1、环境监测生物安全管理技术导则1 适用范围本标准规定了环境监测生物安全风险等级分级、环境监测全过程个体防护要求、实验室安全防护要求和生物安全管理程序等内容。本标准适用于环境监测领域生物安全防护，也可作为管理部门进行环境生物安全管理的技术依据。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 18466 医疗机构水污染物排放标准HJ 1001 水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法JG 170 生物安全柜HGT 20570.14 人身防护应急系统的
2、设置3 环境监测生物安全风险等级分级依据受病原微生物的传染性、感染后对个体或群体的危害程度及环境监测对象和过程等特点，将环境监测生物安全风险等级分为低风险和高风险两个等级，对应的实验室安全防护水平等级、环境监测对象和过程见表1。表1 环境监测生物安全风险等级风险等级实验室安全防护水平等级环境监测对象和过程低风险一级（BSL-1）（1） 未受病原微生物感染地表水、地下水、海水、土壤、沉积物、空气和废气样品（2） 消毒后的医疗废水、生活污水、工业废水、固体废物样品高风险常规高风险二级（BSL-2）（1） 受感染的地表水、地下水、海水、土壤、沉积物、医疗废水、生活污水、工业废水、空气和废气样品（2）
3、 医疗机构废水、污水处理厂、医疗废物和生活垃圾焚烧等样品（3） 病原微生物培养（4） 疫情期间采集的经消毒处理后污水处理厂、医疗废水、医疗垃圾等样品疫情期间4 环境监测全过程个体防护要求4.1 采样过程防护要求4.1.1 低风险样品采集要求采集低风险样品时，采样前应准备工作服、防水手套、防水靴等个体防护装备，采样过程中需穿、戴个体防护装备，采样结束后应清洁冲洗。4.1.2 常规高风险样品采集要求采集常规高风险样品时，采样前应准备工作服、工作帽、75%酒精或酒精湿巾、医用一次性口罩、防水手套、一次性手套、防毒面具、防水靴、密封袋等个人防护装备。采样过程中，按监测对象注意。监测污水处理厂时，应穿工
4、作服，佩戴工作帽；入口样品不采集；出口样品采集前，应用余氯试纸进行预测，合格后方可采样，不合格不采样。监测医疗废水时，入口样品不采集；出口样品采集前，应用余氯试纸进行预测，合格后方可采样，不合格不采样；样品采集时，应穿工作服，佩戴工作帽，穿防水靴，戴双层乳胶手套，外层戴防水手套。监测垃圾焚烧废气时，除水采样防护用品外，还需佩戴防毒面具。采样结束后，在离开作业区途中不要摘下口罩、手套、防毒面具。离开作业区后应用清水冲洗鞋底，再喷洒酒精消毒。然后取下口罩、手套和防毒面具，并将双层手套分别放入塑料袋内，喷洒75%的酒精溶液消毒后，将塑料袋密封；防毒面具单独放置在密封袋中。口罩应一次性使用，放弃的防护
5、用品应放置到用于集中收集的垃圾桶或垃圾袋内，进行集中处理。回到单位后，应立即洗手，换下的工作服、工作帽、防水靴等，应放置在专用区，随后再次洗手。如有条件采样人员应全面洗澡。工作服和工作帽应清洗消毒后再次使用，防水靴应清洗外表消毒后再次使用，防毒面具应进行消毒和更换滤芯。采样和现场监测的仪器设备在入库前应用75%酒精喷洒相关部位进行二次消毒后，在用清水冲洗，晾干后保存。4.1.3 疫情期间样品采集要求疫情期间，污水处理厂、医疗废水、医疗垃圾以查看质量监控记录为主。如必须采集样品，则样品的采集过程按照疾控部门发布的防护要求进行相应防护。采样前应准备工作服、工作帽、75%酒精或酒精湿巾、一次性医用外
6、科口罩及N95口罩、防水手套、一次性手套、防毒面具、防护眼镜、防水靴、密封袋等个人防护装备。采样过程中需穿、戴个体防护装备。采样结束后，按照疾控部门发布的防护要求进行相应防护用品处置及无害化处理。4.2 样品运输过程防护要求4.2.1 低风险样品运输要求运输低风险样品时，应有防止样品瓶破损、倾倒等措施。4.2.2 常规高风险样品运输要求运输常规高风险样品时，采样瓶应有防撞措施，瓶口应能密封，必要时可用封口膜密封。样品搬运过程中应佩戴一次性手套和防水手套。样品运输应由专人负责，专车运送，不得通过公共交通工具运输。4.2.3 疫情期间运输要求疫情期间，按照疾控部门发布的防护要求进行防护。可能含高致
7、病性病原微生物的样品应按照可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定执行。样品运输应由专人负责，专车运送，不得通过公共交通工具运输。4.3 样品分析过程防护要求4.3.1 低风险样品分析要求低风险样品交接时按常规防护，化学项目按常规要求分析，微生物项目按BSL-1级生物安全实验室要求防护。4.3.2 常规高风险样品分析要求常规高风险样品交接时应佩戴防护手套，交接完毕后，样品箱等器具应清洗消毒后再次使用。样品交接过程中应佩戴一次性防护手套、口罩。化学项目分析时，样品消毒后方可在BSL-1级生物安全实验室中进行分析，消毒后对样品产生影响的项目可不进行化学分析。为避免样品意外撒漏和溢
