1、胚胎工程的主要技术： 体外受精技术、胚胎移植技 术、胚胎分割技术、胚胎冷冻 保存技术和性别控制技术 胚胎工程的主要操作对象：生殖细胞、受精卵、 早期胚胎细胞 胚胎工程的理论基础：胚胎发育学 胚胎工程的主要技术应用胚胎工程的主要技术应用 1 体外受精技术： 哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制 的环境中完成受精过程的技术 体外受精主要内容是 ： 精子的采集与获能、卵母细胞的 采集与培养、体外受精 3.2体外受精和早期胚胎培养 2 体外受精 1.卵母细胞的收 集和培养 对不同动物,采 取卵母细胞的 方法不同 3 4 2.精子的收集和获能 1)收集的方法:假阴 道法,手握法和电 刺激等 2)获能处理:
2、 培养法：啮齿动物、 家兔和猪 化学法：牛、羊 5 3.受精 在获能溶 液或专用的受 精溶液中完成 受精过程 6 二、胚胎的早期培养 培养液: 水、无机盐、有机盐、维 生素、激素、氨基酸、核苷酸以 及动物血清等. 7 8 试管动物技术 是指通过人 工操作使卵子和 精子在体外条件 下成熟和受精， 并通过培养发育 成早期胚胎后， 再经移植产生后 代的技术。 9 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 （ ）和（ ）的培养体外受精早期胚胎 （1）体外受精： 概念采取雌性 动物的（ ） 和雄性动物的（ ），使其在（ ）中受精。 卵细胞 精子 试管 注：但发育的主要场所是（ ）母体 10 采集良种母牛的卵母
3、细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 胚胎移植 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂市场采集卵巢中的 卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 11 体外受精技术的用途： 1、研究哺乳动物生殖细胞的发生、受精和早期胚胎发育机制 2、用于优良家畜品种改良、缩短繁殖周期 3、体外受精技术也是其它胚胎工程技术的组成部分。 12 一、胚胎移植 胚胎移植： 将雌性动物的早 期胚胎，或者通过体外受 精及其他方式得到的胚胎 ，移植到同种的、生理状 态相同的其他雌性动物体 内，使之继续发育为新个 体的技术。 提供胚胎 供体 受体 胚胎工程的应用及前景 13
4、 3、胚胎移植的现状和意义 现状： 技术方法简便、实 用。 奶牛：一头供体牛每年可 产数十头小牛。 意义：充分发挥雌性优良 个体的繁殖潜力。 2、胚胎移植的实质：生产胚胎的供体和孕育胚胎的受 体共同繁殖后代 14 4、胚胎移植的主要生理学基础 是否成功 （1）哺乳动物发情排卵后， 生殖器官变化相同。 （2）早期胚胎形成后呈游离 状态，有利于胚胎收集。 （3）无免疫排斥反应。 （4）供体胚胎与受体子宫可建立正常 生理和组织联系，遗传特性不受影响。 15 5、胚胎移植的意义 （1）加速育种工作和品种改良 （2）大量节省购买种畜的费用 （3）一胎多产 （4）保存品种资源和濒危物种 （5）可充分发挥优
5、秀个体的繁殖潜能 缩短繁殖周期，增加一生繁殖的后代数量 16 选择供体母牛受体母牛 同期发情处理 超数排卵 供体公牛配种 冲卵 质量检查、培养 移植胚胎 妊娠检查 分娩（胚胎移植的犊牛） 6、胚胎移植的基本程序 17 7、胚胎移植成功与否要有两个条件 （1）胚胎移植一般应在同种的雌性供体和 受体之间进行。 （2）进行胚胎移植的供体和受体的生理状 态要相同。 18 二、胚胎分割 胚胎分割：采用机械 方法将早期胚胎切割 成2、4或8等份等， 经移植获得同卵双胎 或多胎的技术。 后代具有相同的遗传 物质，可看成无性繁 殖或克隆方法之一。 19 仪器 操作 胚胎 移植 透明带 滋养层 内细 胞团 DN
6、A 分析 显微操作仪 实体显微镜 20 胚胎干细胞：ES、EK。 特性：体积小、细胞核 大、核仁明显、全能 性、增殖不分化。 三、胚胎干细胞 受精 全能 细胞 囊 胚 内细胞团细胞 胎儿 生殖腺 细胞 胚胎干细胞 分离培养 21 1、概念：简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始 性腺中分离出来的一类细胞。 2、特点： （1）形态：体积小，细胞核大，核仁明显。 （2）功能：具有发育的全能性。可分化为成年动 物体内任何一种组织细胞.体外培养可增殖不分 化。 （3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不 发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行 遗传改造。 22 胚胎干细胞的培养 胚胎干细胞 特
7、定的组织细胞 增殖而不分化 牛黄酸、丁酰环腺苷酸 饲养层细胞 牛黄酸、丁酰环腺苷酸 23 专能干细胞多能干细胞全能干细胞 特 点 只能分化成一 种类型或功能 密切相关的两 种类型的细胞 能分化成多种 细胞或组织， 但不能发育成 完整个体 能形成机体 的所有组织 器官，发育 成完整个体 举 例 上皮组织基底 层的干细胞， 成纤维细胞 造血干细胞胚胎干细胞 胚胎干细胞 24 胚胎干细胞应用 （1）治疗人类顽症： 如帕金森综合症、少年糖尿病 等。（2）培育人造组织器官： 解决供体器官不足、免疫排斥 等。（3）研究体外细胞分化、细 胞凋亡的机理。 25 随堂练习 1、下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是 A、受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植 B、受体母畜必须处于与供体母畜同步发情状态 C、超数排卵技术要使用一定的激素 D、试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行 26 2、下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确的是 A、供体母牛必须是同一物种的良种 B、受体母牛必须是同一物种的良种 C、供体公牛必须是同一物种的良种 D、受体母牛可以是同一物种的一般健康牛 随堂练习 27 3、利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的重要原 因是 A、细胞分裂 B、细胞特化 C、细胞分化 D、细胞增殖 随堂练习 28
