1、74(DepiChina)出生缺陷预防在线投稿网址儿童肝豆状核变性的临床资料与ATP7B基因分析刘攀，舒畅，唐丽，彭晓康，刘小乖，李瑞娜（西安交通大学附属儿童医院感染科，陕西西安7 10 0 0 3）摘要目的分析肝豆状核变性（WD)患儿的临床资料及ATP7B基因变异特点。方法收集2 0 16 年1月至2 0 2 2 年6月于西安交通大学附属儿童医院感染科就诊的158 例WD患儿的临床资料，根据受累器官及临床表现的不同，分为肝型WD(n=144)和脑型WD(n=14)。根据肝脏受累的轻重程度及病程长短、表现的差异，肝型WD又分为症状前WD(n=114)、急慢性肝炎型WD(n=30）。采用目标基因
2、捕获、高通量测序技术进行基因检测，根据是否存在c.2333GT(p.R778L)变异，分为R778L型(n=55)与其他型WD组（n=61。比较各组间患儿的一般情况、临床表现及实验室指标。结果昊症状前WD患儿的确诊年龄小于急慢性肝炎型WD与脑型WD(Z值分别为一56.6 40、一6 4.956,P0.05)；急慢性肝炎型WD患儿的病程短于症状前WD患儿（Z=2 6.930,PT（等位基因频率为2 8.8 8%）、c.2621CT（等位基因频率为9.48%）、c.2310CG（等位基因频率为8.6 2%）及c.2975CT（等位基因频率为7.7 6%）。R778L组WD患儿的确诊年龄大于其他型W
3、D(Z=2.082,PT(p.R778L)genevariation,the children were divided into R778L group(n=55)and other gene variation group(n=61).The general conditions,clin-ical manifestations and laboratory results of the children were compared among the groups.Results The age of the children with thedetermined diagnosis o
4、f pre-symptomatic WD was lower than that of those children with acute or chronic hepatitis WD and neuro-logical type of WD(Z=-56.640 and-64.956 respectively,both P0.05).The course of the children with acute or chronic hep-atitis WD was shorter than that of those children with pre-symptomatic WD(Z=26
5、.930,PT(28.9%of alleles frequency),c.2621CT(9.5%of alleles frequency),c.2310CG(8.6%of alleles frequency)and c.2975CT(7.8%of alleles frequency).The age of the children who had the determined diagnosis of WDin R778L gene mutation group was older than that of the children with the determined diagnosis
6、of WD in other gene types of WDgroup(Z=2.082,P0.05).Conclusion The liver manifestations are common in the children with WD,and there is no significantcorrelation between genotype and clinical phenotype.Key words Wilsons disease(WD);ATP7B gene;children;genotype收稿日期2 0 2 2-0 8 0 9作者简介 刘攀（198 8 一，女，主治医
7、师，主要从事儿童感染性疾病及肝脏疾病的研究。通讯作者李瑞娜，副主任医师。75Jul.2023Chinese Journal of Woman and Child Health Research2023年7 月Vol.34 No.7中国妇幼健康研究第34卷第7 期肝豆状核变性（Wilsons disease,WD)是一种由ATP7B基因缺陷导致的铜代谢障碍性疾病1-2 ，是目前少数可治疗的遗传代谢性疾病之一3。WD患病率为（0.2 54.0 0）/10 0 0 0，但理论发病率远高于此4-5。ATP7B基因编码的ATP7B蛋白属于高度保守的P型三磷酸腺苷（adenosine-triphospha
