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低共熔溶剂提取龙眼参黄酮的工艺优化及其抗运动疲劳研究.pdf

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资源描述

1、2102023年第9期中国食品添加剂China Food Additives开发应用收稿日期:2023-01-17基金项目:自贡市哲学社会科学重点研究基地运动与健康创新研究中心 2021 年立项课题“健康中国”背景下家庭体育与学校体育的融合研究(YDJKY21-16)。作者简介:谢茜(1986-),女,硕士,副教授,研究方向:体育教学与训练。*通信作者:王开银(1981-),男,硕士,副教授,研究方向:体育教学与训练。低共熔溶剂提取龙眼参黄酮的工艺优化 及其抗运动疲劳研究谢茜1,刘合智2,王开银1,*(1.四川职业技术学院,遂宁 629000;2.成都体育学院,成都 610041)摘 要:以龙

2、眼参为研究对象,采用响应面法优化超声辅助低共熔溶剂提取龙眼参黄酮工艺,并进一步探索其抗运动疲劳的功效。考察低共熔溶剂的提取效率,且经单因素试验和响应面试验选出最优提取条件,结果表明提取龙眼参黄酮的最佳工艺:含水量 30%、摩尔比 13 的氯化胆碱-乳酸为提取液、超声提取功率为156 W、提取温度为 68、提取耗时为 42 min 和料液比为 130 g/mL,在最优提取条件下龙眼参黄酮提取率为 37.980.13 mg/g。使用小鼠负重游泳模型进行抗运动疲劳的研究,结果表明龙眼参黄酮显著延长小鼠的力竭时间,降低运动后小鼠的血乳酸(BLA)、血尿素氮(BUN)和丙二醛(MDA)指标并增加其肝糖原

3、(HG)和肌糖原(MG)的储备量,从而提升抗运动疲劳能力。关键词:龙眼参;黄酮;低共熔溶剂;响应面法;抗疲劳中图分类号:TS202.3 文献标识码:A 文章编号:1006-2513(2023)09-0210-08doi:10.19804/j.issn1006-2513.2023.09.028Optimization of extraction of flavonoid from longan ginseng by deep eutectic solvents and its anti-fatigue propertyXIE Qian1,LIU Hezhi2,WANG Kaiyin1,*(1.S

4、ichuan Vocational and Technical College,Suining 629000;2.Chengdu Sport University,Chengdu 610041)Abstract:The extraction process of flavonoids from Longan ginseng using ultrasonic-assisted deep eutectic solvents was optimized by response surface methodology,and anti-exercise fatigue effect of the fl

5、avonoids was investigated.The extraction efficiency of deep eutectic solvent and the optimum extraction conditions were studied by single factor experiment and response surface methodology.The results showed that the optimum extraction conditions were as follows:choline chloride-lactic acid with 30%

6、water and molar ratio of 13 as the extraction solution,ultrasonic extraction power 156 W,extraction temperature 68,extraction time 42 min and solid-liquid ratio 130 g/mL.Under these conditions,the extraction rate of flavonoids was 37.980.13 mg/g.A mouse weight-loaded swimming model was used for anti

7、-exercise fatigue study.The results showed that flavonoids from Longan ginseng significantly 2112023年第9期中国食品添加剂China Food Additives开发应用prolonged the exhaustion time of mice,reduced the indexes of BLA,BUN and MDA of mice after exercise,and increased the amount of HG and MG and improved anti-exercise-

8、fatigue ability of mice.Key words:longan ginseng;flavonoid;deep eutectic solvents;response surface method;anti-fatigue现代人们生活节奏快、饮食不均衡、睡眠无规律,身体多处于亚健康状态,导致易疲劳,国内外食品行业纷纷加入抗疲劳产品的研究开发。在中医理论中,将运动疲劳归为虚损,中药因具有无副作用且靶点多的特点在缓解运动疲劳方面备受关注1,其中龙眼参是蝶形花科植物疏叶崖豆块状的根部,多用于广西民间,治疗年老健忘、体弱多病、身体虚弱等,具有益气养血、散瘀消肿、强身健体的作用2。现代研究

