1、生物显微镜原理及使用生物显微镜原理及使用1/19一、试验目标：一、试验目标：掌握普通复式光学显微镜原理、结构及其使用方法。掌握普通复式光学显微镜原理、结构及其使用方法。2/19二、普通复式光学显微镜原理二、普通复式光学显微镜原理 是将两个凸透镜是将两个凸透镜系统适当地组合在仪系统适当地组合在仪器上对标本进行放大，器上对标本进行放大，经物镜形成倒立实像，经物镜形成倒立实像，经目镜放大成虚像。经目镜放大成虚像。3/191、照明系统、照明系统：光源：光源(普通光线可见光普通光线可见光)、折光镜、折光镜、聚光镜、滤光片聚光镜、滤光片 2、光学放大系统、光学放大系统：两组玻璃透镜：两组玻璃透镜目镜、物镜
2、目镜、物镜 3、机械装置、机械装置：确保光学系统准确配置和灵活调控：确保光学系统准确配置和灵活调控三、三、普通复式光学显微镜结构普通复式光学显微镜结构4/19普通复式光学显微镜普通复式光学显微镜镜筒镜筒载物台载物台聚光镜聚光镜光阑光阑粗动螺旋粗动螺旋微动螺旋微动螺旋照明装置照明装置基座基座棱镜棱镜光路图光路图5/196/19四、四、普通复式光学显微镜普通复式光学显微镜使用方法使用方法 1取镜和安放取镜和安放：显微镜平时存放在柜或箱中，：显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方试验台上，略偏左（显
3、微将显微镜放在自己左肩前方试验台上，略偏左（显微镜放在距试验台边缘镜放在距试验台边缘7cm左右处），镜座后端距桌边左右处），镜座后端距桌边46cm为宜，便于坐着操作。安装好目镜和物镜。为宜，便于坐着操作。安装好目镜和物镜。安装物镜时要用左手食指和中指托住物镜，然后用右安装物镜时要用左手食指和中指托住物镜，然后用右手将物镜装上去，这么即使没安装好，也不会摔到地手将物镜装上去，这么即使没安装好，也不会摔到地上。上。7/19 2、对光：、对光：用拇指和中指移动旋转器用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物切忌手持物镜移动镜移动)，使低倍镜对准镜台通光孔，使低倍镜对准镜台通光孔(当转动听到碰叩当转动听到碰叩
4、声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心)。打开光圈，上。打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观察察(右眼睁开右眼睁开)，同时调整反光镜方向，直到视野内光，同时调整反光镜方向，直到视野内光线均匀明亮为止。线均匀明亮为止。3、放置玻片标本：、放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧定使有盖玻片一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察部位调到夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察部位调到通光孔正中。通光孔正
5、中。8/19 4、调整焦距：、调整焦距：以左手按逆时针方向转动粗调整以左手按逆时针方向转动粗调整器，使镜台迟缓地上升至物镜距标本片约器，使镜台迟缓地上升至物镜距标本片约5mm处，处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。一定要应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜标本片损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向迟缓转动粗调整器，使镜上观察，左手顺时针方向迟缓转动粗调整器，使镜台迟缓下降，直到视野中出现清楚物象为止。台迟缓下降，直到视野中出现
6、清楚物象为止。假如物象不在视野中心，可调整推片器将其调到中心假如物象不在视野中心，可调整推片器将其调到中心(注意移动玻片方注意移动玻片方向与视野物象移动方向是相反向与视野物象移动方向是相反)。假如视野内亮度不适当，可经过升降集。假如视野内亮度不适当，可经过升降集光器位置或开闭光圈大小来调整，假如在调整焦距时，普通显微镜物距光器位置或开闭光圈大小来调整，假如在调整焦距时，普通显微镜物距在在cm左右。假如物距已远超出左右。假如物距已远超出cm，仍未看到物像，那可能是标本，仍未看到物像，那可能是标本未在视野内或转动粗准焦螺旋速度过快，此时应调整装片位置，然后再未在视野内或转动粗准焦螺旋速度过快，此时