8、te，ATP)酶超家族的1B类，负责将铜转运人高尔基体或毛细胆管内，在铜的排泄中起主要作用。ATP7B基因变异导致ATP7B酶活性改变,从而引起肝细胞内铜含量增加，造成肝细胞死亡和铜渗漏入血，进一步引起肝、脑、眼睛、肾脏等组织器官的损伤2.41。WD的临床表现复杂多样，可为无症状性转氨酶升高、急慢性肝炎、肝硬化、肝衰竭，也可表现为急性溶血性贫血、神经精神症状等1,3-4。本研究对近年来在西安交通大学附属儿童医院就诊的158 例WD患儿的临床特征与ATP7B基因进行总结分析,以提高临床医师对该病的认识,并进一步探讨本地区WD患儿的遗传学特征。1资料与方法1.1研究对象回顾性收集2 0 16 年1
9、月至2 0 2 2 年6 月期间收治于西安交通大学附属儿童医院感染科的158 例诊断明确且为初诊的WD患儿作为研究对象。诊断标准：根据中华医学会肝病学会分会遗传代谢性肝病协作组制定的肝豆状核变性诊疗指南（2 0 2 2 年版）4，推荐应用2 0 0 1年莱比锡第8 届WD国际会议的诊断标准即Leipzig评分系统6 ，总分4分可确诊。本研究经西安市儿童医院伦理委员会批准（批准文号：论2 0 2 2 0 0 7 3），并豁免患儿及家属知情同意。根据WD患儿的受累器官及临床表现的不同，分为肝型WD组和脑型WD组，分别有144例、14例。根据肝脏受累的轻重程度及病程长短、表现的差异，肝型WD组又分为
10、症状前WD、急慢性肝炎型WD，分别有114例和30 例。1.2资料收集通过我院电子病历系统，回顾性收集研究对象初诊时的临床表现、辅助检查，包括血尿常规、肝功、铜蓝蛋白（ceruloplasmin，CER）、2 4h 尿铜、血清铜、凝血功能、腹部超声及头颅影像学、基因检测和眼科角膜K-F环等结果。1.3 ATP7B 基因检测经患儿监护人签署书面知情同意书后，采集患儿及父母静脉血3mL,提取基因组DNA,并构建与代谢性肝病相关目标基因（ABCB4、A T P7 B、CCDC115、NBA S、T M EM 199等共57 3个基因）的全基因组文库。利用液相捕获试剂盒捕获目标基因后进行高通量测序，通
11、过生物信息学分析找出相关基因的变异信息。当疑似有外显子缺失、临床高度怀疑WD但未检测出变异基因或仅检测到1个变异时，行多重连接依赖探针扩增或全外显子测序进一步分析。根据获得的变异结果对患儿及其父母进行Sanger测序验证。采用生物信息分析软件Poly-Phen-2(http:/genetics.bwh.harvard.edu/pph2)、SIFT（h t t p:/s i f t.j c v i.o r g）及MutationTaster(http：/m u t a t i o n t a s t e r.o r g）对新变异基因进行致病性预测。依据美国医学遗传学及基因组学学会(Ame-ric
12、an College of Medical Genetics and Ge-nomics,ACMG)的遗传变异分类标准与指南7-8 ,将变异基因归类为致病的、可能致病的、意义不明确的、可能良性的或良性的变异。1.4统计学方法采用SPSS25.0进行数据统计与分析，对计量资料进行正态性检验，符合正态分布者以均值土标准差（x土s)表示，非正态分布的以中位数及四分位数M（Q i，Q 4）表示，采用Mann-WhitneyU检验或Kruskal-WallisH检验比较组间的差异。计数资料以例数(n)或百分率（%）表示，组间比较采用检验或Fisher精确检验法。P0.05），症状前WD患儿的确诊年龄明显
13、小于急慢性肝炎型WD与脑型WD(Z值分别为一56.6 40、一6 4.956，P0.05），急慢性肝炎型WD患儿的病程短于症状前WD患儿(Z=26.930,P0.05),见表1。表1肝型WD组与脑型WD组患儿的一般情况与临床表现比较n（%）,M(Q 1，Q 4），x 土sTable 1(Comparison of general information and clinical manifestations of the children between hepatic type of WDgroup and neurological type of WD group n(%),M(Qi,Q4
14、),x s一般情况肝型WD组(n=144)脑型WD组(n=14)x?/HP与临床表现症状前WD(n=114)急慢性肝型炎WD（n=30）男性66(57.89)16(53.33)7(50.00)0.4510.798确诊年龄（岁）5.30(3.57,6.81)a.b10.433.3511.002.4157.6410.001病程（月）1.00(0.67,6.00)a0.37(0.23,1.00)2.00(0.59,3.50)9.8810.007K-F环阳性5(5.10)24(82.76)13(100.00)97.7010.001转氨酶升高110(96.49)30(100.00)2(14.29)54.