9、结果表明,龙眼参的有效成分有多糖、黄酮及皂苷类化合物 等3,其中龙眼参黄酮具有抗氧化、护心护脑的作用4-7,但对其抗疲劳作用的报道却甚少。低共熔溶剂面世近 20 年,是一种离子提取溶剂,其原理是利用氢键受体与供体的结合破坏目标物结构,使其有效成分更易溶出,这种溶剂提取效率高、安全性好、可循环利用、不污染环境8-9。目前关于龙眼参的提取研究很少,且多采用传统的提取方法,比如水提和醇提10-11,但采用低共熔溶剂提取龙眼参黄酮的方法尚未有报道。因此本研究采用超声波辅助低共熔溶剂的提取方法提取龙眼参得到龙眼参黄酮,并进一步研究其抗运动疲劳的功效,旨在为龙眼参在抗疲劳方面的开发与应用提供理论基础。1

10、试验部分1.1 材料与试剂龙眼参:当地中药房;氯化胆碱、1,2-丙二醇、乙二醇、亚硝酸钠(NaNO2)-硝酸铝(Al(NO3)3)、乳酸、柠檬酸、苹果酸、葡萄糖、蔗糖、乙醇等(分析纯):茂名市雄大化工有限公司广州分公司;果糖(分析纯):福晨(天津)化学试剂有限公司;芦丁:成都格普特生物科技有限公司;血乳酸(blood lactic acid,BLA)、血 尿 素 氮(blood urea nitrogen,BUN)、丙 二醛(malondialdehyde,MDA)、肌 糖 原(Muscle glycogen,MG)和 肝 糖 原(hepatic glycogen,HG)检测试剂盒:上海臻科生

11、物科技有限公司;雄性昆明小鼠(体重 18-20 g)60 只:广西医科大学实验动物中心。1.2 仪器与设备ZA805AS 分析天平:上海赞维衡器有限公司;DFT-100A 中药粉碎仪:温岭市林大机械有限公司;KQ-100E 型超声波清洗器:昆山市超声仪器有限公司;RE-501D 旋转蒸发仪:巩义市瑞德仪器设备有限公司;KH19A 高速离心机:湖南凯达科学仪器有限公司;L6 紫外分光光度计:上海佑科仪器仪表有限公司。1.3 试验方法1.3.1 低共熔溶剂的制备按照表 1 中组合,将氢键受体和氢键供体在85 下边加热边搅拌,直到成为均匀、透明的液体,再加入 30%体积比的纯净水即为提取溶液,备用。

12、表 1 氢键受体和氢键供体的组合Table 1 Combinations of hydrogen bond acceptors and hydrogen bond donors组别 氢键受体氢键供体摩尔比组合 1氯化胆碱1,2-丙二醇13组合 2氯化胆碱1,4-丁二醇13组合 3氯化胆碱乙二醇13组合 4氯化胆碱丙三醇13组合 5氯化胆碱乳酸13组合 6氯化胆碱柠檬酸13组合 7氯化胆碱苹果酸13组合 8氯化胆碱葡萄糖13组合 9氯化胆碱果糖13组合 10氯化胆碱蔗糖131.3.2 低共熔溶剂的筛选将龙眼参打磨成粉后过 40 目筛,称取 3 g 龙眼参粉末置于容量瓶中,分别加入 1.3.1 中

13、不同组别的提取溶剂,于相同条件下超声提取,过滤后取滤液,旋转蒸发后用 60%乙醇溶液淋洗,体2122023年第9期中国食品添加剂China Food Additives开发应用积定容至 10 mL,于 5000 r/min 离心 5 min 得龙眼参黄酮提取液。分别用纯净水、60%乙醇代替低共熔溶剂进行提取,对比提取率。1.3.3 标准曲线的绘制将芦丁标准品配制成一定浓度的溶液,采用亚硝酸钠(NaNO2)-硝酸铝(Al(NO3)3)比色法12分别测定其含量,步骤如下:分别量取 0、2、4、6、8、10 mL 芦 丁 对 照 品 溶 液 置于 25 mL 容量瓶中,加入 1 mL 的 NaNO

