1、芦荟多糖的提取与应用n武汉大学天然产物化学及提取n学号：200722030139http:/ 研究的意义和必要性n2. 研究对象及其历史n3. 主要成分的提取分离流程n4. 分析方法与结果n5. 市场调研及经济技术分析1.研究的意义和必要性n芦荟(Aloe)：热带亚热带沙漠植物，属百合科多年生草本植物，具有肉 厚汁多的特点。n原产地在亚洲，地中海沿岸。芦荟品种繁多，已发现的芦荟类种类有500种以上，其中最有药用及保健功能价值的有：库拉索芦荟(Aloe Vera)，木剑芦荟(Aloe Arrborescens)，好望角芦荟(Aloe Ferox)，索科特芦荟(Aloe Porryi)；其中库拉索
2、芦荟是保健常用的芦荟，也是世界上销量最大的芦荟。n芦荟生长成熟期一般三年以上，具有强大的生命力和惊人的修复受损能力，因此对其进行研究具有重要意义。 备注：摘自（曹伟蜂芦荟多糖的研究进展）.研究芦荟的历史n芦荟作为民间传统草药已有4000多年的历史。涉及芦荟的古典药物著作有： 神龙本草经 本草纲目 欧洲的希腊草本 朝鲜的东岳宝鉴等 到目前为止，我们所知道的关于芦荟的最早记载，是古代埃及的医学书艾帕努斯巴皮努斯中所记录的，考古发现，在埃及，芦荟被放置在金字塔中木乃伊的膝盖之间。 备注：摘自（宋瑞峰，陈伟，叶舟 微胶囊技术用于芦荟多糖分离的研究 ）芦荟的化学成分n芦荟的成份是极其复杂的，特别是具有活
3、性功能的这部分。n目前已确定芦荟中含有丰富的多糖、蒽醌类物质、有机酸、蛋白质、氨基酸(约20多种)、维生素、叶绿素、矿物质、生物活性酶及甾类化合物等 备注：摘自（冯婷 ,董银卯,何聪芬 芦荟多糖精制工艺的研究 ）芦荟中的特殊活性物质n主要含有两大类:n一类是存在于芦荟叶底部 及表皮附近的芦荟素等蒽 醌类物质(简称芦荟苷) n另一类是从鲜叶中分离 出来的透明凝胶。 备注：摘自（冯婷 董银卯;何聪芬 芦荟多糖精制工艺的研究 ）芦荟核形分析http:/ 备注：摘自（曹伟峰芦荟多糖的研究 进展） 芦荟多糖的化学结构n国外对芦荟多糖化学结构的研究很早就开始，但由于芦荟种类繁多，且产地、生长期、种植加工等
4、条件不同均会造成多糖的组成和结构有所差异，因此在此方面的结论还是众说纷纭。其中以日本的Yagi教授和美国的Carrington实验室的研究最为广泛和突出。 芦荟粘多糖结构 备注：摘自( 冯婷, 董银卯,何聪芬 芦荟多糖精制工艺的研究 )3.多糖的提取方法n天然多糖主要是从自然界中的植物或农副产品中提取分离而得到的，常用的提取方法有 ：n.溶剂提取法（浸渍法 ，渗漉法 ，煎煮法 ，回流提取法 ，连续提取法 ）n.高速逆流色谱法 n.微波辅助提取法 n.超临界流体萃取法 n.超声波提取法 n.固相萃取法 微波辅助提取法n微波加热原理：n利用微波场中介质的偶极子转向极化和界面极化的时间与微波频率相吻
5、合的特点，促使介质转动能级跃迁，加剧热运动，将电能转化为热能。n从细胞破碎的微观角度看，微波加热导致细胞内的极性物质，尤其是水分子吸收微波能，产生大量的热量，使胞内温度迅速上升，水汽化产生压力使细胞膜（壁）破裂，产生微孔或裂纹，从而使细胞内物质更容易被溶剂溶出，达到提取目的。备注：摘自（张国庆,微波辅助提取黄酮和多糖类成分的新进展J,天津药学,2007年2月第l9卷第1期）微波辅助提取的特点 投资少，设备简单 适用范围广 重现性好，选择性高 操作时间短，溶剂耗量少，热效率高无噪音、无污染和易于自动化。 与传统煎煮法相比，克服了药材细粉易凝聚、易焦化的弊端 备注：摘自（张国庆,微波辅助提取黄酮和
6、多糖类成分的新进展J,天津药学,2007年2月第l9卷第1期）超声波提取法n超声波提取法原理：n超声波强化提取植物的有效成分，是一种物理破碎过程。超声波对媒质产生独特的机械振动作用和空化作用。当超声波震动时能产生并传递强大的能量，引起媒质质点以大的速度和加速度进入振动状态，使媒质结构发生变化，使有效成分进入溶剂中；同时在溶液中还会产生空化作用，即在有相当大的破坏力的作用下，液体内形成空化泡的现象。n药用植物的化学成分较为复杂，常规提取效果常不理想，近年来用超声波提取技术提取收到良好的效果，尤其是生物碱、苷类、挥发油等成分的提取。备注：摘自（张国庆,微波辅助提取黄酮和多糖类成分的新进展J,天津药
