1、成分分析 食品科学 2023,Vol.44,No.18 305分散固相萃取结合UPLC-MS/MS测定不同 人参加工品中46 种皂苷类化合物王艳红1，吴雨桐2，曹虹芳3，许煊炜1，赵 丹1，李月茹1,*（1.吉林农业大学 农业农村部参茸产品质量监督检验测试中心，吉林 长春 130118；2.贵州中医药大学药学院，贵州 贵阳 550025；3.吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130118）摘 要：运用基质分散固相萃取净化，建立一种同时测定人参不同加工品中46 种皂苷类化合物的超高效液相色谱-质谱分析方法。样品经体积分数80%甲醇溶液超声提取，通过N-丙基乙二胺（primary seconda
2、ry amine，PSA）分散固相萃取净化后，采用KINETEX XB-C18色谱柱（2.1 mm100 mm，2.6 m）分离，以0.1%甲酸溶液（A）和乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱，采用负离子多反应监测模式分析和外标法定量。结果表明，46 种皂苷类化合物在35 min内完成检测，在0.0250 g/mL质量浓度范围内有较好的线性关系，所对应的相关系数（R2）均大于0.99，方法检出限为0.43.2 mg/kg，定量限为1.410.5 mg/kg，在低、中、高3 个添加水平下的平均回收率为80.5%111.6%，相对标准偏差（relative standard deviations，RSD
3、）为1.3%6.8%。方法日内和日间精密度的RSD分别为0.5%4.5%（n=6）和1.1%6.6%（n=6），重复性的RSD在1.5%7.3%（n=6）之间，24 h内样品稳定性的RSD在0.9%5.8%（n=6）之间。方法优化了分散固相萃取剂的种类和用量，并考察分散固相萃取净化前后对基质效应的影响，结果表明，样品前处理通过PSA分散固相萃取净化，有效降低了基质效应，且操作简便、高效、节约成本。将该方法用于3 种不同人参加工产品生晒参、红参和黑参样品中46 种皂苷类化合物的分析测定，结果发现红参和黑参经过蒸制加工处理后，部分原有的皂苷发生了转化，产生了稀有皂苷，且黑参中产生的稀有皂苷含量远高
4、于红参。该方法准确可靠、快速、易操作，杂质干扰小，适合批量人参加工品中46 种皂苷类化合物的同时定量分析。关键词：人参；加工产品；皂苷类化合物；分散固相萃取；超高效液相色谱-质谱法Determination of 46 Ginsenosides in Different Processed Ginseng Products by Dispersive Solid Phase Extraction Combined with Ultra-high Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass SpectrometryWANG Yanhong1,WU
5、Yutong2,CAO Hongfang3,XU Xuanwei1,ZHAO Dan1,LI Yueru1,*(1.Ginseng and Antler Products Testing Center,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;2.School of Pharmacy,Guizhou University of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550025,China;3.College o
6、f Traditional Chinese Herbal Medicines,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China)Abstract:A method was developed for the simultaneous detection of 46 ginsenosides in different processed ginseng products by dispersive solid phase extraction combined with ultra-high performance liquid chrom
7、atography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS).The samples were ultrasonically extracted with 80%methanol aqueous solution,and the extract was purified by dispersive solid phase extraction(DSPE)using primary secondary amine(PSA)as a sorbent,separated on a KINETEX XB-C18 column(2.1 mm 100 mm,2.6 m)by
8、 gradient elution using a mobile phase consisting of acetonitrile and 0.1%formic acid aqueous solution,detected in the negative ion mode with multiple reaction monitoring(MRM),and quantified by an external standard method.The 46 ginsenosides were detected within 35 minutes.Under the optimized condit