14、溶液(5%),混合均匀后静止放置 5 min,再加入 1 mL 的 Al(NO3)3 溶液(10%),混合均匀后静止放置5 min,最后加入 10 mL 的氢氧化钠溶液(4%)后用 60%乙醇溶液定容至刻度线,静止放置 15 min 后用紫外可见分光光度计于 505 nm 处分别测定各样品的吸光度值,记录并绘制标准方程为:Y=9.1541X+0.0052(R2=0.9994),线性范围:00.1 mg/mL。1.3.4 龙眼参黄酮的测定量取 1.3.2 中龙眼参黄酮提取液 0.1 mL,按1.3.3 中步骤测定得其吸光度值,带入标准方程中获得其含量。龙眼参黄酮提取率(%)=龙眼参黄酮提取液体积

15、 龙眼参黄酮浓度龙眼参粉末重量式中:龙眼参黄酮提取液体积,mL;龙眼参黄酮浓度,mg/mL;龙眼参粉末重量,g。1.3.5 单因素试验按照 1.3.2 中提取方法,分别单独改变条件:超声提取功率为 50、100、150、200 W;提取温度 40、50、60、70、80、90 ;提取耗时为20、30、40、50、60 min 以及料液比为 110 g/mL、120、130、140、150 g/mL,针 对这四个因素进行单因素试验。1.3.6 响应面优化试验经单因素试验的初步考察后,采用响应面法进一步优化提取条件,即超声提取功率(A)、提取温度(B)、提取耗时(C),3 因素 3 水平的试验条件

16、见表 2。表 2 响应面优化各因素水平表Table 2 Factors and levels in response surface optimization因素 编码水平-101A 超声提取功率/W100150200B 提取温度/607080C 提取耗时/min3040501.3.7 小鼠饲养及处理将小鼠提前饲养在 SPF 动物房中 7 天后随机分为 4 组即高剂量组、中剂量组、低剂量组及空白组。高剂量组、中剂量组、低剂量组分别用50、100、200 mg/g 的龙眼参黄酮提取液进行灌胃,空白组用生理盐水代替龙眼参黄酮提取液进行灌胃,体积相同,为 0.2 mL/20 g,其他条件均一致。灌胃

17、频率为:2次/天、共 30天,称重 1次/10天,共 3次。1.3.8 小鼠负重游泳试验小鼠最后一次进行灌胃后再过 30 min,将重物固定在小鼠身上,一同放进游泳箱中游泳,负重大约为小鼠自身体重的 5%,游泳箱设置均一致。试验开始时计时,小鼠下沉入水 10 s 未浮出时停止计时,这段时间记为力竭时间。1.3.9 抗运动疲劳机制研究负重游泳试验结束后将小鼠捞出,擦干,处死,摘眼球,取血清并离心得血清样本,取其肝脏和肌肉,漂洗擦干得组织样本后按照相应试剂盒中的方法测定其 BLA、BUN、MDA、MG 和HG 含量。1.3.10 数据处理与分析采用 SPSS 17.0 进行方差分析(ANOVA);

18、运 用 OriginPro 2022 进 行 绘 图;使 用 Design Experct 8.0.6 进行响应面优化。2 结果与分析2.1 低共熔溶剂组合对龙眼参黄酮提取率的影响氢键供体与氢键受体的组合成分不同对龙眼参黄酮的溶出有影响,选择常见的氯化胆碱(季2132023年第9期中国食品添加剂China Food Additives开发应用铵盐类化合物)作为氢键供体,分别搭配多元醇类(组合 1-4)、羧酸类(组合 5-7)和糖类(组合 8-10)制备成低共熔溶剂,探讨不同的低共熔溶剂组合对龙眼参黄酮提取率的影响。如图1 可知,与传统提取溶剂相比,低共熔溶剂在龙眼参黄酮提取中表现出一定的优势。