8、出，应使用实验室内样品保存器具，可固定样品瓶、样品桶，使其保持直立，并可高压灭菌或消毒。微生物项目应在BSL-2级生物安全实验室中进行样品分析，并按照BSL-2级生物安全实验室生物安全防护要求进行个人防护。4.3.3 疫情期间样品分析要求疫情期间，样品交接时对样品外部全面清洁消毒后方可进入样品室。样品交接过程中应佩戴一次性防护手套、口罩，并按照疾控部门发布的防护要求进行防护。化学项目分析，非必要不进行高风险样品分析，如必须进行，应按照疾控部门发布的生物安全防护要求进行个人防护，并将样品消毒灭菌后方可在BSL-1级生物安全实验室中进行化学分析。样品分析过程中应佩戴一次性医用防护口罩、一次性防护手
9、套、防护眼镜，必要时穿戴一次性防护服。微生物项目分析，非必要不进行高风险样品分析，如必须进行样品分析，应按照疾控部门发布的生物安全防护要求进行个人防护。无论低风险样品或高风险样品，均应在BSL-2级以上生物安全实验室中进行样品分析，并按照相应要求进行个人防护。4.4 废弃物无害化处理防护要求4.4.1 低风险样品废弃物处置要求盛放低风险样品的器具使用后进行常规洗刷。微生物培养后的培养基等废弃物，无论阴性、阳性，均应高压灭菌后，按照普通垃圾弃置。4.4.2 常规高风险样品废弃物处置要求盛放常规高风险样品的器具使用后需经高压灭菌后，按照常规程序洗刷或弃置。微生物培养后的培养基等废弃物，无论阴性、阳
10、性，均应高压灭菌后，按照普通垃圾弃置。废弃的外包装、防护用品应放置在塑料袋中密封，消毒后弃置。4.4.3 疫情期间废弃物处置要求疫情期间，样品盛放器具使用后需经高压灭菌后，按照医用垃圾进行弃置，或按照疾控部门的相关要求进行弃置。微生物培养后的培养基等废弃物，无论阴性、阳性，均应高压灭菌后，按照医用垃圾进行弃置，或按照疾控部门的相关要求进行弃置。5 实验室安全防护要求5.1 实验室建设要求检测理化指标的实验室按BSL-1级实验室设计和管理，检测生物指标的实验室按BSL-2级实验室设计和管理。5.2 实验室人员生物安全防护要求5.2.1 BSL-1级实验室生物安全防护要求，工作人员进入实验室应穿工
11、作服，实验时应戴手套，必要时应戴眼罩。离开实验室时，工作服必须脱下留在实验区内，不得穿着进入办公区等清洁区域。用过的工作服应定期消毒。5.2.2 BSL-2级实验室生物安全防护要求，除符合BSL-1级要求外，进入实验室时，应在工作服外加隔离服或防护服，戴帽子、口罩。一次性手套不得清洗和再次使用。当微生物操作不可能在安全柜内进行，而必须在开放实验台操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置如护目镜、面罩、个体呼吸防护用品或其他防溅出保护设备。5.3 实验室相关设备生物安全防护要求按照GB 18466 、HJ 1001、JG 170和HGT 20570.14等的相关规定，实验室相
12、关设备应符合表2要求。表2 实验室相关设备生物安全防护要求设备类别设备名称设备要求采样设备微生物专用采样器微生物专用的单层和多层采水器。微生物样品瓶带螺旋帽或具磨口玻塞的500ml广口玻璃瓶，500ml广口塑料瓶。消毒用品用具酒精棉球、酒精喷壶、抹布或纸巾、急救箱等。现场监测设备余氯试纸测量范围0.051 mg/L；0.510 mg/L。便携式余氯测定仪测量范围010mg/L，最小示值0.001mg/L。防护装备口罩、手套、护目镜、防护服、鞋套等。消毒用品酒精棉球、酒精喷壶等。运输设备保温箱、冷藏箱放置冰袋的保温箱或带制冷功能的冷藏箱保存，应便于消毒。防震样品箱有防震措施的样品箱，应便于消毒。
13、实验室微生物检验设备电热干燥箱（干热灭菌箱）能提供均匀适当的17010的灭菌温度。控温范围：RT+5300；温度均匀性（150）：2；温度波动度（150）：0.5。高压蒸汽灭菌器能提供均匀的高达121的高压灭菌温度，使用温度为115 及121 。具压力安全连锁装置、过温保护装置、断水保护控制等。恒温培养箱使用温度37 1及44 0.5 ；培养架上温度变化不可超过0.5 。生物安全柜A2型生物安全柜，70%内循环，30%外排。高效空气过滤器对0.12及0.3m的微粒阻截效率99.999%。便携式培养箱温控精度不高于0.5 ，显示温度精确到0.1 。喷淋洗眼装置实验室30米内安装喷淋洗眼装置。6
