1、 ，评价技术与方法 作者简介 沈心，女，主管药师，研究方向：药物分析。：通讯作者 周震宇，男，副主任药师，研究方向：药物分析。：顶空气相色谱法测定注射用美罗培南中残留溶剂沈心，周震宇（苏州市药品检验检测研究中心，江苏 苏州 ）摘要 目的：建立顶空气相色谱法同时测定乙醇、丙酮和乙酸乙酯 种有机溶剂，检查国内已上市注射用美罗培南制剂中残留溶剂，有效评价国内各生产企业的产品与原研药之间的差异，可作为一致性评价的补充依据。方法：使用火焰离子化检测器气相色谱仪检测，色谱柱为 石英毛细管柱（，），柱温。结果：实验结果显示，种待测有机溶剂乙醇、丙酮和乙酸乙酯线性关系良好，相关系数均大于 ，定量限在 ，检测限
2、在 ，平均回收率在 。结论：本法操作简单，结果准确，可测定不同生产企业的注射用美罗培南中残留溶剂，有效判断国内产品与原研药的工艺差别。关键词 顶空气相色谱法；注射用美罗培南；残留溶剂；一致性评价 中图分类号 文献标志码 文章编号 （），（，）：，：（）：；美罗培南属于碳青霉烯类抗生素，由日本住友制药株式会社研发，具有抗菌谱广，抗菌活性强等特点，其制剂注射用美罗培南临床多用于治疗混合感染和严重感染 。查询国家药品监督管理局国产药品数据库查询结果显示，国内共有 家生产企业取得注射用美罗培南的批准文号，其中国内药品生产企业 家，进口药品生产企业 家。对比各企业产品执行标准，发现仅原研药（大日本住友制
3、药有限公司）执行进口药品标准 控制产品的丙酮残留量，限度为丙酮不得过 ，其余标准均未控制产品中有机溶剂残留量 。目前测定注射用美罗培南中残留溶剂的相关文献未见报道，不同生产企业的美罗培南原料药合成工艺各不相同，结合对国内各生产企业提供的原料药残留溶剂检测结果可知 ，美罗培南可能检出丙酮、乙醇和乙酸乙酯三种有机溶剂。因此拟建立气相色谱法同时测定注射用美罗培南中丙酮、乙醇和乙酸乙酯的残留量，以期通过对有机溶剂残留量的考察，有效区别产品的合成工艺，评价国内产品与原研药的差异，作为一致性评价的补充依据。材料 仪器安捷伦 型气相色谱仪（安捷伦科技中国有限公司，色谱数据处理工作站）；年第 卷第 期 型电子
4、天平（瑞士梅特勒托利多公司）。药物与试剂无水乙醇（纯度：，批号：）、乙酸乙酯（纯度：，批号：）、丙酮（纯度：，批号：）（国药集团化学试剂有限公司），水为超纯水。样品注射用美罗培南均来自 年国家药品抽检。方法与结果 色谱条件色谱条件参照前期研究美罗培南原料药残留溶剂检测条件 ，以 氰丙基苯基 二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱（，）；载气为氮气，流量为 ；柱温为 ；进样口温度为 ，检测器（）温度为 ；采用顶空分流进样，分流比为：；顶空瓶平衡温度为 ，平衡时间 。溶液配制 系列混合对照品溶液取丙酮、乙酸乙酯和无水乙醇适量，加水稀释成质量浓度分别为 、和 的混合对照品储备液，再用逐级稀释法制得
5、丙酮质量浓度分别为 、，乙酸乙酯质量浓度分别为 、，乙醇质量浓度分 别 为 、的系列混合对照品溶液。精密量取 ，置 顶空瓶中，摇匀，密塞，即得。样品溶液取注射用美罗培南细粉约 ，精密称定，置 顶空瓶中，精密加入水 ，摇匀，密塞，即得。空白溶液精密量取水 ，置 顶空瓶中，密塞，即得。方法学考察 专属性试验取 项下混合对照品溶液、供试品溶液和空白溶液，按 色谱条件进样分析，各组分色谱峰的理论板数均不低于 ，各色谱峰间达到基线分离，空白溶液对测定无干扰，见图 。空白溶液；混合对照品溶液；供试品溶液；乙醇；丙酮；乙酸乙酯图 对照品和供试品典型色谱图 ，评价技术与方法 线性方程、定联系和检出限取 项下丙