7、应调整装片位置，然后再重复上述步骤，当视野中出现含糊物像时，就要换用细准焦螺旋调整，重复上述步骤，当视野中出现含糊物像时，就要换用细准焦螺旋调整，使看到物像愈加清楚。只有这么，才能缩小，切不可心急而盲目地上升使看到物像愈加清楚。只有这么，才能缩小，切不可心急而盲目地上升镜台。镜台。9/19 5、观察：、观察：使用准焦螺旋调整焦距，找到物象能够使用准焦螺旋调整焦距，找到物象能够说是显微镜使用中最主要一步，也是学生感觉最难一说是显微镜使用中最主要一步，也是学生感觉最难一步。用显微镜观察物体时，应双眼同时睁开，左眼向步。用显微镜观察物体时，应双眼同时睁开，左眼向目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使
8、镜筒缓缓目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。寻找范围，提升找到物像上升，直到看清物像为止。寻找范围，提升找到物像速度。速度。10/19 6、转换物镜：、转换物镜：使用低倍镜后换用高倍镜时应手握转换使用低倍镜后换用高倍镜时应手握转换器下层转动板转换物镜。不能用手指直接推转物镜，因为这器下层转动板转换物镜。不能用手指直接推转物镜，因为这么虽比较省力，但因转换器材料质地较软，精度较高，螺纹么虽比较省力，但因转换器材料质地较软，精度较高，螺纹受力不均匀很轻易松脱，轻易使物镜光轴发生偏斜。一旦螺受力不均匀很轻易松脱，轻易使物镜光轴发生偏斜。一旦螺纹破坏，整个转换器就会报
9、废。纹破坏，整个转换器就会报废。11/19 高倍镜使用方法：高倍镜使用方法：一定要先在低倍镜下选好一定要先在低倍镜下选好目标后，把需深入观察部位调到中心，同时把目标后，把需深入观察部位调到中心，同时把物象调整到最清楚程度，然后转动转换器，调换物象调整到最清楚程度，然后转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察面进行观察(预防高倍镜头碰撞玻片预防高倍镜头碰撞玻片)，如高倍镜头，如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜焦距没有调好，应重新操作。碰到玻片，说明低倍镜焦距没有调好，应重新操作。调整焦距：转换好高倍镜后，用左眼观察，物调整焦距
10、：转换好高倍镜后，用左眼观察，物象不太清楚，可将细调整器螺旋逆时针移动约象不太清楚，可将细调整器螺旋逆时针移动约0.51圈，即可取得清楚物象圈，即可取得清楚物象(切勿用粗调整器切勿用粗调整器!)。假如亮度不适当，可用集光器和光圈加以调整，如假如亮度不适当，可用集光器和光圈加以调整，如需要更换玻片标本时，必须顺时针需要更换玻片标本时，必须顺时针(切勿转错方向切勿转错方向)转动粗调整器使镜台下降，方可取下玻片标本。转动粗调整器使镜台下降，方可取下玻片标本。12/19 油镜使用方法：油镜使用方法：经低、高倍镜观察，然后将需深经低、高倍镜观察，然后将需深入放大部分移到视野中心。将集光器上升到最高位入放
11、大部分移到视野中心。将集光器上升到最高位置，光圈开到最大。转动转换器，使高倍镜头离开置，光圈开到最大。转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位玻片上滴加一滴香柏油，然通光孔，在需观察部位玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片距离，使镜头浸入油中而又不以压破载镜头与玻片距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。用左眼观察目镜，并慢慢转动细调整器玻片为宜。用左眼观察目镜，并慢慢转动细调整器至物象清楚为止。至物象清楚为止。假如不出现物象或者目标不理想要重找，在加假如不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外
12、重找时应按：低倍油区之外重找时应按：低倍高倍高倍油镜程序。在油镜程序。在加油区内重找应按：低倍加油区内重找应按：低倍油镜程序，不得经高倍油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头。镜，以免油沾污镜头。油镜使用完成，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜油镜使用完成，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上香柏油擦去，再用干擦镜纸擦洁净。头上和标本上香柏油擦去，再用干擦镜纸擦洁净。13/19 7、边观察边画图。、边观察边画图。8、整理登记：、整理登记：试验完成，取下标本片，把显微试验完成，取下标本片，把显微镜外表擦拭洁净。转动旋转器使镜头离开通光孔，镜外表擦拭洁净。转动旋转器使镜头离开通光孔，下降镜台，平放反光镜