15、0430.001黄疽028(93.33)2(14.29)134.7200.001腹胀或腹痛024(80.00)097.8750.001肝脏肿大36(31.58)21(70.00)023.8720.001脾脏肿大4(3.51)20(66.67)1(7.14)56.6130.001腹腔积液021(70.00)1(7.14)79.3680.001肝硬化021(70.00)1(7.14)79.3680.001溶血性贫血018(60.00)066.0960.001神经精神症状02(6.67)14(100.00)82.3410.001注：a与急慢性肝炎型WD比较，P0.05；b 与脑型WD比较，P0.05
16、。2.2临床表现以肝脏为首发表现的患儿（肝型WD组）有144例，占91.14%，其中无症状患儿114例，占72.15%，仅表现为铜代谢指标异常者有4例，转氨酶升高者110 例；查体发现肝脏肿大者36 例,其中4例伴脾脏肿大。98 例患儿行眼科检查，其中5例存在角膜K-F环。以急性慢性肝炎表现者30 例,均有转氨酶升高，其中2 8 例出现不同程度的黄疽（2 7例为胆汁淤积，1例人院时为高胆红素血症、住院第2天复查转为胆汁淤积），2 4例存在腹胀或腹痛，2 1例存在腹腔积液，2 1例出现肝脏肿大、肝硬化，2 0 例伴有脾脏肿大，2 1例出现急性肝衰竭，其中18 例伴有Coombs阴性溶血性贫血。2
17、 9例患儿行眼科检查，其中2 4例存在角膜K-F环。见表1。以神经精神症状为主要表现的WD(脑型WD)患儿有14例，10 例有吐字不清、流涎，8 例有肢体抖动、震颤，4例有肌张力增高，3例有步态异常，3例有吞咽、咀嚼障碍，3例有情绪低落、表情淡漠，2 例有轻度黄疽,2 例有转氨酶轻至中度升高。13例患儿行眼科检查，均存在角膜K-F环。症状前WD、急慢性肝炎型WD与脑型WD患儿在是否存在K-F环、转氨酶升高、黄疽、腹胀或腹痛、肝脏肿大、脾脏肿大、腹腔积液、肝硬化、溶血性贫血及神经精神症状方面差异均有统计学意义(P0.05),见表1。2.3实验室检查158例WD患儿的CER值为0.0 3(0.0
18、1,0.0 6)g/L，2 4h 尿铜为17 7.0 0（115.0 0,2 8 9.6 0）g/24h，血清铜为9.8 7(7.36,13.19)mol/L。症状前WD、急慢性肝炎型WD、脑型WD患儿的总胆红素（totalbilirubin，T B）、直接胆红素（direct bilirubin,DB）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，A LT)、尿铜、血小板（platelet,PLT)差异均有统计学意义（H 值分别为7 0.150、6 8.443、6 0.50 4、39.50 2、51.343,P0.05），见表2。进一步两两比较发现：症状前WD患儿的血
19、清铜水平较急慢性肝炎型WD患儿低（Z=一2 7.313,P0.05），2 4h 尿铜较急慢性肝炎型WD、脑型WD患儿低（Z值分别为一54.92 9、77Jul.22023Chinese Journal of Woman and Child HealthResearch2023年7 月Vol.34No.7中国妇幼健康研究第34卷第7 期一33.0 0 5,P0.05）。脑型WD患儿的天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，A ST）、白细胞(whiteblood cell,WBC)较症状前WD与急慢性肝炎型WD患儿低（AST：Z值分别为51.2 34、52.0
20、13；WBC:Z值分别为39.0 33、38.98 1,P0.05）。急慢性肝炎型WD患儿的血清白蛋白（albumin，A l b）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，A LP）、红细胞计数（redblood cells,RBC)、血红蛋白（hemoglobin,Hb)较症状前WD、脑型WD患儿低（AIb:Z值分别为6 9.7 10、一40.2 50；ALP:Z值分别为54.0 6 7、34.6 7 3;RBC:Z值分别为6 4.7 34、一52.92 3；Hb：Z值分别为62.763、一6 4.0 0 0,P0.05)；CER 水平、-谷氨酰转肽酶（-glutamyl t
21、ranspeptidase，G G T）、较症状前WD、脑型WD患儿高（CER：Z值分别为一32.2 57、36.000；G G T：Z值分别为一32.57 1、54.154，P0.05)。表2肝型WD与脑型WD组患儿的实验室检查比较M(QI，Q），x 土Table 2 Comparison of laboratory results of the children between hepatic type of WD groupand neurological type of WD group M(Qi,Q),x s肝型WD组(n=144)实验室指标脑型 WD组(n=14)HP症状前(n=1
22、14)急慢性肝炎型（n=30)CER(g/L)0.02(0.01,0.05)a0.060.05b0.02(0.01,0.04)12.8750.002尿铜(g/24h)148.50(106.40,207.00)a.b628.80(312.20,1394.30)415.30(147.70,880.00)39.5020.001血铜(mol/L)9.07(7.27,11.84)a13.034.6711.474.299.8740.007TB(mol/L)10.00(7.50,12.70)a,b113.90(47.70,332.00)19.30(17.00,22.50)70.1500.001DB(umol
