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《实用生物信息技术》课程教学实例.doc

1、有用生物信息技术课程教学实例 有用生物信息技术课程教学实例以下四题,可按照本人课题实际情况,选择其中一道或两道1. 豌豆开花后特异表达基因及其编码内膜蛋白PPF11) 参阅文献(Zhu et al., 1998),及PubMed数据库中豌豆开花后特异表达基因PPF1相关研究论文,简述PPF1序列特征、表达特异性,以及可能的生物学功能。2) 检索UniProt数据库中豌豆内膜蛋白PPF1,总结该序列条目的一般注释信息、序列注释信息、数据库穿插链接。3) 找出拟南芥中PPF1同源蛋白ALB3,通过数据库穿插链接,阅读其编码基因在拟南芥资源库AraPort和TAIR中的注释信息,说明基因组定位、基因

2、构造、可变剪接方式、表达特异性、突变体,及其所编码的蛋白质的功能、亚细胞定位、组织特异性、互作蛋白、构造域特征,以及相关的文献资源。4) 利用读码框分析程序,分析并提取PPF1全长mRNA序列中编码区核苷酸序列和所编码的氨基酸序列。5) 利用密码子统计程序,分析豌豆PPF1和拟南芥中同源基因ALB3密码子使用特征; 利用内切酶分析程序,分析豌豆PPF1基因的酶切位点;利用引物程序,设计 PPF1基因mRNA序列的引物。6) 利用ProtScale蛋白质序列特征波形图显示工具,分析PPF1不同区域疏水和亲水、柔性和刚性、溶剂可及性、空间位阻、二级构造等序列特征。7) 利用多种跨膜螺旋预测程序,预

3、测PPF1跨膜螺旋,并比拟预测结果的异同;利用alpha-螺旋轮显示程序,绘制跨膜螺旋的螺旋轮,说明跨膜区的序列特征 。8) 利用PredicProtein蛋白质构造和功能预测网站,预测PPF1二级构造、无规卷曲、溶剂可及性、亚细胞定位、突变位点敏感性。9) 利用Phyre2网站,预测拟南芥PPF1三维空间构造,并用Run Investigator工具分析预测结果,与所用模板进展序列和构造比对。10) 通过以上PPF1及其同源蛋白ALB3实例,说明核酸和蛋白质序列分析思路和方法,以及分析结果对下一步实验研究的作用。2. 河豚鱼基因组序列片段和多药耐药基因分析1) 阅读刘勇博士摘要,简述研究目的

4、、方法和结果。阅读河豚鱼基因组测序打算相关论文,说明河豚鱼基因组特点。阅读Molecule of the Month有关多药耐药蛋白的文章,说明哺乳动物和细菌多药耐药蛋白的异同。2) 检索UniProt数据库中ABCB1基因家族,列表说明已通过人工批阅的序列条目;对上述序列进展多序列比对,说明比对结果。阅读人多药耐药基因蛋白质注释信息、文献报道和数据库穿插链接,说明其功能、亚细胞定位、组织特异性、互作蛋白、构造域特征,及其编码基因的基因构造、基因组定位、表达特异性、剪接变体等信息。3) 提取GenBank数据库中刘勇等提交的柯氏质粒河豚鱼基因序列片段全长序列,用点阵图方法确定其中是否包含重复片

5、段。4) 用Softberry网站中FGENESH等多种方法预测上述河豚鱼基因组第一个重复片段基因构造,比拟它与人ABCB1基因构造的异同。5) 用点阵图方法分析上述序列中第一个多药耐药基因MDR2所编码的氨基酸序列,说明是否有重复构造域。6) 用多种跨膜螺旋预测程序预测上述MDR2蛋白质序列中可能的跨膜螺旋。7) 用上述河豚鱼基因组多药耐药基因全长序列,分别用BlastN, BlastX和BlastP搜索核酸和蛋白质序列数据库,调理不同参数,比拟搜索结果。8) 通过以上河豚鱼柯氏质粒基因组序列片段分析过程,说明基因组序列分析的一般方法,所用软件品种和根本原理,以及不同软件的适用范围和优缺点。

6、3. 植物特异转录因子基因家族SBP分析1) 参阅文献(Guo et al., 2008),检索并阅读PubMed数据库中收录的植物特异转录因子SBP基因家族相关研究论文,简述该基因家族的研究背景。2) 检索UniProt数据库中SBP (包括SBP-like,即SPL)家族序列条目,提取拟南芥和水稻中该蛋白质家族已批阅的序列条目,进展多序列比对,构建系统发生树,与文献(Guo et al., 2008)中的系统发生树进展比拟,分析异同。3) 利用保守构造域识别网站MEME,鉴定拟南芥SBP家族不同成员的保守构造域,留意适当调整参数。4) 利用构造域识别网站SMART,分析拟南芥SPL1构造域

7、;通过PFam蛋白质家族和构造域数据库网站,分析SBP转录因子DNA结合构造域的序列、构造、功能。5) 阅读植物转录因子数据库PlantTFDB,查看SBP家族信息,查看拟南芥SPL1注释信息,通过注释信息中与其它数据库的穿插链接,查看其序列特征、构造域特征、亚细胞定位、组织特异性、互作蛋白、直系同源蛋白,以及其编码基因的基因构造、基因组定位、表达特异性等信息。6) 上述分析结果,并参阅SBP家族相关文献,说明如何将分析结果用于实验研究。4. 富含半胱氨酸多肽序列和构造分析1) 搜索网络资源和文献数据库,理解富含半胱氨酸的抗菌肽和蜘蛛毒素的序列、构造和功能特点。搜索网络资源和文献数据库,理解金

8、属硫蛋白的品种和特点,说明半胱氨酸在金属硫蛋白中的作用。2) 从PDB数据库下载虎纹捕鸟蛛毒素-I (1QK6)和美洲商陆抗菌蛋白(1DKC)氨基酸序列,用needle程序进展序列比对。3) 从PDB数据库下载多肽毒素1QK6, 1AXH, 1AGG, 1EIT, 1VTX, 1OMN的氨基酸序列,进展多序列比对;按照其构造特征,手动调整比对结果;说明二硫键配对方式。4) 检索UniProt数据库中以I型人金属硫蛋白(human metallothionein),进展多序列比对,并创立序列图标,说明其保守位点特征。5) 用蛋白质构造图形显示软件Swiss-PdbViewer分析1QK6和1DKC构造,说明其二硫键配对方式。选取两个分子中三对二硫键进展构造叠合,计算均方根误差。6) 从PDB数据库分别下载人金属硫蛋白alpha和beta和构造域核磁共振构造1MHU和2MHU,分析其构造特点,说明半胱氨酸与金属结合方式。7) 总结以上富含半胱氨酸的小分子蛋白质或多肽的序列、构造分析结果,说明序列、构造、功能、演化关系。

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