1、植物酯酶检测有机植物酯酶检测有机磷农药初探磷农药初探 学学 院：院：化学化工化学化工 专专 业：业：化化 学学 年年 级：级：级级 学学 号：号：131121 作作 者：者：陈陈 琨琨 指导教师：赵红艳指导教师：赵红艳 职称：试验师职称：试验师 日日 期：年期：年5月月28日日1/11一一 、研究目标和意义研究目标和意义 蔬菜是我们日常生活中所必须食物，在蔬菜生产过程中，喷洒化学农药防治病虫害仍为必要办法，不过严重超量农药残留会造成食用者急性中毒，而少许残留农药在人体内长久蓄积滞留也会引发许多慢性疾病。农药残留是农药使用后一个时期内未被分解而残留于生物体、收获物、土壤、水源、大气中微量农药原体
2、、有毒代谢物、降解物和杂质总称。2/11 进入21世纪,全球农业发展一个主要趋势是愈加注意农产品及食品质量安全性,提倡安全优质绿色食品。然而,近几年中国每年发生农药中毒人数均超出10万人,每年因农药引发食物中毒发病率居化学性中毒之首。出口农产品因农药残留量超标,不但造成巨大经济损失,而且严重影响了中国外贸声誉。伴随栽培技术不停进步，蔬菜生长久已越来越短，而伴随环境污染加剧，蔬菜病虫害也越来越重，绝大部分蔬菜需要连续屡次放药后才能成熟上市。所以，研究一个快速、适用农药检测方法，按照试验方法对蔬菜进行农药检测是非常有必要，这么不但提升了食物安全性，而且为检测提供了对应方法，有利于食品检测深入发展。
3、3/11二、二、研究方法研究方法 在植物中能够提取植物酯酶，且成本低、催化效果好。应用植物酯酶催化a-乙酸萘酯水解生成a-萘酚。其反应为：a-乙酸萘酯+水 植物酯酶 乙酸+a-萘酚 a-萘酚与固蓝B盐反应生成一个紫红色络合物，而有机磷农药能够抑制植物酯酶活性，将含有植物酯酶酶液与含有农药溶液反应，酯水解将受到抑制。依据此原理便能够对不一样品农药残留进行分析。经过紫外分光光度法对试验条件筛选，进而进行农药抑制率测定，最终得出相关结论。4/11三、研究价值三、研究价值 农药是一个剧毒物质,假如施用量超出国家安全标准，作用于蔬菜等农作物，食用会对人体产生危害。所以研究一个快速、适用农药检测方法，按照
4、试验方法对蔬菜中农药进行检测是非常有必要，这么既提升了食物安全性，而且为检测提供了试验方法，有利于食品检测深入发展，为人们食品安全提供更加好保障。5/11四、创新之处四、创新之处 1.采取马铃薯来提取酶液，马铃薯比较轻易购置到，而且经济，提取较为方便；2.使用无水乙醇来配制溶液无毒性，比丙酮更适当；3.使用10ml容量瓶来做试验，使试验更优化；4.最终得到试验数据，为人们提供了当地农药检测试验初步探究。6/11五、技术路线五、技术路线 配制PH=5.5缓冲液马铃薯粉碎按料液比1:5加提取液（磷酸盐缓冲液）用缓冲液配制酶液震荡或搅拌10-30min冰箱4保留过夜提取粗酶液配制a-乙酸萘酯溶液取液
5、试验标准曲线绘制确定最适试验条件配制对应浓度农药测定吸光度计算抑制率抑制率对浓度对数作图得出结论及结果分析 7/11六、酶促反应最适条件六、酶促反应最适条件1、酶促反应最适波长 依据结果绘制曲线在500530nm之间形成吸收峰平缓,最高点在520nm处。在实际分析中,测定波长选择在520nm处。2、酶促反应底物a-乙酸萘酯用量 取02.0mla-乙酸萘酯试验。试验证实，酶促反应最适底物用量为0.5ml时吸光值达最大，超出0.5ml后吸光度值下降。3、酶促反应最适温度 试验证实,酶催化反应温度在40时,酶活性最大。实际取40进行试验。4、酶促反应PH值 分别取PH=4.5、5、5.5、6、6.5
6、进行试验，试验证实，PH值大于5.5，对应吸光度值减小，故酶促反应最适反应环境为PH=5.5。5、酶促反应最适时间 试验证实,酶催化反应时间在12min左右时,酶活性最大。实际取12min进行试验。8/11七、农药抑制酶活性相关性 经试验测定并由抑制率公式计算对应浓度农药抑制率，以农药浓度对数与抑制百分率作图,得标准工作曲线，能够看出伴随农药浓度增加,抑制率增大,酶活性降低。在浓度为0.041.28 ug/ml之间,抑制曲线基本呈线性关系。经过回归分析可得该浓度范围内酶抑制方程:y=7.9197x+54.078,y=7.9339x+25.664。式中:y为抑制率,x为浓度惯用对数。相关系数 R2=0.9868,R2=0.9981说明能够用于进行农药残留量定量计算。经过该方程可对农药进行定量分析,但该方程仅对有机磷类农药成立。9/11八、论文不足及未来研究方向八、论文不足及未来研究方向 本研究仅对抑制率进行了初步测定，因为时间关系，所用农药比较单调（仅用有机磷农药进行测定），对酶反应最适条件进行探索、筛选，初步讨论了检测农药残留可行性，农药残留研究过窄，在测定农药残留上含有一定不足，在今后研究中应扩大农药种类，应该把得出方法用于检测实际蔬菜中农药残留，使测定农药残留方法愈加完善、更含有可行性。10/11谢谢谢谢!11/11