9、ions,the calibration curves showed good linearities for 46 compounds at concentrations ranging from 0.02 to 50 g/mL with correlation coefficients(R2)over 0.99.The limits of detection(LODs)and the limits of quantitation(LOQs)were in the range of 0.43.2 mg/kg and 1.410.5 mg/kg,respectively.The average
10、 收稿日期：2022-10-16基金项目：吉林省科技发展计划项目（20210506009ZP）第一作者简介：王艳红（1974）（ORCID:0000-0003-1894-6614），女，副教授，博士，研究方向为农产品营养功能评价与质量安全。E-mail:yanhong-*通信作者简介：李月茹（1964）（ORCID:0000-0002-8323-6662），女，教授，博士，研究方向为农产品质量安全。E-mail:306 2023,Vol.44,No.18 食品科学 成分分析recoveries at three spiked levels were in the range of 80.5%1
11、11.6%with relative standard deviations(RSDs)of 1.3%6.8%.In addition,the RSDs for intra-and inter-day precision were 0.5%4.5%and 1.1%6.6%(n=6),respectively.The RSDs for repeatability ranged between 1.5%and 7.3%(n=6),and the RSDs for sample stability within 24 hours between 0.9%and 5.8%(n=6)within 24
12、h.In this method,the type and dosage of DSPE sorbent were optimized,and the influence of DSPE purification on the matrix effect was investigated.The results showed the matrix interference was effectively reduced by DSPE with PSA,and the sample pretreatment was easy to operate,efficient and cost-savi
13、ng.This method was successfully applied to the analysis of 46 ginsenosides in sun-dried ginseng,red ginseng and black ginseng.The results revealed that ginsenosides were transformed into rare ginsenosides in red ginseng and black ginseng due to steaming,and the contents of rare ginsenosides in black
14、 ginseng were much higher than those in red ginseng.The proposed method was accurate and reliable,fast,easy to operate,immune to impurity interference,and suitable for the simultaneous quantitative analysis of 46 ginsenosides in processed ginseng products.Keywords:Panax ginseng;processed products;gi
15、nsenosides;dispersive solid phase extraction;ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometryDOI:10.7506/spkx1002-6630-20221016-147中图分类号：TS201 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2023）18-0305-11引文格式：王艳红,吴雨桐,曹虹芳,等.分散固相萃取结合UPLC-MS/MS测定不同人参加工品中46 种皂苷类化合物J.食品科学,2023,44(18):305-315.DOI:10.7506/sp
16、kx1002-6630-20221016-147.http:/WANG Yanhong,WU Yutong,CAO Hongfang,et al.Determination of 46 ginsenosides in different processed ginseng products by dispersive solid phase extraction combined with ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometryJ.Food Science,2023,44(18):305-315