19、氯化胆碱与多元醇类和糖类组合对龙眼参黄酮的提取率约为水提的 2.4 到 2.9 倍、醇提的 1.9 到 2.4 倍;氯化胆碱与羧酸类组合对龙眼参黄酮的提取率约为水提的 3.8 到 4.3 倍、醇提的 3.1 到 3.5 倍,可能是因为酸性环境有利于黄酮类化合物的溶出。其中氯化胆碱与乳酸组合对龙眼参黄酮的提取效果最好,所以选择氯化胆碱-乳酸作为最适的提取 溶剂。012345678910龙眼参黄酮提取率/mgg-1低共熔溶剂组别水提 醇提510152025303540ihfedfabcdeff图 1 低共熔溶剂组合对龙眼参黄酮提取率的影响Figure 1 Effect of deep eutect

20、ic solvents on the extraction rate of flavonoids from longan ginseng注:图示中的不同小写字母表示差异显著(P0.05),下图同。2.2 单因素实验结果2.2.1 超声提取功率对龙眼参黄酮提取率的影响超声功率与其空化效果和细胞壁的破坏程度有关,从而影响龙眼参黄酮的溶出。如图 2 可知,将超声提取功率从 50 W 加大到 200 W,龙眼参黄酮提取率先增大后减小,当功率设置为150 W 时,龙眼参黄酮的提取率最大,但继续增大到 200 W 时,龙眼参黄酮提取率反而减小,这可能是因为功率越大,超声对细胞壁的破坏力越强,但功率过大,空

21、化效果过强,黄酮的结构发生裂解。所以选择 100、150、200 W 的超声提取功率进行进一步的优化试验。50cbab100超声提取功率/W龙眼参黄酮提取率/mgg-115020015202025303540图 2 超声提取功率对龙眼参黄酮提取率的影响Figure 2 Effect of ultrasonic power on the extraction rate of flavonoids from Longan ginseng2.2.2 提取温度对龙眼参黄酮提取率的影响提取温度的高低与溶剂的扩散性有关,从而影响龙眼参黄酮的提取率。如图 3 可知,将提取温度从 40 升高到 90,龙眼参黄

22、酮提取率先增大后减小,当提取温度为 70 时,龙眼参黄酮提取率最大。继续升高提取温度,龙眼参黄酮提取率减小,这可能是因为一开始提取温度的升高使得提取溶剂的分子活跃度提高,扩散性提高,促进龙眼参黄酮的溶解,但温度过高,可能会造成黄酮类化合物的变性。所以选择 60、70、80 的提取温度进行进一步的优化试验。fdbace5040提取温度/龙眼参黄酮提取率/mgg-160708090152025303540图 3 提取温度对龙眼参黄酮提取率的影响Figure 3 Effect of extraction temperature on the extraction rate of flavonoids

23、 from longan ginseng2.2.3 提取耗时对龙眼参黄酮提取率的影响如图 4 可知,从 20 到 60 min 不断增加提取耗时,龙眼参黄酮的提取率先增大后减小,在提取耗时为 40 min 的条件下,龙眼参黄酮的提取率2142023年第9期中国食品添加剂China Food Additives开发应用最大。继续加长提取耗时,龙眼参黄酮提取率反而减小,这可能是因为提取耗时太长,导致溶液中一些黄酮类化合物的结构被破坏,表现出来的就是提取率降低。所以选择 30、40、50 min 的提取耗时进行进一步的优化试验。dcabd3020提取耗时/min龙眼参黄酮提取率/mgg-140506

24、0152025303540图 4 提取耗时对龙眼参黄酮提取率的影响Figure 4 The effect of extraction time on the extraction rate of flavonoids from longan ginseng2.2.4 料液比对龙眼参黄酮提取率的影响料液比的大小与目标物的溶解度有关,从而影响龙眼参黄酮的提取率。如图 5 可知,随着料液比从 110 到 150 g/mL,龙眼参黄酮提取率先增大到一定数值后几乎不再变化,当料液比为130 g/mL 时,龙眼参黄酮提取率最大,继续增加溶剂比例,龙眼参黄酮提取率变化不大(P0.05),这可能是因为龙眼参黄