23、/L)2.70(1.80,3.60)a.b52.90(27.80,189.70)6.60(4.80,10.70)68.4430.001ALT(IU/L)210.00(118.00,305.00)a,b39.00(21.00,71.00)18.00(13.00,39.00)60.5040.001AST(IU/L)129.00(85.00,169.00)b122.00(88.00,178.00)b40.00(22.00,62.00)17.2720.001ALP(IU/L)322.00(247.00,404.00)a89.00(35.00,199.00)b265.00136.0034.7050.00
24、1GGT(IU/L)68.00(40.00,99.00)a142.0079.00b41.00(29.00,78.00)17.5800.001Alb(g/L)42.803.10a26.706.90b37.907.6058.5090.001WBC(X109/L)6.59(5.70,8.08)b6.66(4.65,9.92)b4.34(3.80,5.88)11.2180.001RBC(X 1012/L)4.530.37a2.540.99b4.190.8652.6960.001Hb(g/L)124.108.70a81.0025.60b122.1021.1049.7220.001PLT(X10/L)32
25、5.0085.00a.b97.00(77.00,163.00)129.0049.0051.3430.001注：a与急慢性肝炎型WD组比较，P0.05；b 与脑型WD组比较，PT(p.R778L)、c.2 6 2 1C T(p.A 8 7 4V)、c.2310CG(L770=)及c.2975CT(p.P992L),等位基因频率分别为2 8.8 8%、9.48%、8.6 2%、7.7 6%。发现6 种新的未报道的基因变异，包括c.1908dupC(p.Asn637Glnfs*118)、c.417 9_418 0 i n s C(p.Pr o 1394Profs*15)、c.16 0 4A G(p.
26、G lu 535G ly)、c.2 2 7 8 C T(p.Pro760Ser）、c.30 0 8 C A（p.A la l0 0 3G lu）及c.3532AC(p.Thrl178Pro）。根据ACMG指南判定，除c.1604AG(p.Glu535Gly）为意义不明的变异外，其余均为可能致病性变异。依据患儿是否存在c.2333GT（p.R 7 7 8 L）变异进行基因型的分组，分为R778L型WD与其他型WD,分别有55例、6 1例。R778L型WD的确诊年龄大于其他型WD(Z=一2.0 8 2,P0.05)，见表3。78在线投稿网址表3R778L型WD与其他型WD患儿的临床比较n(%），M
27、(Q 1，Q)Table 3Comparison of clinical indexes of the children between R778L genotype of WD group andother genotypes of WD group n(%),M(Qi,Q)项目R778L型WD(n=55)其他型WD(n=61)x/zP肝型WD52(94.55)59(96.72)0.0140.906确诊年龄（岁）6.70(4.50,10.60)5.70(3.40,8.30)2.0820.037病程（月）1.00(0.67,6.00)1.00(0.22,4.63)-1.3030.193ALT(
28、IU/L)14.00(62.00,300.00)168.00(82.00,302.00)0.7120.477AST(IU/L)124.00(74.00,160.00)135.00(78.00,191.00)-0.8430.399WBC(10%/L)6.25(5.26,7.91)6.56(5.54,8.10)-0.6550.512Hb(g/L)120.50(113.00,127.00)125.00(113.80,130.00)-1.5070.132PLT(10%/L)293.00(147.00,375.00)297.00(236.00,364.00)-0.4750.635CER(g/L)0.02
29、(0.01,0.06)0.04(0.01,0.07)-1.4170.157尿铜(g/24h)177.00(110.00,275.20)167.80(109.40,256.20)-0.0440.965血清铜(mol/L)9.12(7.32,11.33)10.7(7.78,13.24)0.9410.347K-F环阳性(n)14(28.57)10(20.00)0.9900.3203讨论3.1儿童WD的一般情况与临床表现WD是一种铜蓄积性的遗传代谢病，常以肝脏受累起病，发病年龄相对较早3。我院收治的WD患儿中肝型WD占91.14%，其中以仅表现为肝酶升高，伴或不伴有肝肿大的症状前WD居多，占72.15