17、.(in Chinese with English abstract)DOI:10.7506/spkx1002-6630-20221016-147.http:/人参是五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Meyer）的干燥根和根茎，具有大补元气、复脉固脱、补脾益肾、生津养血、安神益智之功效1，是我国传统的名贵中药材，一直以来素有“中药之首，百草之王”的美誉。现代药物化学和药理学研究结果表明，人参中皂苷类物质是其主要的活性成分，具有抗肿瘤、抗衰老、抗氧化、降血糖和增强免疫功能等多种药理作用2-3。人参皂苷根据在人参中的量被分为常量人参皂苷（主要人参皂苷）和稀有人参皂苷，常量人参皂苷
18、如人参皂苷Ra1、Ra2、Ra3、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rf等含有较多糖基、在人参中含量相对较高，但其生物活性较低，在人体内的吸收率也很低；稀有人参皂苷如人参皂苷Rg3、Rg5、Rg6、F4、Rh1、Rh2、Rh3、Rh4、Rk1、Rk2、Rk3、F1、F2等在人参属植物中含量很少，很难从人参属植物中直接分离得到，一般通过降解常量人参皂苷的方法制备稀有人参皂苷，但稀有人参皂苷含糖基较少，生物活性更好，身体吸收率更高4-5。此外，人参通过不同的加工方式，部分常量皂苷也会发生转化，产生稀有人参皂苷6-7。市场上最常见的人参加工产品为生晒参和红参，近年来，人参经过
19、九蒸九曝加工方法而成的黑参也逐渐出现在市场上，且由于黑参除了部分稀有皂苷含量较高，还含有一些特异性的稀有人参皂苷，并表现出更强的生物活性，越来越受到广大消费者的欢迎8。可见不同的加工方式引起了人参皂苷含量和种类的差异，对其药理活性和临床应用也有较大的影响。为此，评估人参皂苷水平对人参加工产品的质量控制和正确有效使用至关重要。而人参皂苷种类繁多，且结构具有多样性和相似性，针对人参相关产品复杂体系中多种皂苷类成分的快速鉴定及定量分析检测技术，国内外研究者们也一直在不断的探索和研究。近20年来，利用高效液相色谱法和超高效液相色谱法定量分析人参皂苷的含量已经是一种比较成熟的分析手段9-12，但由于检测
20、种类有限，分析时间较长，单一液相色谱方法难以满足人参及人参相关产品复杂体系中多种皂苷类成分同时快速分析检测。随着现代质谱技术的快速发展，液相色谱-质谱联用技术因其具有灵敏度高、分辨率好且高效快速便捷等优点已被广泛用于人参皂苷定性定量分析研究中。目前，虽然已有大量研究报道了应用液相色谱-质谱联用技术分析及鉴定人参皂苷类成分的检测方法，从液相色谱-质谱联用技术，到超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术等。但既简单、准确、快速又覆盖皂苷种类多的定量检测分析方法还有限。三重四极杆质谱通常采用的多反应监测（multiple reaction monitoring，MRM）模式需要已知的标准品优化仪器参数和对
21、分析物进行定量分析检测，具灵敏度高、选择性强的优势，更适用于已知物质的定量分析。成分分析 食品科学 2023,Vol.44,No.18 307如Xia Yonggang等13采用超高效液相色谱结合电喷雾电离和三重四极杆质谱分析测定了西洋参中22 种人参皂苷的含量；石婧婧等14建立了超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱法同时测定红参中17 种人参皂苷类成分；赵立春等15建立了人参中28 种人参皂苷含量的超高效液相色谱-质谱法（ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS）检测
22、方法。这些超高效液相色谱-三重四极杆质谱法，操作简单、快速准确，但是分析皂苷种类和数量覆盖面较窄，难以满足人参不同产品中皂苷类化合物复杂多样的分析检测要求。郝颖16和戴雨霖17等采用了高分离度快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法分析鉴定了不同人参样品中40多种皂苷类成分；Lee等18采用超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱联用技术分析鉴定了人参根、茎、叶和果中的58 种皂苷类化合物。这些高分辨质谱法检测人参皂苷的多组分常采用飞行时间质谱检测器，具有超高的分辨率和精确分子质量测定功能，更适用于未知物质的定性鉴别。且超高效液相色谱-高分辨质谱联用仪不仅价格昂贵，还需具备较高的专业技术水平等，在大部分
23、领域的应用仍处于发展阶段，大部分实验室仍未普及，液相色谱-三重四极杆串联质谱仪仍然是当前科研和检测机构的主流定量分析手段。由于人参不同产品中含有较多的糖类、脂类及色素等成分，为了降低基质的干扰，保证数据的准确性，并减少对色谱柱和仪器的污染，需要对其进行净化处理。目前最常见的人参皂苷前处理净化方法仍是传统的固相萃取法19-20、液液萃取法21-22，这些方法存在过程繁琐、耗时长、成本高、需要大量有毒有机溶剂等问题，且无法满足批量样品中多种皂苷的同时简单、快速、准确检测的需求。分散固相萃取法作为一种简便、快速、价格低廉的分析方法，已成功用于农药残留检测领域。近年来该方法在中药有效成分提取净化及分析