25、酮已达到饱和,再增加溶剂比例不仅没有效果反而会增加成本,所以选择 130 g/mL 作为最佳提取料液比。110cbaaa120料液比/(g/mL)龙眼参黄酮提取率/mgg-1130150140152020253040图 5 料液比对龙眼参黄酮提取率的影响Figure 5 Effect of solid-liquid ratio on the extraction rate of flavonoids from longan ginseng2.3 响应面优化试验2.3.1 响应面优化试验结果按照表 2 中各因素水平开展响应面优化试验,结果如表 3。利用 Design-Expert 软件对数据进行

26、分析,得到回归方程:龙眼参黄酮提取率(Y)=37.75+1.83A-0.88B+1.54C-0.12AB+0.15AC-1.38BC-10.65A2-3.42B2-3.64C2。方差分析结果如表 4 所示,P 值小于 0.01,极显著;失拟项 P值大于 0.05,不显著;决定系数 R2为 0.9993;CV 为 0.87%,说明该方程的拟合度高,真实可信,具有统计学意义,可以对试验数据进行分析和预测。根据 F 值可知,各因素对龙眼参黄酮提取率的影响高低顺序为:A(超声提取功率)C(提取耗时)B(提取温度),且均为极显著(P0.01)。表 3 Box-Behnken 试验设计及试验结果Table

27、 3 Experimental design and results by Box-Behnken method实验编号A(CC-EG含水量/%)B(提取温度/)C(提取耗时/min)Y(黄酮提取率/mg/g)1150704037.912150605034.733100703020.354150805029.845150803029.426150704037.857200804024.748200604026.389100804021.2210100705023.0211150704037.8712150704037.6913150603028.7714100604022.3815150704

28、037.4416200705026.8717200703023.622152023年第9期中国食品添加剂China Food Additives开发应用表 4 回归方程方差分析Table 4 Regression Equation Analysis of Variance方差来源平方和自由度均方差F 值P 值显著性模型686.91976.321173.360.0001*A-超声提取功率26.79126.79411.870.0001*B-提取温度6.2016.295.240.0001*C-提取耗时18.91118.91290.730.0001*AB0.05810.0580.890.3780AC0

29、.08410.0841.290.2929BC7.6717.67117.960.0001*A2477.431477.437339.810.0001*B249.35149.35758.660.0001*C255.74155.74856.940.0001*残差0.4670.065失拟项0.3130.102.720.1788误差项0.1540.037注:*:差异极显著(P0.01)。2.3.2 最佳提取工艺验证根据软件分析预测最优工艺条件为:超声提取功率 156.80 W、提取温度 68.66、提取耗时 42.01 min,在此条件下龙眼参黄酮提取率为38.07 mg/g。考虑到实际情况,调整工艺条件

30、为:超声提取功率 156 W、提取温度 68、提取耗时42 min,此条件下龙眼参黄酮提取三次,提取率为 37.98 mg/g,仅差 0.09 mg/g,证明了该模型较好的可行性。2.4 龙眼参黄酮抗运动疲劳研究2.4.1 龙眼参黄酮对小鼠体重的影响在用龙眼参黄酮提取液灌胃期间的小鼠未出现异常情况,其体重结果见表 5。结果表示各剂量组间的小鼠体重无明显的差异(P0.05),表明体重不会影响后续研究。表 5 不同剂量的龙眼参黄酮对小鼠体重的影响Table 5 Effects of different amount of longan ginseng flavonoids on the body

31、weight of mice组别10 d20 d30 d高剂量组21.251.6625.111.6530.652.31中剂量组22.351.5925.092.1430.732.42低剂量组21.682.2125.711.9431.222.05空白组21.491.8225.831.8631.512.122.4.2 龙眼参黄酮对小鼠负重游泳时长的影响负重游泳时长的长短直接反映了小鼠抗运动疲劳能力和耐力的高低13,各剂量组小鼠的负重游泳时长结果见表 6。结果显示,经中剂量、高剂量的龙眼参黄酮提取液灌胃的小鼠的负重游泳时长有显著性的延长,且高剂量组极显著;经低剂量的龙眼参黄酮提取液灌胃的小鼠的负重游泳

