兔正常体温与注射供试品后最高升温之差，为该兔应答。温之差，为该兔应答。出现负值要求以下：出现负值要求以下：降温值降温值0.40.4为兔温正常波动范围，以为兔温正常波动范围，以“0 0”计。降温值计。降温值0.60.6需重试。降温值需重试。降温值0.4-0.60.4-0.6时，若供试组家兔中仅一只降温时，若供试组家兔中仅一只降温在此范围内，以在此范围内，以“0 0”计，若供试组家兔中计
32、，若供试组家兔中有有2 2只或只或2 2只以上降温在此范围内，应重试。只以上降温在此范围内，应重试。53/63（一）肌内注射制品判定标准（一）肌内注射制品判定标准1 1、初试结果判定、初试结果判定 符合以下情况之一者，判为合格：符合以下情况之一者，判为合格：3 3兔升温均低于兔升温均低于0.80.8，且，且3 3兔升温总和兔升温总和不超不超1.81.8 3 3兔中兔中1 1只升温达只升温达0.80.8，其它升温均低于，其它升温均低于0.80.8，而且，而且3 3兔升温总和不超出兔升温总和不超出1.81.8。特殊者按指定标准：干扰素单只不超出特殊者按指定标准：干扰素单只不超出0.6 。54/63
33、 3 3兔中有兔中有2 2只升温只升温0.80.8或或0.80.8以上；以上；3 3兔升温总和超出兔升温总和超出2.42.4。3 3兔中兔中1 1只升温超出只升温超出0.80.8；3 3兔升温总兔升温总和超出和超出1.81.8。有以下情况之一者，复试一次：有以下情况之一者，复试一次：有以下情况之一者，判为不合格：有以下情况之一者，判为不合格：55/63 2 2、复试结果判定、复试结果判定 符合以下情况者，判为合格：符合以下情况者，判为合格：初、复试初、复试8 8兔中，有兔中，有2 2只或只或2 2只以下升只以下升温温0.80.8或或0.80.8以上，而且升温总和不以上，而且升温总和不超出超出4
34、.04.0。有以下情况之一者，判为不合格：有以下情况之一者，判为不合格：初、复试初、复试8 8兔中，有兔中，有2 2只以上升温只以上升温0.80.8或或0.80.8以上，而且升温总和超出以上，而且升温总和超出4.04.0。56/63（二）静脉注射制品判定标准（二）静脉注射制品判定标准符合以下情况者，判为合格：符合以下情况者，判为合格：1 1、初试结果判定、初试结果判定 3 3兔升温均低于兔升温均低于0.60.6，而且，而且3 3兔升温总兔升温总和不超出和不超出1.41.4。有以下情况之一者，复试一次：有以下情况之一者，复试一次：3 3兔中兔中1 1只体温升高只体温升高0.60.6或或0.60.
35、6以上；以上；3 3兔升温总和超出兔升温总和超出1.41.4。57/63有以下情况之一者，判为不合格：有以下情况之一者，判为不合格：3 3兔中兔中2 2只体温升高只体温升高0.60.6或或0.60.6以上；以上；3 3兔升温总和为兔升温总和为1.81.8或超出或超出1.81.8。58/632 2、复试结果判定、复试结果判定符合以下情况者，判为合格：符合以下情况者，判为合格：初、复试初、复试8 8兔中，兔中，2 2只或只或2 2只以下升温只以下升温0.60.6或或0.60.6以上，而且升温总和不以上，而且升温总和不超出超出3.53.5。59/63有以下情况之一者，判为不合格：有以下情况之一者，判
36、为不合格：初、复试初、复试8 8兔中，兔中，2 2只以上升温只以上升温0.60.6或或0.60.6以上；初、复试以上；初、复试8 8兔升温总和兔升温总和超出超出3.53.5。60/63第四节第四节 国家标准品制备和标定国家标准品制备和标定一、标准品种类和定义一、标准品种类和定义国家标准品分三类：国家标准品分三类：国家标准品、国家参考品、国家参考试剂国家标准品、国家参考品、国家参考试剂61/63（二）（二）国家参考品国家参考品系系指用国际参考品标定，指用国际参考品标定，用途与国家标准品相同特定物质，普通不定用途与国家标准品相同特定物质，普通不定国际单位。国际单位。（三）（三）国家参考试剂国家参考
37、试剂系指用国际参考试剂标系指用国际参考试剂标定，用于微生物（或其产物）判定或疾病诊定，用于微生物（或其产物）判定或疾病诊疗生物诊疗试剂，生物材料或特异性抗血清。疗生物诊疗试剂，生物材料或特异性抗血清。（一）（一）国家标准品国家标准品系指用国际标准品标定系指用国际标准品标定 ，用于衡量某一制品效价或毒性特，用于衡量某一制品效价或毒性特 定物质，其生物活性以国际单位表示。定物质，其生物活性以国际单位表示。62/63复习题复习题1 1、基本概念：消毒、灭菌、滤过除菌。、基本概念：消毒、灭菌、滤过除菌。2 2、生物制品惯用哪些防腐剂？、生物制品惯用哪些防腐剂？3 3、生物制品无菌试验。、生物制品无菌试验。4 4、生物制品成品抽样标准是什么？、生物制品成品抽样标准是什么？5 5、生物制品热原试验合格标准怎样判断、生物制品热原试验合格标准怎样判断？63/6363