24、中的应用研究也有报道，如药用狗牙花中生物碱、五味子中木脂素23-24。但将分散固相萃取法用于人参中皂苷类成分净化分析方面的研究鲜见报道。本研究在前人研究基础上，采用了分散固相萃取法对人参样品进行净化处理，利用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪建立46 种皂苷类成分的检测方法，并对人参不同加工品中皂苷类化合物的含量和组成进行检测分析和比较。该方法进一步拓展了现有方法的检测范围，增加了样品前处理的净化技术和皂苷类化合物的检测种类，操作简便、快速，为不同人参加工品中多种皂苷类化合物的快速分析检测提供了技术参考。1 材料与方法1.1 材料与试剂3 种人参加工品（生晒参、红参和黑参）为吉林省抚松万良人
25、参市场随机购买。46 种皂苷标准物质对照品（纯度均不小于95%）购于上海源叶生物科技有限公司和成都曼斯特生物科技有限公司。甲醇、乙腈（均为色谱纯）德国Merck公司；甲酸（色谱纯）美国Sigma-Aldrich公司；其他试剂均为分析纯。N-丙基乙二胺（primary secondary amine，PSA）、十 八 烷 基 键 合 硅 胶（C1 8）吸 附 剂、石 墨 化 碳 黑（graphitized carbon black，GCB）吸附剂 北京恩加壹科技有限公司；实验用水为超纯水（Milli-Q纯水处理系统制备，美国Millipore公司）。1.2 仪器与设备Sep-pak C18固相萃
26、取小柱（1 g/6 mL）美国Waters公司；LC-30A超高效液相色谱仪 日本Shimadzu公司；AB QTRAP 4500三重四极杆/复合线性离子阱质谱仪、Analyst、Peak View和MultiQuant数据处理系统 美国AB SCIEX公司；Kinetex XB-C18色谱柱（2.1 mm 100 mm，2.6 m）美国Phenomenex 公司；KQ-500DE数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；Heraeus Multifuge XIR台式冷冻离心机 美国Thermo公司；AL204型电子天平 美国Sartorius公司；VORTEX-6旋涡混合器 北京海天友诚科技
27、有限公司。1.3 方法1.3.1 标准溶液的配制准确称取46 种皂苷标准品各10 mg（精确至0.1 mg），分别以甲醇溶解并定容，配制成1 mg/mL的标准品储备液，于4 避光保存备用。取适量标准储备液，以甲醇稀释成100 g/mL的标准中间液。分别取适量标准中间液，根据各化合物的响应情况，分别用甲醇稀释成不同质量浓度的系列混合标准溶液。1.3.2 样品前处理提取：取干燥至恒质量的人参加工品样品粉碎，过60 目筛，准确称取1 g（精确到0.000 1 g）样品粉末，加入50 mL 80%甲醇溶液，浸泡过夜，超声40 min，以5 000 r/min离心15 min，精密移取上清液2 mL，6
28、0 下氮气吹干，用甲醇溶解并定容至5 mL，待净化。净化：准确移取提取液2 mL至装有100 mg PSA的离心管中，涡旋振荡2 min，5 000 r/min离心6 min。上清液过0.22 m滤膜，备用。或根据实际浓度用甲醇适当稀释至线性范围内，作为供试品溶液待测。1.3.3 色谱条件Kinetex XB-C18色谱柱（2.1 mm100 mm，2.6 m）；柱温40；流速0.3 mL/min；进样量2.0 L；流动相A为0.1%甲酸溶液，B为乙腈；梯度洗脱：01.0 min，81%A、19%B；1.02.0 min，81%72%A、19%28%B；2.014.0 min，308 2023
29、,Vol.44,No.18 食品科学 成分分析72%65%A、28%35%B；14.020.0 min，65%55%A、35%45%B；20.025.0 min，55%43%A、45%57%B；25.028.0 min，43%0%A、57%100%B；28.030.0 min，0%A、100%B；30.032.0 min，0%81%A、100%19%B；32.035.0 min，81%A、19%B。1.3.4 质谱条件电喷雾离子源负离子模式；MRM模式；雾化电压4 500 V；离子化温度450；雾化气压力45 psi；辅助气压力45 psi；碰撞气压力Medium；气帘气 压力35 psi。1
30、.3.5 基质效应计算基质效应（matrix effect，ME）/%=A/B100。其中A为样品中皂苷类物质的峰面积；B为纯溶剂中同浓度皂苷类物质对应的峰面积。当ME1时，表示基质增强效应，当ME1时，表示基质抑制效应。若ME为80%120%时，表示ME不明显，可以忽略；若ME在50%80%或120%150%时，表现为中等ME；若ME50%或者ME150%时，则表现为强ME25。1.4 数据处理通过与仪器配套的AB SCIEX公司的Analyst 1.6软件系统完成数据采集与处理，在Multi Quant 3.0和Peak View 2.0软件上定性定量处理和谱图分析，采用Excel和分析软
31、件SIMCA 14.1对结果进行统计分析及图表绘制。2 结果与分析2.1 色谱条件的优化本实验所测的皂苷类化合物种类多，但结构相似，性质差异较小，且含有多对同分异构体，这些化合物具有相同的前体和产物离子，在质谱上无法通过离子对其进行区分，若要准确定量这些化合物，色谱峰要有一定程度的分离。因此实验对色谱条件进行优化，以实现皂苷类化合物的最佳色谱分离以及各化合物的良好峰形和最佳响应。实验首先考察了在相同参数条件下，不同型号色谱柱Waters HSS T3（100 mm2.1 mm，1.7 m）、Waters BEH C18（100 mm2.1 mm，1.7 m）和Kinetex XB-C18（2.