32、时长有所延长,但不显著。此结果仍可表明龙眼参黄酮达到一定剂量时可以提高小鼠抗运动疲劳的能力和耐力。表 6 不同剂量的龙眼参黄酮对小鼠负重游泳时长的影响Table 6 Effects of different amount of longan ginseng flavonoids on mice weight-bearing swimming time组别游泳时间/min高剂量组14.272.47*中剂量组11.742.41*低剂量组7.012.45空白组5.152.42注:*表明与空白组差异 P0.05,*表明与空白组差异 P0.01,下表同2.4.3 龙眼参黄酮对运动后小鼠 BLA、BUN

33、和MDA 的影响当机体疲劳时,因供氧不足导致糖酵解生成2162023年第9期中国食品添加剂China Food Additives开发应用的丙酮酸进一步反应产生乳酸,pH 下降使得糖酵解反应速率降低,从而产生疲劳感14-15。糖酵解速度下降,机体开始消耗蛋白质或氨基酸以提供能量,从而产生 BUN16-17。机体长时间的运动导致肌肉脂质过氧化反应产生 MDA,破坏细胞完整性,MDA 指标反应氧化的严重程度18。龙眼参黄酮提取液对小鼠 BLA、BUN 和 MDA 的影响结果如表 7 所示,与空白组做对比,服用龙眼参黄酮提取液高剂量组和中剂量组均可以极显著降低血清中 BLA、BUN 和 MDA 含量

34、,而服用龙眼参黄酮提取液低剂量组可极显著降低 BLA 含量、显著降低 BUN 含量,但对 MDA 指标没有显著影响。综上所述,服用一定剂量的龙眼参黄酮可以起到缓解疲劳的作用。表 7 不同剂量的龙眼参黄酮对小鼠生化指标影响Table 7 Effects of different amount of longan ginseng flavonoids on biochemical indicators in mice组别BLA/(mmol/L)BUN/(ng/mL)MDA/(nmol/mL)高剂量组5.27 0.19*126.6712.74*3.480.19*中剂量组6.05 0.21*142.0

35、6 14.33*3.900.18*低剂量组6.420.24*150.17 14.72*5.210.25空白组8.67 0.18183.44 13.255.590.212.4.4 龙眼参黄酮对运动后小鼠 MG 和 HG 的影响当机体长时间运动感到疲劳时,机体开始消耗储蓄的肝糖原和肌糖原以供能,所以 MG 和HG 的储备量影响机体的疲劳度19。龙眼参黄酮提取液对小鼠 MG 和 HG 含量的影响结果如表 8所示,与空白组作对比,使用龙眼参黄酮提取液高剂量组和中剂量组的小鼠体内的 MG 和 HG 含量均极显著升高,使用龙眼参黄酮提取液低剂量表 8 不同剂量的龙眼参黄酮对 MG 和 HG 含量的影响Ta

36、ble 8 Effect of different amount of Longan ginseng flavonoids on MG and HG content组别肌糖原/(mg/g)肝糖原/(mg/g)高剂量组14.781.19*3.73 0.21*中剂量组12.881.16*3.15 0.23*低剂量组10.291.21*2.920.17*空白组7.43 0.752.05 0.14组的小鼠体内的 MG 显著升高、HG 极显著升高,说明龙眼参黄酮可以提高小鼠储备糖原的能力,从而提高耐力及抗运动疲劳的能力。3 结论本研究以龙眼参为对象,采用超声波辅助低共熔溶剂法提取得到龙眼参黄酮提取液,并

37、进一步建立负重游泳模型,探究其抗运动疲劳的作用。结果显示,提取龙眼参黄酮的最佳工艺为:氯化胆碱-乳酸摩尔比 13、氯化胆碱-乳酸含水量 30%、提取功率 156 W、提取温度 68、提取耗时 42 min 和料液比 130 g/mL,在上述最优的条件下龙眼参黄酮提取率为 37.980.13 mg/g。服用龙眼参黄酮小鼠的力竭时间有所增加,其中高剂量组的小鼠与空白组的有极显著差异;龙眼参黄酮可以降低力竭小鼠 BLA、BUN 和 MDA 含量并提升其糖原储备量,从而缓解运动疲劳。龙眼参黄酮提取物或可在缓解体力疲劳类食品原料中有一席之地,且此工艺可以进一步推广并应用于工业生产中。参考文献1林致辉,刘