30、%。症状前WD患儿多在人园、人学体检时发现，确诊年龄中位数为5.30 岁，明显小于急慢性肝炎型WD与脑型WD的确诊年龄（P0.05）。W D最小诊断年龄为1.2 1岁，为先证者的家系筛查中发现。WD患儿基因检测率为7 3.42%，有部分患儿监护人认为临床已明确诊断为WD而不需进行基因检测，这是错误的观点，仍推荐对先证者的直系亲属或有WD家族史者进行家系的基因检测4.9-11。急慢性肝炎型WD组中有2 1例急性起病，出现肝功能衰竭,其中18 例伴有Coombs阴性溶血性贫血。虽然患儿黄疽、腹痛或腹胀等病程短（中位数为0.37个月），但查体多有慢性肝病的异常体征，如肝硬化、腹水等。WD患儿，当肝细
31、胞内的铜超载到一定水平会造成肝脏和其他组织器官损害，但肝脏为沉默器官，无明显临床症状时多不会引起患儿不适或家长关注，往往就诊时已出现代偿期甚至失代偿期肝硬化。这与Ferenci等人12 1报道的39.50%的儿童及青少年在诊断WD时已存在肝硬化的结果一致。2 例患儿出现表情淡漠、震颤的神经精神症状，结合血氨异常升高，头颅磁共振检查正常，诊断为高血氨症、肝性脑病。对于肝型WD伴随有神经精神症状的患儿，临床医师需注意鉴别肝性脑病与WD神经系统损害表现，以免贻误病情。3.2儿童WD的辅助检查急慢性肝炎型WD的CER、G G T 显著高于症状前WD及脑型WD组,而ALP、A LB、R BC、H b 均
32、较另外两组明显下降。急慢性肝炎时肝细胞损伤、细胞膜破坏，细胞内蓄积过量的铜离子、铜蓝蛋白前体被释放入血，铜离子的金属毒性对红细胞破坏可造成贫血，肾脏排泄铜的代偿作用加强，尿铜升高明显；肝损害造成肝脏合成功能下降，从而导致白蛋白降低。以急性肝衰竭起病的WD患者，铜蓝蛋白可能下降不明显或正常，早期诊断存在一定困难，临床医师仍需提高对WD诊断的警惕性3.13。有学者提出，在急性肝衰竭人群中识别WD的顺序指标：ALP/TB2.2，敏感度为94.0 0%，特异度为8 6.0 0%94.0 0%14，但其诊断效能仍有争议。3.3儿童WD临床表型与基因表型的相关性分析WD患者的ATP7B基因在不同地域、种族
33、和人群的变异特征存在明显差异，欧洲以p.H1069G为主15，而亚洲人群以p.R778L最为常见，等位基因频率为12.0 0%39.0 0%16-191。我国WD患者主要以p.R778L、p.P992 L和p.T935M变异为主18 但不同地区的中国人也有不同的ATP7B变异类型，具有区域特异性分布的特征2 0 1。本研究WD患儿最常见的突变位点为c.2333GT(p.R778L)，等位基因频率为2 8.8 8%；其次为c.2621CT(p.A874V)，等位基因频率为9.48%，该发现与其他研究报道的中国79湘；英文编辑：杨周岐中文编辑：刘专业责任编辑：刘正稳Jul.2023Chinese
34、Journal of Woman and Child Health Research2023年7 月Vol.34No.7中国妇幼健康研究第34卷第7 期WD人群的常见突变基因结果相一致2 1-2 WD患儿的临床表现多种多样，临床表型差异较大,国内外众多研究均尝试探索WD的临床表型与基因型的相关性，但目前尚无统一且公认的结论出现。本研究发现，p.R778L型WD的确诊年龄高于其他型WD,而在临床分型、病程、CER、血清铜等方面两组差异无统计学意义。该结论与黄帆等2 3 报道的“p.R778L突变WD患者的发病年龄较晚，与首发症状和铜代谢障碍无关”相符，而与Cheng等18 报道的“中国WD患者中
35、p.R778L组发病年龄更早,CER水平及血清铜更低”的结论不一致。WD临床表型与基因型是否相关存在一定争议，可能与不同地域、样本量的选取及修饰基因的影响作用等因素有关，仍待大量临床数据积累，以及多中心、大样本研究的验证。利益冲突声明：所有作者均声明不存在利益冲突。参考文献iKerkar N,Rana A.Wilson Disease in ChildrenJ.ClinLiver Dis,2022,26(3):473-488.2贾思雨，周冬虎，欧晓娟，等.ATP7B基因突变致肝豆状核变性的分子机制研究进展J.中华肝脏病杂志，2 0 2 0，28(2):188-192.3JDong Y,Wu Z
36、 Y.Challenges and suggestions for precisediagnosis and treatment of Wilsons diseaseJ.World JPediatr,2021,17(6):561-565.4中华医学会肝病学分会遗传代谢性肝病协作组.肝豆状核变性诊疗指南（2 0 2 2 年版)J.中华肝脏病杂志，2 0 2 2，30(1):9-20.5JSandahl T D,Laursen T L,Munk D E,et al.The Preva-lence of Wilsons Disease:An UpdateJ.Hepatology,2020,71(2)
37、:722-732.6JEuropean Association for Study of Liver.EASL ClinicalPractice Guidelines:Wilson s disease J.J Hepatol,2012,56(3):671-685.7王秋菊，沈亦平，邬玲仟，等.遗传变异分类标准与指南J.中国科学：生命科学，2 0 17，47（6）：6 6 8-6 8 8.8Riggs E R,Andersen E F,Cherry A M,et al.Technicalstandards for the interpretation and reporting of const