32、1 mm100 mm，2.6 m）的分离效果，结果表明，HSS T3色谱柱对于部分皂苷类物质分离效果较差，特别是无法实现同时对多对同分异构体化合物的基线分离；而Waters BEH C18和Kinetex XB-C18色谱柱对46 种目标化合物均呈现较好的色谱峰形和分离度，但考虑到对系统压力的影响，选择具有低柱压的Kinetex XB-C18作为分离色谱柱。在流动相选择方面，考察反相色谱常用的有机相溶剂（甲醇、乙腈）与水组成的流动相体系对皂苷类成分的分离效果，发现以乙腈体系为流动相时，系统平衡时间相对较快，且洗脱能力和分离效果均优于甲醇体系。在流动相中加入适量的甲酸可以减少色谱峰的拖尾，提高皂
33、苷类化合物的离子化效率，改善色谱峰形，并增强目标化合物的响应信号和稳定性。因此，本实验流动相选择最常用的乙腈-0.1%甲酸溶液系统，在很大程度上减少了溶剂系统带来的背景和基质干扰。最后，通过调节梯度洗脱程序使互为同分异构体的皂苷类化合物进一步分离，由待测目标化合物的结构可知，本研究中46 种皂苷类化合物中同分异构体较多，但可通过保留时间和离子碎片的不同加以区分。例如，人参皂苷Rb2、Rb3和Rc与人参皂苷Rs1和Rs2这两组同分异构体，它们各自产生的检测离子碎片虽然相同，但可通过保留时间的不同得到较好分离；而另一组同分异构体原人参三醇型皂苷Rf和拟人参皂苷F11，二者保留时间较接近，通过调节流
34、动相梯度也无法得到较好分离，但由于二者产生的离子碎片不同则可加以区分。在优化的仪器条件下，各皂苷类化合物灵敏度和和峰形均可满足检测要求，整个梯度运行时间为35 min，46 种皂苷类化合物均得到有效分离，能够达到准确定性定量目的。46 种目标物混合标准溶液的MRM色谱图见图1，46 种化合物信息见表1。0.00.61.21.82.43.03.64.24.85.40246810121416182022242628303234?106?/min123489101112141825172019212322242627283032333435364041424344393837454629315671
35、31516图 1 46 种人参皂苷类化合物标准物质的MRM色谱图Fig.1 MRM chromatograms of 46 ginsenoside standards2.2 质谱条件的优化采用针泵直接将标准溶液注入离子源的方式对7 种皂苷类化合物质谱参数进行优化。分别将46 种待测皂苷类化合物标准溶液（质量浓度均为1.0 g/mL）以7 L/min 注入电喷雾离子源，采用正、负2 种离子模式进行扫描，发现皂苷类化合物在负离子模式下具有较高的稳定性和较高的响应值，这与文献26相关报道一致，因此选择负离子模式。皂苷类物质在负离子模式下的一级质谱图中，其准分子离子主要以MH和MHCOOHH 的形式存
36、在。在Q1进行全扫描中，找出母离子，母离子在Q2打碎后，在Q3进行子离子全扫描以确定各组分的主成分分析 食品科学 2023,Vol.44,No.18 309要碎片离子，选择2 个无干扰、灵敏度相对较高的稳定的特征子离子，组成MRM离子对，作为定性定量的离子对。在MRM模式下优化去簇电压和碰撞能量，最终确定了46 种皂苷类化合物的MRM离子对、去簇电压及碰撞能量。优化后的质谱参数如表1所示。2.3 提取条件的选择人参皂苷类化合物的提取相关报道较多，常用的提取溶剂和方法有甲醇回流提取27、甲醇超声提取28、80%甲醇超声提取12、水饱和正丁醇超声提取29和60%乙醇超声提取14。本研究在前人研究的
37、基础上，选用提取方法较简单的超声提取法，并考察甲醇、80%甲醇、水饱和正丁醇和60%乙醇作为提取溶剂时，各个皂苷类化合物的提取效果。经过对比发现，80%甲醇和60%乙醇对大部分皂苷类化合物的提取效率优于纯甲醇和水饱和正丁醇，但60%乙醇为提取溶剂时，提取液的颜色较浓，杂质较多，且基线不稳定，不利于后续的净化处理，表 1 46 种人参皂苷类化合物的质谱参数、线性关系、检出限和定量限Table 1 Mass spectrometric parameters,linearities,LODs and LOQs of 46 ginsenoside compounds序号人参皂苷类化合物保留时间/min