38、宏岩.中药抗运动性疲劳的研究现状 J.吉林中医药,2019,39(10):1394-1396.2孔晓龙,蒋伟哲,林自中.龙眼参提取物对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下的影响 J.中国药房,2004,15(6):335-336.3黄忠仕,林兴,张士军,等.龙眼参多糖对 SAMP8 学习记忆及脑组织单胺类神经递质含量影响的研究 J.中国药房,2008,19(9):647-649.4张绪东,蒋伟哲,焦阳,等.龙眼参黄酮抗心肌缺血再灌注引起的脂质过氧化损伤的研究 J.时珍国医国药,2008,19(3):607-609.5薛世泉,杨煜,吕铭洋,等.龙眼参黄酮对急性心肌梗死犬心肌超微结构的影响 J.中国老年学

39、杂志,2011,31(2):276-278.6赵宏,杨煜,王景祥,等.龙眼参黄酮对犬急性心肌缺血时心外膜电图及心肌酶的影响 J.中国实验方剂学杂志,2011,17(2):206-208.7金辉,杨煜,吕若谷,等.龙眼参黄酮对大鼠局灶性脑缺血损伤及抗氧化酶活性的影响 J.中国老年学杂志,2012,32(24):5491-5493.8付佳乐,耿直.绿色低共熔溶剂提取黄酮类化合物的研究进展 J.化学与生物工程,2022,39(7):8-12.9Xue H,Li J P,Wang G Y,et al.Ultrasound-assisted extraction of flavonoids from P

40、otentilla fruticosa L.using 2172023年第9期中国食品添加剂China Food Additives开发应用natural deep eutectic solvents J.Molecules,2022,27(18):5794.10张靖贤,孔晓龙,蒋伟哲.龙眼参中多糖的含量测定 J.中国现代应用药学,2002,19(2):108-109.11孔晓龙,蒋伟哲,段小群,等.正交设计优化龙眼参中黄酮类成分的提取工艺 J.广西医学,2004,26(11):1589-1591.12黄金月,崔芙岩,郑时嘉,等.响应面优化黄精根茎总皂苷、总黄酮提取方法及其在不同产地黄精成分含

41、量比较中的应用 J.中医药学报,2021,49(9):56-61.13Chen Y J,Baskaran R,Shibu M A,et al.Anti-fatigue and exercise performance improvement effect of Glossogyne tenuifolia extract in mice J.Nutrients,2022,14(5):1011.14Yang M,Tao L A,Zhao C C,et al.Antifatigue effect of Panax notoginseng leaves fermented with microorga

42、nisms:In-vitro and In-vivo evaluation J.Frontiers in Nutrition,2022,9:824525.15郑元元,井晶,王振宇,等.红松松仁蛋白肽的分离纯化及体外抗氧化和体内抗疲劳作用 J.食品科学,2019,40(1):143-148.16Tung Y T,Wu M F,Lee M C,et al.Antifatigue activity and exercise performance of phenolic-rich extracts from Calendula officinalis,Ribes nigrum,and Vaccini

43、um myrtillus J.Nutrients,2019,11(8):1715.17Kim J,Beak S,Ahn S,et al.Effects of taurine and ginseng extracts on energy metabolism during exercise and their anti-fatigue properties in mice J.Nutrition Research and Practice,2022,16(1):33-45.18Huang G X,Su L,Zhang N,et al.The prebiotic and anti-fatigue effects of hyaluronan J.Frontiers in Nutrition,2022,9:977556.19陈慧,马璇,曹丽行,等.运动疲劳机制及食源性抗疲劳活性成分研究进展 J.食品科学,2020,41(11):247-258.

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