1、 本 科 毕 业 论 文题目： 没食子酸纳米硒抗氧化性的测定学 院： 食品科学与工程学院 姓 名： XXX 学 号： XXXXXXXXX 专 业： 食品质量与安全 年 级： 食安 指导教师： 职称：XX 二 00XX 年 X 月没食子酸纳米硒抗氧化性的测定目 录摘 要 .IAbstract .II引 言 .III1 材料与方法 .- 1 -1.1 实验材料 .- 1 -1.1.1 主要原料 .- 1 -1.1.2 主要实验试剂 .- 1 -1.1.3 主要实验仪器设备 .- 1 -1.1.4 试剂的配置 .- 2 -1.2 实验方法 .- 2 -1.2.1 清除羟基自由基的测定 .- 2 -1
2、.2.1.1 实验原理 .- 2 -1.2.1.2 实验步骤 9-11.- 2 -1.2.2 ABTS+自由基清除能力的测定 .- 3 -1.2.2.1 实验原理 .- 3 -1.2.2.2 实验步骤 12-13 .- 3 -1.2.3 还原力的测定 .- 3 -1.2.3.1 实验原理 .- 3 -1.2.3.2 实验步骤 14-15 .- 4 -2 结果与分析 .- 4 -2.1 GASeNPs 对体外羟基自由基的清除率分析 .- 4 -2.2 GASeNPs 对体外 ABTS+自由基清除率分析 .- 5 -2.3 GASeNPs 的总还原力测定分析 .- 5 -3 小结与讨论 .- 6
3、-参 考 文 献 .- 7 -致 谢 .- 8 -没食子酸纳米硒抗氧化性的测定没食子酸纳米硒抗氧化性的测定I摘 要本文通过采用分光光度法对没食子酸纳米硒（GASeNPs）体外清除羟基自由基、ABTS+自由基和还原力进行测定，评价其抗氧化性。结果表明，与没食子酸（Gallic acid,GA）、维生素 C(Vc)相比，100-300 g/mL的 GASeNPs 对羟基自由基的清除率为 49.90%-96.86%，其清除率高于同等浓度下的 Vc 及 GA；5-25 g/mL的GASeNPs 对 ABTS+自由基的清除率 47.02%-97.57%，其清除率高于同等浓度下的Vc 及 GA；20-10
4、0 g/mL的 GASeNPs 对还原力的测定吸光度为 0.362-0.911，在同等浓度下其还原力大于 Vc，略低于 GA。实验结果显示，GASeNPs 具有较强的抗氧化活性。关键词：没食子酸纳米硒；抗氧化；自由基；清除率；还原力没食子酸纳米硒抗氧化性的测定AbstractIn this paper, the antioxidation of GASeNPs to hydroxyl free radicals, ABTS+ free radicals and reductive forces in vitro was determined by spectrophotometry with
5、the Spectrophotometric method. The results showed that compared with Gallic acid (Gallic acid,GA) and Vitamin C(Vc), 100-300 g/mL GASeNPs to hydroxyl radical scavenging rate of 49.90%-96.86%, its scavenging rate is higher than that the same concentration of Vc and GA; 5-25 g/mLGASeNPs to ABTS+ free
6、radicals scavenging rate 47.02%-97.57%, its scavenging rate is higher than that the same concentration of Vc and GA. The GASeNPs of 20-100 g/mL to the determination of reducing power absorbancy is 0.362-0.911, in the same concentration its reducing power is greater than Vc, slightly lower than GA. T
7、he experimental results show that GASeNPs has strong antioxidant.Key words:gallic acid modified selenium nanoparticles; anti-oxidant; free radical; scavenging rate; reducing power没食子酸纳米硒抗氧化性的测定III引 言没食子酸(Gallic acid,GA),化学名 3,4,5-三羟基苯甲酸,是一种天然的多酚类化物,广泛存在于中草药和水果类植物中,包括叶下珠、五倍子、余甘子、葡萄、甜茶、报春黄甙叶等提取物 1。没食子