38、m/z去簇电压/V碰撞能量/eV回归方程线性范围/（g/mL）相关系数（R2）检出限/（mg/kg）定量限/（mg/kg）母离子子离子120-葡萄糖人参皂苷Rf3.261 007.7961.4*/799.313539/59y=94 674.5x1 918.30.06150.996 21.03.52三七皂苷R13.36977.5931.5*/637.416436/57y=115 803x2 068.10.04100.994 00.73.03人参皂苷Re3.58991.5945.4*/475.513635/73y=103 733x4 171.90.06150.996 71.03.54人参皂苷Rg1
39、3.61845.5637.5*/475.519044/58y=60 269.6x1 904.20.04100.995 40.73.05越南人参皂苷R45.151 007.7961.4*/799.313539/59y=48 477.7x2 950.70.06150.995 11.03.56越南人参皂苷R85.471 007.7961.4*/799.313539/59y=91 585.1x2 902.00.06150.996 51.03.57拟人参皂苷Rg25.73829.5783.4*/637.316134/49y=188 873x6 169.10.04100.995 00.73.08人参皂苷R
40、f6.73845.5637.5*/475.215950/61y=9 034.6x350.90.08200.998 21.34.59拟人参皂苷F116.96845.5653.4*/635.516038/39y=7 323.9x+676.30.08200.999 31.34.510拟人参皂苷RT57.19699.4653.4*/161.017932/40y=108 977x11 848.60.06150.995 61.03.511三七皂苷R27.63815.5769.4*/637.511834/41y=372 527x2 166.50.0250.997 90.41.412人参皂苷F58.63815
41、.5769.4*/637.511834/41y=23 0371x869.60.04100.999 50.73.01320(S)-人参皂苷Rg28.69829.5783.4*/637.316134/49y=653 974x25 526.60.04100.998 40.73.01420(S)-人参皂苷Rh18.88683.4637.5*/475.414630/43y=153 993x1 555.90.06150.998 91.03.51520(R)-人参皂苷Rg29.02829.5783.4*/637.316134/49y=172 287x7 079.90.04100.998 00.73.016人
42、参皂苷F39.27815.5769.4*/149.011834/40y=374 557x5 568.00.04100.999 50.73.017人参皂苷Ra29.391 255.61 209.6*/1 077.212038/77y=59 556.2x197.90.08200.997 61.34.51820(R)-人参皂苷Rh19.57683.4637.5*/475.414630/43y=101 418x1 911.10.06150.999 01.03.519人参皂苷Ra39.681 285.61 239.6*/1 107.414335/78y=15 923.5x1 653.90.2500.99
43、5 13.210.520人参皂苷Rb19.761 153.61 107.7*/945.514238/69y=78 895.8x5 813.40.08200.995 51.34.521人参皂苷Rh710.78681.4635.4*/161.012627/35y=462 909x13 817.40.04100.997 90.73.022人参皂苷Rc10.861 123.61 077.4*/945.514837/67y=177 115x6 268.80.06150.998 51.03.523人参皂苷Ra110.951 255.61 209.6*/1 077.212038/77y=30 050.4x1
44、 667.90.08200.996 21.34.524人参皂苷Rb211.991 123.61 077.4*/945.514837/67y=161 890 x5 631.90.06150.996 81.03.525人参皂苷F112.16683.4637.5*/475.414630/43y=539 524x8 923.00.04100.999 10.73.026人参皂苷Rb312.391 123.61 077.4*/945.514837/67y=78 748.6x3 979.10.06150.997 81.03.527西洋参皂苷R113.541 149.61 107.4*/1 089.61975
