1、山东畜牧兽医山东畜牧兽医山东畜牧兽医山东畜牧兽医 2023年第年第年第年第44卷卷卷卷 6 东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感抗体检测与分析 闫颖颖1，陈士星2，胡传利1，李艳阳1，陈新华1（1.江苏省东海县畜牧兽医站，江苏 东海 222300；2.江苏省东海县石榴街道农村经济和农业技术服务中心，江苏 东海）摘要：为全面评估东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感疫苗的免疫效果，本研究收集全县19个乡镇47个小规模蛋鸡养殖场不同月份（4月、8月、12月）的血清样本1 460份，采用血凝与血凝抑制方法对样本进行抗体检测。结果显示，所收集的1 460份样品，高致病性禽流感H5亚型（Re-13）的抗体
2、合格率为93.21%；高致病性禽流感H5亚型（Re-14）的抗体合格率为90.27%；高致病性禽流感H7亚型（Re-4）的抗体合格率为89.22%。不同时间段的样品，其中8月份的抗体合格率最低，高致病性禽流感H5亚型（Re-13、Re-14）和H7亚型（Re-4）的抗体合格率分别为84.63%、76.72%、80.35%，且抗体离散程度较高。4月和12月的抗体合格率较高，且抗体离散程度较低。结果表明，东海县小规模蛋鸡养殖场高致病禽流感的免疫抗体水平达到了农业部的标准，为本县高致病性禽流感的防控提供了参考依据。关键词：蛋鸡；高致病性禽流感；血凝与血凝抑制；免疫抗体 中图分类号：S858.31 文
3、献标识码：A 文章编号：1007-1733（2023）10-0006-03 禽流感是严重危害养禽业发展的烈性传染病，尤其是高致病性禽流感的发病率和致死率均较高，一旦发生，对养殖业造成巨大的危害和经济损失，被世界动物卫生组织认定为A类动物疫病，我国也将其列为一类动物疫病1。目前，我国对高致病性禽流感采取强制免疫的方式进行防控。东海县是传统的蛋鸡养殖县，蛋鸡养殖多为存栏13万羽的小规模养殖场。为全面评估东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感免疫效果，本研究收集了47个小规模蛋鸡养殖场在不同时间的血清样本共计1 460份，并进行了检测分析，以期为本地区更好地防控高致病性禽流感提供理论依据和参考。1 材
4、料与方法 1.1 材料 1.1.1 血清采集 血清样本来源辖区内的小规模蛋鸡养殖场，免疫注射的高致病性禽流感疫苗均为政府采购疫苗（青岛易邦、吉林冠界、哈药），分别于于4月、8月、12月采集血清样本1 460份，见表1。1.1.2 器材 采血器、离心机、2 mL离心管、微量移液器、96孔V型微量凝集试验板、微量振荡器等。表1 采样情况 血清样品数/份 采样场点类型 场点数量（个）4月 8月 12月 小规模蛋鸡养殖场 47 487 462 511 合计 1460 1.1.3 试剂 高致病性禽流感H5N6 Re-13、H5N8 Re-14、H7N9 Re-4血凝抑制试验抗原及阴阳性血清。1.2 方法
5、 抗体检测参照高致病性禽流感诊断技术（GB/T 18936-2020），采用血凝与血凝抑制试验（HA/HI）对血清样品进行禽流感抗体检测。抗体效价24（4log2）判定为免疫合格，标准差与平均值的比值（变异系数）可反映出抗体效价的离散度。2 结果 2.1 不同时间高致病性禽流感抗体检测合格率 东海县小规模蛋鸡养殖场不同时间高致病性2023年第年第年第年第10期期期期（总第总第总第总第315期期期期）试验研究试验研究试验研究试验研究 7 禽流感抗体检测合格率见表2。表2 高致病性禽流感不同时间检测合格率 4月 8月 12月 检测项目 样品数（份）合格数（份）合格率（%）样品数（份）合格数（份）合
6、格率（%）样品数（份）合格数（份）合格率（%）H5N6 Re-13 452 92.81 395 85.50 497 97.26 H5N8 Re-14 446 91.58 382 82.68 505 98.83 H7N9 Re-4 487 441 90.55 462 394 85.28 511 495 96.87 由表2可知，东海县小规模蛋鸡场4月检测高致病性禽流感487份，H5N6 Re-13抗体合格数为452份，抗体合格率为92.81%，H5N8 Re-14抗体合格数为446份，抗体合格率为91.58%，H7N9 Re-4抗体合格数为441份，抗体合格率为90.55%；8月检测462份，H5
7、N6 Re-13抗体合格数为395份，抗体合格率为85.50%，H5N8 Re-14抗 体 合 格 数 为382份，抗 体 合 格 率 为82.68%，H7N9 Re-4抗体合格数为394份，抗体合格率为85.28%；12月检测511份，H5N6 Re-13抗 体 合 格 数 为497份，抗 体 合 格 率 为97.26%，H5N8 Re-14抗体合格数为505份，抗体合格率为98.93%，H7N9 Re-4抗体合格数为495份，抗体合格率为96.87%。0204060801004812H5N6 Re-13H5N8 Re-14H7N9 Re-4 图1 不同时间段禽流感抗体检测结果 由图1可知，
8、12月高致病性禽流感免疫抗体合格率最高，平均97.65%，8月高致病性禽流感免疫抗体合格率最低，平均84.49%。表3 高致病性禽流感检测抗体滴度 不同抗体滴度数量（份）检测时间 检测项目 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均值 H5N6 Re-13 5 17 13 16 69 66 75 83 72 71 7.04 H5N8 Re-14 4 15 22 37 58 72 84 69 75 51 6.77 4月 H7N9 Re-4 9 14 23 41 78 62 59 73 61 67 6.67 H5N6 Re-13 19 26 22 67 85 77 54 50 39 23 5.