7、学,2007年2月第l9卷第1期）芦荟多糖的提取方法n多年来，国内外的研究者，特别是美、日、韩三国的科学家对芦荟活性成分的提取工艺及定性、定量进行了大量的研究工作，主要提取方法有：1.传统工艺法 2.Cobble热处理法3.Coats热处理法 4. Maret紫外光辐照处理法5. Maughan控温处理法 6. Coats冷处理法7. McAnalley 冷处理法 8. Luiz Cerqueria分步处理法备注：摘自（冯婷 ，董银卯，何聪芬 芦荟多糖精制工艺的研究 )Luiz Cerqueria分步处理法n主要依据： 芦荟叶肉和叶皮中所含的生物活性物不同，把二者分开加工可顺利除去主要存在于叶
8、皮中的芦荟素。n生产工艺: 新鲜芦荟叶洗净消毒，剥取凝胶，叶肉切碎、研磨、粗滤、均质以制取凝胶汁；将叶皮切碎，加水研磨、均质，然后加入活性炭搅拌吸附一定时间，再加入助滤剂过滤，得芦荟叶皮汁；合并凝胶汁和叶皮汁，在高温下短时间杀菌处理和稳定化处理，便可得稳定化的芦荟全叶汁。 备注：摘自 (冯婷 ,董银卯,何聪芬 芦荟多糖精制工艺的研究 )McAnaIIey 冷处理法n美国 McAnalley教授领导的Carrington实验室经过多年研究，分离出一种冻干后不再降解的，由 (14)键接的活性粘多糖Carrisyn，并证明它就是芦荟的主要活性成分。n分离提纯的工艺过程可简述为:将芦荟叶洗净，去皮，磨
9、碎成浆，除去纤维质，醇沉，离心过滤，冷冻干燥等几步。 备注：摘自 (冯婷 ,董银卯,何聪芬 芦荟多糖精制工艺的研究 )Carrisyn的应用n作为一种生物制剂广泛用于治疗：胃肠道疾病免疫类疾病癌症艾滋病等nCarrisyn取得了惊人的医疗效果。但Carrisyn仍是一种多糖的混合物，其中可能存在中性多糖、酸性多糖和糖蛋白。备注：摘自备注：摘自 ( (冯婷冯婷 , ,董银卯董银卯, ,何聪芬何聪芬 芦荟多糖精制工艺的研究芦荟多糖精制工艺的研究 ) )McAnalley提取实验方法n取1kg芦荟叶用次氯酸钠溶液冲洗、消毒。去除芦荟叶的叶尖、根部和皮，切成凝胶薄片。n放入均浆器制成匀浆。n六层纱布过
10、滤，收集过滤液，调pH到33.5，按1：4比例加入95 乙醇，搅拌2030min。静置34h。n去上清，将沉淀加入去离子水适量，混合搅拌若干分钟，按1：4加入乙醇，搅拌30min，静置2h，得沉淀。n去上清，沉淀于2000g离心lOmin。n沉淀转入冻干机中冻干，所余基本为芦荟多糖。 备注：摘自 (冯婷 ,董银卯,何聪芬 芦荟多糖精制工艺的研究 )McAnalley提取工艺流程n芦荟叶清洗，次氯酸钠消毒去皮匀浆调33.5滤液6层纱布过滤加四倍体积95乙醇搅拌2030min静置 冻干 离心 合并沉淀 对沉淀反复用乙醇洗涤芦荟粗多糖芦荟多糖的分离纯化n用上述方法提取出来的芦荟多糖只是一种多糖的混合
11、物，其中可能存在中性多糖、酸性多糖、单糖、低聚糖、蛋白质和无机盐，必须进一步分离纯化。 .除蛋白质常用的去除蛋白质的方法有：Sevag法、三氟三氯乙烷法和三氯醋酸法。这些方法的原理是使多糖不沉淀而使蛋白质沉淀 .分离纯化针对芦荟多糖的特性，可选择不同的分离纯化方法，如根据多糖分子大小和形状的不同，采用凝胶过滤色谱法、膜分离法、根据多糖分子的电荷特性可采用离子交换色谱法。 备注：摘自（太江超芦荟多糖的分离纯化及分析综述）芦荟多糖的气象色谱分析备注：摘自（陈洪亮李德发常碧影张家祥付绪栋芦荟多糖的提取及结构分析）超声波提取芦荟多糖n传统方法提取芦荟多糖工艺流程原料清洗去皮称重打浆按比例加水加热浸提抽