45、9/60y=90 053x+1 329.30.08200.997 91.34.528人参皂苷Rs114.111 119.51 077.5*/1 059.520061/62y=13 961.2x+252.40.08200.999 71.34.529人参皂苷Rd14.44991.5945.4*/621.613635/65y=51 030.5x3 861.20.08200.997 61.34.530人参皂苷Rs214.931 119.51 077.5*/1 059.520061/62y=55 529.3x336.20.08200.998 81.34.531绞股蓝皂苷XVII16.60991.5945
46、.4*/621.613635/65y=76 807.9x6 819.30.08200.996 11.34.532人参皂苷Ra616.751 175.61 107.6*/1 089.619558/59y=157 621x5 113.40.08200.997 91.34.533三七皂苷Fe17.71961.6915.5*/293.113438/45y=59 460.5x3 287.20.06150.995 31.03.534人参皂苷Rd218.40961.6915.5*/293.113438/45y=127 221x8 947.40.06150.994 61.03.535人参皂苷Rg618.718
47、11.5765.5*/619.413933/49y=121 686x3 074.20.08200.997 71.34.536人参皂苷Rk318.94665.4619.3*/161.013227/35y=102 151x3 665.20.08200.999 51.34.537人参皂苷F220.33829.5783.4*/621.516134/55y=76 128.8x3 408.50.08200.999 11.34.53820(S)-人参皂苷Rg321.66829.5783.4*/621.516134/55y=100 634x474.20.04100.998 60.73.03920(R)-人参皂
48、苷Rg321.96829.5783.4*/621.516134/55y=59 778.8x1 250.10.04100.999 20.73.040拟人参皂苷Rh223.11667.4621.5*/161.06727/34y=36 649.9x289.80.2500.999 13.210.541人参皂苷Rs323.99871.6825.5*/783.414630/50y=290 031x8 761.50.08200.998 21.34.542人参皂苷Rk125.17811.5765.5*/603.513933/51y=72 703.3x1 594.70.08200.997 31.34.543人参
49、皂苷Rg525.58811.5765.5*/603.513933/51y=28 994.2x7 826.20.2500.998 33.210.544人参皂苷CK25.85667.4621.5*/161.06727/34y=1 377 970 x31 369.40.06150.998 81.03.54520(S)-人参皂苷Rh226.34667.4621.5*/161.06727/34y=101 330 x13 689.20.2500.999 23.210.54620(R)-人参皂苷Rh226.50667.4621.5*/161.06727/34y=88 794.8x17 767.90.2500
50、.995 63.210.5注：*.定量离子。310 2023,Vol.44,No.18 食品科学 成分分析而80%甲醇溶液的提取效果总体最佳，基线和峰形也较好，因此最终选用80%甲醇溶液作为提取溶剂。2.4 净化条件的优化人参加工品提取液中的糖类、色素及有机酸等杂质会产生ME，干扰待测物的分析，而且会损坏检测仪器和色谱柱，需要对样品进一步净化。为了使净化时尽可能多地去除杂质干扰，又能减少对目标物的损失，同时使实验方法达到简单、快速、准确，具有时效性。实验对Sep-pak C18（1 g/6 mL）为固相萃取柱的固相萃取法9和分散固相萃取2 种净化方式进行比较。发现C18固相萃取柱净化后，各化合