9、74 H5N8 Re-14 23 29 28 52 68 85 61 46 29 41 5.82 8月 H7N9 Re-4 16 21 31 49 62 79 56 43 52 51 6.18 H5N6 Re-13 0 5 9 12 33 26 41 95 146 144 8.23 H5N8 Re-14 0 2 4 7 15 6 54 168 119 146 8.46 12月 H7N9 Re-4 1 3 12 8 6 17 86 95 134 149 8.35 2.2 高致病性禽流感抗体滴度 东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感抗体滴度见表3。由表3可知，东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感抗
10、体合格率均达到了农业部规定（70%）的标准，但是整个群体的抗体滴度不整齐，存在较大差异。12月的样品抗体滴度最高，H5N6 Re-13、H5N8 Re-14、H7N9 Re-4的抗体滴度平均值达到了8.23、8.46、8.35。从全年的情况来看，8月的抗体滴度平均值最低，与12月的抗体滴度平均值相比，两者差异显著（P0.05）。3 讨论 高致病性禽流感是影响养禽业健康发展的一个重要因素，并且对公共卫生安全产生很大的威胁，强制免疫工作是避免和减少疫情发生的关键2。动物免疫抗体监测是疫病监测、免疫质量评估、疫情预警、疫病控制等工作的重中之重3。从检测结果来看，东海县小规模蛋鸡养殖场4月、8月和12
11、月高致病性禽流感的免疫抗体合格率都比较高，免疫应答效果显著，群体合格率超过国家规定标准，对防控高致病性禽流感提供有效的免疫保护作用4。其中8月高致病性禽流感免疫抗体合格率较低为84.49%，这可能是由于8月的时候天气炎热，养殖场的免疫人员将疫苗从冰箱里拿出后直接免疫，导致鸡体免疫应答效果不好而导致免疫失败，建议在夏季进行疫苗免疫接种应选择早晚气温较低时进行。12月抗体合格率较高，这可能是由于下半年天气寒冷，是禽流感的高发期，养殖户比较重视免疫接种工作。小规模蛋鸡养殖场的饲养管理、免疫接种工作主要由养殖场主自己进行，很少请专业的防疫人员和技术人员，因此，受免疫注射规范性、接种剂量以及鸡体的个体差
12、异，鸡群高致病禽流感抗体滴度高低不齐，群体免疫抗体状况不均匀。从对不同厂家的样品检测结果来看，三个厂家的高致病性禽流感免疫抗体合格率没有明显差异，表明强制免疫政府采购疫苗免疫抗体均能达到农业部规定的标准，免疫效果较好，可以防控禽流感的侵袭。4 结论 东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感免疫抗体合格率已经达到国家标准，同时，应对小规模养殖场户开展技术培训和指导，规范其免疫操作。定期开展采样检测活动，开展高致病性禽流感免疫抗体效价评估，提高防疫密度和防疫质量，筑牢免疫屏障，有效控制禽流感疫情的发生5。参考文献 1 刘桂喜,胡辉灿,方琼,等.2019-2021年邵阳市H5和H7亚型高致病性禽流感免疫效果评估统计与分析J.湖南畜牧兽医,2022（3）:14-16.2 黄宝学,韦显凯,蒙振亩,等.2010-2012年田东县猪瘟、口蹄疫和高致病性禽流感抗体检测及分析.动物医学进展J.2013,34（8）:133-136.3 刘洁.动物免疫抗体监测的意义及措施J.中国畜牧兽医文摘,2012,28（2）:93-94.4 黄雪娇,吴克富,罗强,等.凌云乌鸡高致病性禽流感免疫抗体监测与效果分析J.中国畜禽种业,2022,2:67-69.5 田艳群,邱桂玉,汪朝卫,等.2017-2021年永定区畜禽强制免疫疫病抗体检测与分析J.湖南畜牧兽医,2022,3:10-12.（收稿日期：2022-11-16）