38、i-tutional copy-number variants:a joint consensus recom-mendation of the American College of Medical Geneticsand Genomics（A C M G)a n d t h e C li n i c a l G e n o m e R e-source(ClinGen)JJ.Genet Med,2020,22(2):245-257.9刘攀，车凤玉，舒畅，等.7 5例肝型肝豆状核变性患儿的临床表型及ATP7B基因变异分析JJ.中华医学遗传学杂志,2 0 2 2,39(4)：357-36 1.
39、10方微园，王建设.2 0 2 2 年英国肝病学会实践指南：肝豆状核变性的评估诊断和治疗管理摘译J.临床肝胆病杂志，2 0 2 2,38（6）：12 56-12 57.11JShribman S,Marjot T,Sharif A,et al.Investigation andmanagement of Wilsons disease:a practical guide fromthe British Association for the Study of the LiverJ.Lancet Gastroenterol Hepatol,2022,7(6):560-575.12JFerenci
40、 P,Stremmel W,Cztonkowska A,et al.Age andsex but not ATP7B genotype effectively influence theclinical phenotype of Wilson disease J.Hepatology,2019,69(4):1464-1476.13Lu X,Li S,Zhang W,et al.Assessment of the diagnos-tic value of serum ceruloplasmin for Wilsons disease inchildrenJ.BMC Gastroenterol,2
41、022,22(1):124.14JCamarata MA,Gottfried M,Rule JA,et al.Outcomes ofacute liver injury in adults due to wilsons disease:is sur-vival without transplant possible?J.Liver Transpl,2020,26(3):330-336.15JCouchonnal E,Bouchard S,Sandahl T D,et al.ATP7Bvariant spectrum in a French pediatric Wilson diseasecoh
42、ortJJ.Eur J Med Genet,2021,64(10):104305.16梁晨，白丽，郑素军.Wilson病基因型-表型关系、诊断、治疗及筛查研究进展J.临床肝胆病杂志，2 0 19，35(9):2116-2119.17JHua R,Hua F,Jiao Y,et al.Mutational analysis ofATP7B in Chinese Wilson disease patients J.Am JTranslRes,2016,8(6):2851-2861.18JCheng N,Wang H,Wu W,et al.Spectrum of ATP7Bmutations and
43、 genotype-phenotype correlation in large-scale Chinese patients with Wilson DiseaseJ.ClinGenet,2017,92(1):69-79.19Zhang S,Yang W,Li X,et al.Clinical and genetic char-acterization of a large cohort of patients with Wilsonsdisease in China J.Transl Neurodegener,2022,11(1):13.2oJYang G M,Wang R M,Xia N
44、,et al.Prevalent patho-genic variants of ATP7B in Chinese patients withWilsons disease:geographical distribution and foundereffectJ.Genes(Basel),2021,12(3):336.21JLi X,Zhang W,Zhou D,et al.Complex ATP7B muta-tion patterns in Wilson disease and evaluation of a yeastmodel for functional analysis of variantsJ.Hum Mu-tat,2019,40(5):552-565.22JJia S,Li X,Zhang W,et al.Laboratory and clinical e-valuation of a microarray for the detection of ATP7Bmutations in Wilson disease in ChinaJ.J Clin Lab A-nal,202,36(11):e24735.23黄帆，梁秀龄，王莹，等.肝豆状核变性基因Arg778Leu突变与临床表现关系研究J.中华神经科杂志，2 0 0 0，33(5):33-34.