12、滤清液保留。残渣再提取，合并提取液浓缩除蛋白加95 乙醇沉淀复溶后再加95 乙醇沉淀反复三次无水乙醇洗涤沉淀多糖低温真空干燥芦荟粗多糖超声波法提取芦荟多糖工艺流程浸提过程在超声波场中进行，其余同上。 备注：摘自（吴广枫张拥军 汤坚超声波用于芦荟多糖提取的研究）备注：摘自（顾文秀，许芳萍，鞠炜渭，朱传征超声波协助提取芦荟多糖的研究）.分析方法与结论备注：摘自（顾文秀，许芳萍，鞠炜渭，朱传征超声波协助提取芦荟多糖的研究）结果分析n常规提取方法最佳条件的确定。表1表明，影响芦荟多糖提取的因素主次为BEDCA，最佳提取工艺为ABCDE，即浸提2次，浸提温度80，料液比l：3，提取时间4 h，醇沉浓度8
13、0。最佳工艺条件下的验证值为.3480。 备注：摘自（顾文秀，许芳萍，鞠炜渭，朱传征超声波协助提取芦荟多糖的研究）n超声波协助提取最佳条件的确定。表2表明，影响芦荟多糖提取的因素主次为BEDCA，最佳提取工艺为A1B4C3D3E3，即浸提1次，浸提温度80 ，料液比1：3，超声时间40 min，醇沉浓度70。最佳工艺条件下的验证值0.4812%。备注：摘自（顾文秀，许芳萍，鞠炜渭，朱传征超声波协助提取芦荟多糖的研究）结论n常规提取法的最佳提取工艺为：浸提2次，浸提温度80，料液3，取时间4 h，醇沉浓度80。n超声波协助提取芦荟多糖的最佳条件为：浸提1次，浸提温度80 ，料液比1:3，提取时间
14、40 min，醇沉浓度70。n在各自的最佳工艺条件下比较其得率，超声波法得率是常规法的1.38倍，且所用沉淀剂乙醇较少，提取时间大大缩短(由4 h缩短至40 min)，只需浸提1次，可提高效率，简化提取工艺，节约成本，因此将超声波用于芦荟多糖的提取工艺有一定实用价值。备注：摘自（顾文秀，许芳萍，鞠炜渭，朱传征超声波协助提取芦荟多糖的研究）备注：摘自（吴广枫，张拥军，汤坚超声波用于芦荟多糖提取的研究）芦荟多糖的药用功效 芦荟是一种药用价值很高的种植物，对它的药效很早就被发现，因长期以来未经科学验证，芦荟一直被看成偏方，应用范围受到一定的限制。近二三十年来，一些发达国家，如美国、日本、韩国等国家己
15、形成大产业，尤其是日本，对芦荟进行了许多深入的研究。医疗范围涉及内、外、妇、儿、皮肤、五官等各科，其功效大致可概括为： .免疫调节作用 .抗肿瘤作用 .抗紫外线辐射作用 .促造血作用 .抗真菌，病毒作用http:/ 芦荟汁液系天然萃取物，含有多种对人体有益的保湿剂和营养效果。n科学研究认为，芦荟中含有聚糖的水合产物葡萄糖、甘糖露、少量的糖醛酸和钙等成份；还有少量水合蛋白酶、生物激素、荷尔蒙、蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质及其它人体所需的微量元素。因此，芦荟便具备保湿和防晒的功能，对美容效果极佳。 http:/ 批准应用于人体治疗艾滋病的药物，震惊了芦荟工业。n近几年“国际芦荟科学协会”提出，芦
16、荟除了作为食品、药物和化妆品以外，还能作为功能性食品，可经常定量服用(Dietary Supplement)。http:/ 芦荟美容保健产品http:/ http:/ Living Products）是美国芦荟产业界的巨头，也是世界上最大的芦荟公司，1998年销售额13亿美元。备注：摘自（美国永久产品公司(ForeverLivingProducts)2003年调研报告）http:/ 芦荟鲜叶 中国山东省 零售块片，批发块片，起批量5000 片。n库拉索鲜叶 浙江上虞 零售6块片，4.5块片，起批量100片， 各种大小均有售。n日本木立 芦荟鲜叶零售4块片，批发 2.5块片。n芦荟鲜叶 苏州 零售5块片，批发4块片。n元江芦荟 零售4块片，批发2块片。http:/ 郑州海洋科技实业有限公司n北京昭贵科技开发有限责任公司 n北京安琪尔芦荟有限公司n湖南常德市碧康生物科技开发有限公司n海南彼特福生物工程有限公司n广西万山茶业有限责任公司