14、生物安全管理程序6.1 管理要求和制度建设生态环境监测生物安全管理要求包括组织管理、人员管理、感染性物质的管理、设施设备的管理、实验室活动管理和内务管理。制度建设包括管理体系、质量控制、实验室内应急与报告。6.2 安全手册制定生态环境监测实验室应编制生物安全手册，根据需要确定内容，按照包含的具体内容应依次给出以下内容：a） 紧急电话、联系人；b） 实验室平面图、紧急出口、撤离路线；c） 实验室标识系统；d） 生物安全；e） 消防；f） 个体防护；g） 危险废物处理和处置；h） 事件、事故处理的规定和程序；i） 从工作区撤离的规定和程序。6.3 应急措施要求6.3.1 采样过程中应急处置，根据遭
15、遇情况可进行如下处置。a） 高风险样品采集过程中，如样品瓶破碎，应穿戴好防护装备，用镊子将样品瓶碎片捡出，放入可密闭塑料袋中，带回实验室，灭菌后弃置，或用含氯消毒剂消毒后弃置。用纸巾覆盖并吸收洒溢水样，并用酒精或消毒剂喷洒纸巾及周围区域。将纸巾和手套装入塑料袋密封，带回实验室，灭菌后弃置。b） 高风险样品采集时，如水样喷溅，应脱下防护鞋套、防护服、手套、口罩、帽子，用酒精擦洗暴露部位，尽快洗澡。c） 高风险样品采集过程中，如遇刺伤、割伤，应脱下防护装备，清洗双手和受伤部位，使用适当的皮肤消毒剂，必要时进行医学处理。6.3.2 运输过程中应急处置，根据遭遇情况可进行如下处置。a） 运输过程中，如
16、高风险样品瓶破碎，应戴好防护装备，用镊子将样品瓶碎片捡出，放入可密闭塑料袋中，带回实验室，灭菌后弃置，或用含氯消毒剂消毒后弃置。b） 运输过程中，如高风险样品洒溢，样品瓶未破碎的，用酒精对外表消毒。样品箱用纸巾或抹布覆盖，喷洒含氯消毒剂，至少半小时后擦净。6.3.3 生物实验室应急处置，根据遭遇情况可进行如下处置。a） 如遇刺伤、切割伤或擦伤，受伤人员应当脱下防护服，清洗双手和受伤部位，使用适当的皮肤消毒剂，必要时进行医学处理。要记录受伤原因和相关的微生物，并应保留完整适当的医疗记录。b） 如遇潜在感染性物质的食入，应脱下受害人的防护服并进行医学处理。报告食入材料的鉴定和事故发生的细节，并保留
17、完整适当的医疗记录。c） 如遇潜在危害性气溶胶的泄漏（在生物安全柜以外），所有人员必须立即撤离相关区域，任何暴露人员都应接受医学咨询。应立即通知实验室负责人和生物安全员。为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内（例如1h内）严禁人员入内。如果实验室没有中央通风系统，则应推迟进入实验室（例如24h）。应张贴“禁止进入”的标志。过了相应时间后，在生物安全官员的指导下来清除污染。应穿戴适当的防护服和呼吸保护装备。d） 如遇容器破碎及感染性物质的溢出，应当立即用布或纸巾覆盖受感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品。然后在上面倒上消毒剂，并使其作用适当时间。然后将布、纸巾以及破碎物品清理掉；
18、玻璃碎片应用镊子清理。然后再用消毒剂擦拭污染区域。如果用簸箕清理破碎物，应当对它们进行高压灭菌或放在有效的消毒液内浸泡。用于清理的布、纸巾和抹布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。在所有这些操作过程中都应戴手套。如果实验表格或其他打印或手写材料被污染，应将这些信息复制，并将原件置于盛放污染性废弃物的容器内。e） 对于火灾和自然灾害的防范，制定应急预案时，应包括消防人员和其他服务人员。应事先告知他们哪些房间有潜在的感染性物质。要安排这些人员参观实验室，让他们熟悉实验室的布局和设备。发生自然灾害时，应就实验室建筑内或附近建筑物的潜在危险向当地或国家紧急救助人员提出警告。只有在受过训练的实验室工作人
19、员的陪同下，他们才能进入这些地区。感染性物质应收集在防漏的盒子内或结实的一次性袋子中。由生物安全人员依据规定决定继续利用或是最终丢弃。6.3.4 实验室急救装备，必须配置急救箱（包括常用和特殊的解毒剂）和合适的灭火器和灭火毯等紧急装备。6.3.5 疫情期间，如发生暴露，应按照以下步骤启动应急措施：a） 与同行人员进行隔离，避免传染扩散；b） 对防护服、手套、鞋套等进行外表消毒；c） 在安全区域按程序脱下防护装备；d） 再次消毒；e） 电话通知疾控相关部门；f） 按照相关部门规定的流程处置、就医；g） 进行相应的隔离和医学观察、检测、治疗；h） 按照规定居家隔离期间，不要擅自出门；i） 隔离结束，相关部门确认后，恢复工作。