6、酮、乙酸乙酯和乙醇的系列混合对照品溶液，按 色谱条件进样分析，记录色谱图，并将峰面积（）与其浓度（）进行线性回归。取各组分最低质量浓度的混合溶液，逐级稀释，测定并记录色谱峰面积，以信噪比 对应的质量浓度作为定量限，以信噪比 对应的质量浓度作为检出限，结果见表 。精密度试验取混合对照品溶液（丙酮质量浓度为 ，乙酸乙酯质量浓度为 和乙醇浓度为 ），重复进样 次，测得峰面积，计算丙酮、乙酸乙酯和乙醇的峰面积 分别为 、和 ，结果表明仪器和色谱条件具有良好的精密度。重复性试验取一批样品（大日本住友制药有限公司，批号 ），平行制备 份供试品溶液，份样品均 仅 检 出 丙 酮，丙 酮 残 留 量 的 为
7、，说明该方法的重复性良好。稳定性试验取对照品溶液，分别于室温下放置 、，按 色谱条件项下方法测定，结果丙酮、乙酸乙酯和乙醇的峰面积 分别为 、和 ，说明溶液在 内基本稳定。加样回收试验称取已知含量的样品（大日本住友制药有限公司，批号 ）细粉约 ，精密称定，共份，置 顶空瓶中，按低、中、高三个浓度分别精密加入丙酮、乙酸乙酯和乙醇混合对照品溶液 ，密塞，摇匀，按 色谱条件进样分析，计算加样回收率，见表 。表 各组分线性关系、定量限和检出限组分线性方程线性范围（）（）（）丙酮 乙酸乙酯 乙醇 表 残留溶剂回收率实验结果组分原有量（）加入量（）测定量（）回收率（）平均回收率（）（）丙酮 乙酸乙酯未检出
8、 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 乙醇未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 年第 卷第 期 样品测定结果按 色谱条件进样分析，对本次抽验的 家企业 批次样品进行检测，结果见表 ，可见部分生产企业的产品中除检出丙酮残留外，同时检出乙酸乙酯与乙醇，与美罗培南原料药残留溶剂项下检测结果一致 ，结合注射用美罗培南直接混粉灌装的生产工艺，推测制剂中的残留溶剂来自原料药；其他生产企业样品仅检出丙酮。表 各生产企业注射用美罗培南中残留溶剂的测定结果生产厂家批数有机溶剂残留量平均值（）丙酮乙酸乙酯乙醇 （一致性）原研药（日本住友）注：表中“”为
9、未检出 讨论对仅检出丙酮残留的注射用美罗培南生产企业的测定结果作统计分析，可以看出原研药的丙酮残留量均值为 ，明显低于其他生产企业；企业 通过一致性评价的产品相比于未通过一致性评价的产品丙酮残留量显著减少，丙酮残留量均值由 降至 ，残留溶剂控制水平优于原研药；其他生产企业的产品丙酮残留量均偏高，建议相关企业重视残留溶剂的控制，提高产品质量，降低用药风险。建立气相外标色谱法对国内各厂家注射用美罗培南中残留溶剂进行测定，方法操作简单，灵敏度高，准确度高。原研药和企业 通过一致性评价的产品丙酮残留量小于 ，且未检出乙醇和乙酸乙酯。通过拟定的注射用美罗培南残留溶剂测定法对丙酮残留量进行考察，可有效判断
10、国内生产企业的产品与原研药之间的工艺差别，也可以有效区分国内生产企业的质控水平，建议将此项目作为仿制药质量一致性评价的重点关注项目之一。在一致性评价工作中，建议企业在原料药的精制过程中，尽量避免或少用除丙酮以外的其他溶剂，做好残留溶剂的质量控制，将丙酮残留量控制在 以下。参考文献 黄金竹，母连军 碳青霉烯类抗生素的研究概况 国外医药抗生素分册，（）：魏立平，刘成红，倪明，等 国产注射用美罗培南质量评价 中国抗生素杂志，（）：孔爱英，陈启立，王子东 注射用美罗培南中聚合物杂质测定及其评价 中国药学杂志，（）：国家食品药品监督管总局进口药品注册标准 ，国家药典委员会中华人民共和国药典 年（二部）北京：中国医药科技出版社，国家食品药品监督管总局进口药品注册标准 ，国家食品药品监督管总局标准 ，国家食品药品监督管总局标准 ，国家食品药品监督管总局标准 ，国家食品药品监督管总局标准 ，周震宇，沈心 顶空气相色谱法测定美罗培南的残留溶剂 西北药学杂志，（）：（收稿日期：）