13、，下降集光器下降镜台，平放反光镜，下降集光器(但不要接触反但不要接触反光镜光镜)、关闭光圈，推片器回位，盖上绸布和外罩，、关闭光圈，推片器回位，盖上绸布和外罩，放回试验台柜内。最终填写使用记录表。放回试验台柜内。最终填写使用记录表。14/19五、光学显微镜维护关键点：五、光学显微镜维护关键点：1、取送显微镜时一定要一手握住弯臂，另一手、取送显微镜时一定要一手握住弯臂，另一手托住底座。显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端托住底座。显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。不可把显微镜放滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。不可把显微镜放置在试验台边缘，以免碰翻落地。置在试验台边缘，以
14、免碰翻落地。2、观察时，不能随便移动显微镜位置。、观察时，不能随便移动显微镜位置。15/19 3、保持显微镜干燥、清洁，防止灰尘、水及化学、保持显微镜干燥、清洁，防止灰尘、水及化学试剂玷污。显微镜光学部分只能用特殊擦镜纸与溶试剂玷污。显微镜光学部分只能用特殊擦镜纸与溶液一同擦拭，不能乱用他物擦拭，更不能用手指触液一同擦拭，不能乱用他物擦拭，更不能用手指触摸透镜，以免汗液玷污透镜。切忌口吹手抹或用布摸透镜，以免汗液玷污透镜。切忌口吹手抹或用布擦，机械部分用布擦拭。擦，机械部分用布擦拭。水滴、酒精或其它药品切水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台，假如沾污应马上擦净。勿接触镜头和镜台，假如沾污应马
15、上擦净。4放置玻片标本时要对准通光孔中央，且不能反放置玻片标本时要对准通光孔中央，且不能反放玻片，预防压坏玻片或碰坏物镜。放玻片，预防压坏玻片或碰坏物镜。16/19 5、转换物镜镜头时，不要搬动物镜镜头，只能转、转换物镜镜头时，不要搬动物镜镜头，只能转动转换器。现在显微镜有电动转换动转换器。现在显微镜有电动转换,使用也很方便使用也很方便,是一个发展方向。是一个发展方向。6、切勿随意转动调焦手轮。使用微动调焦旋钮、切勿随意转动调焦手轮。使用微动调焦旋钮时，用力要轻，转动要慢，转不动时不要硬转。时，用力要轻，转动要慢，转不动时不要硬转。7、不得任意拆卸显微镜上零件，禁止随意拆卸、不得任意拆卸显微镜
16、上零件，禁止随意拆卸物镜镜头，以免损伤转换器螺口，或螺口松动后使物镜镜头，以免损伤转换器螺口，或螺口松动后使低高倍物镜转换时不齐焦。低高倍物镜转换时不齐焦。17/19 9 9、用毕将光源调到最小、用毕将光源调到最小,延长灯泡使用寿命。延长灯泡使用寿命。10 10、物镜和目镜生霉生雾处理方法：、物镜和目镜生霉生雾处理方法：准备准备30%30%无水乙醇无水乙醇+70%+70%乙醚，将不一样镜头单独分乙醚，将不一样镜头单独分开放置干燥剂器皿中，最好用棉花棒，纱布，柔软开放置干燥剂器皿中，最好用棉花棒，纱布，柔软刷子等比较柔软东西来擦拭，注意不能用力擦，以刷子等比较柔软东西来擦拭，注意不能用力擦，以预
17、防损伤镀膜层。油镜当初就要清洗，尤其是预防损伤镀膜层。油镜当初就要清洗，尤其是100X100X油镜，处理不妥话，前片轻易浸油或开胶。目镜能油镜，处理不妥话，前片轻易浸油或开胶。目镜能够自己拆下来清洗，够自己拆下来清洗，16X16X目镜注意别装反了，前片凹目镜注意别装反了，前片凹面在上。物镜不要随便拆下。指针不要用头发来做，面在上。物镜不要随便拆下。指针不要用头发来做，易弄脏镜头，厂家可配置一个指针。普通易弄脏镜头，厂家可配置一个指针。普通2 2个月最好个月最好能集中保养一次。显微镜多时，各个镜头要标号以能集中保养一次。显微镜多时，各个镜头要标号以免弄错了搭配。免弄错了搭配。18/19 11、透
18、镜清洁、透镜清洁 清洁灰尘用用棉花棒，纱布，柔软刷子等比较柔软清洁灰尘用用棉花棒，纱布，柔软刷子等比较柔软东西来，注意轻东西来，注意轻 柔柔 慢慢 缓。有些较顽固污迹如油迹，指纹缓。有些较顽固污迹如油迹，指纹等，能够用洁净软棉布，棉花棒镜头纸等蘸上无水酒精轻等，能够用洁净软棉布，棉花棒镜头纸等蘸上无水酒精轻轻擦去。假如是从油镜上擦去浸油，应用镜头纸，软棉布轻擦去。假如是从油镜上擦去浸油，应用镜头纸，软棉布或纱布，蘸上二甲苯轻轻擦去。注意，不要用二甲苯清洗或纱布，蘸上二甲苯轻轻擦去。注意，不要用二甲苯清洗双目镜筒底部入射透镜或目镜内棱镜表面。因为纯酒精和双目镜筒底部入射透镜或目镜内棱镜表面。因为纯酒精和二甲苯轻易燃烧，在将电源开关打开或关闭时要尤其当心二甲苯轻易燃烧，在将电源开关打开或关闭时要尤其当心不要引燃这些液体。防患于未然。不要引燃这些液体。防患于未然。12.定时检验定时检验 显微镜精细和珍贵，要求我们要愈加爱护它。为了显微镜精细和珍贵，要求我们要愈加爱护它。为了保持它性能稳定，我们提议您定时检验，保养。保持它性能稳定，我们提议您定时检验，保养。19/19