8、酸具有抗炎、抗突变、抗氧化、抗肿瘤、抗自由基等多种生物活性,在食品、生物、医药、化工等领域有广泛的应用 2-3。硒是动物和人体健康生长发育所必需的微量元素 4。纳米硒是纳米级的单质硒 5。硒的缺乏还会严重影响机体的抗氧化系统，造成对细胞膜、蛋白质和 DNA 的损伤，进而干扰各类激素、生长因子和细胞活性素在体内执行的各项功能 6。长期以来，关于硒的报道主要集中在纳米硒源和无机硒源作用比较和剂量确定上，大量实验证实了纳米硒比无机硒毒性作用低，生物转化率高 7。GASeNPs 具有较好的稳定性，然而对 GASeNPs 的抗氧化能力的评价还未见报道，对此本文选用 GASeNPs 作为研究对象，特别针对
9、其体外其体外对各种自由基 (羟基自由基、ABTS +自由基及还原力的测定)的清除效果进行考察，并与 Vc 这个公认的自由基清除剂和 GA 做对比研究，评估 GASeNPs 的抗氧化能力，以期为GASeNPs 抗氧化作用在食品保鲜、医药、化妆品等领域提供理论依据。没食子酸纳米硒抗氧化性的测定- 1 -1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 主要原料GASe 溶胶的制备参考已发表的文献进行 GASe 的合成制备 8。称取 0.19 g没食子酸至 250 mL 烧杯中，用蒸馏水溶解后转移至 100 mL 容量瓶并用蒸馏水定容，配成 0.01 mol/L 的没食子酸储备液。称取 0.17 g 亚硒酸
10、钠至 50 mL 烧杯中，用蒸馏水溶解后转移至 10 ml 容量瓶并用蒸馏水定容，配成 0.1 mol/L 的亚硒酸钠储备液。然后在 25 mL 烧杯中按 1：6 的浓度加入 Na2SeO3 与没食子酸，利用盐酸将 pH 调至 3.0后，加热挥干后得到橙红色固相样品。将此样品加蒸馏水溶解，在透析袋中过夜透析除去未反应的没食子酸后，定容于 10 mL 容量瓶中得到 GASe 溶胶。 1.1.2 主要实验试剂绿矾 分析纯 天津市永大化学试剂开发中心水杨酸 分析纯 天津市永大化学试剂开发中心磷酸氢二钠十二结合水 分析纯 天津市永大化学试剂开发中心双氧水 分析纯 天津市大茂化学试剂厂无水乙醇 分析纯
11、天津市大茂化学试剂厂磷酸二氢钠二结合水 分析纯 天津市大茂化学试剂厂铁氰化钾 分析纯 天津市福晨化学试剂厂三氯乙酸 分析纯 天津市福晨化学试剂厂过硫酸钾 分析纯 阿拉丁试剂（中国）有限公司ABTS 分析纯 上海源叶生物科技有限公司三氯化铁 分析纯 西陇化工股份有限公司1.1.3 主要实验仪器设备电子分析天平 奥豪斯国际贸易（上海）有限公司移液枪 Genex BetaCL3 型恒温加热磁力搅拌器 巩义市予华仪器有限责任公司石英比色皿 宜兴市伟鑫仪器有限公司低速大容量离心机 上海安亭科学仪器厂可见分光光度计 上海元析仪器有限公司数显恒温搅拌循环水箱 常州国华电器有限公司超声波清洗机 宁波新芝生物科
12、技股份有限公司干燥箱 上海跃进医疗器械有限公司没食子酸纳米硒抗氧化性的测定1.1.4 试剂的配置6 mol/L 绿矾（ FeSO4.7H2O):称取 0.17 g 绿矾溶于烧杯中，并用蒸馏水定容于100 mL 容量瓶中摇匀。 6 mol/L 双氧水(H 2O2):称取 0.07 g30%的双氧水用蒸馏水定容于 100 mL 容量瓶中摇匀。 6 mol/L 水杨酸 (C7H6O3)：称取 0.08 g 水杨酸用无水乙醇溶解于烧杯中，并用无水乙醇定容于 100 mL 容量瓶中。 1 mg/mL 过硫酸钾：称取 0.10 g 过硫酸钾于烧杯中，用蒸馏水定容于 100 mL 的容量瓶中。 80%的乙醇
13、：取 40 mL 无水乙醇加入到 50 mL 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。ABTS 工作液：精密称取 40 mgABTS，加入 1 mg/mL 的过硫酸钾溶液 8 mL，密封后避光静置反应 16 h，定量转移到 250 ml 的容量瓶中，加入 32 mL 蒸馏水，用无水乙醇定容至刻度，放置 10 h 后使用。0.20 mol/L 磷酸盐缓冲液（pH=6.6）：甲液（磷酸氢二钠十二结合水），称取7.16 g 溶于烧杯中，用蒸馏水定容于 100 mL 的容量瓶中；乙液（磷酸二氢钠二结合水），称取 3.12 g 溶于烧杯中，用蒸馏水定容于 100 mL 的容量瓶中。取 40 mL 甲液，60 mL
14、 乙液混合，即配置成所需的 0.20 mol/L 磷酸盐缓冲液。1%铁氰化钾 :称取 1 g 铁氰化钾溶于烧杯中，加蒸馏水定容于 100 mL 的容量瓶中。0.1%三氯化铁:称取 0.10 g 的三氯化铁溶于烧杯中，用蒸馏水定容于 100 mL 的容量瓶中。10%三氯乙酸:称取 10 g 三氯乙酸溶于烧杯中，用蒸馏水定容于 100 mL 的容量瓶中。1.2 实验方法1.2.1 清除羟基自由基的测定1.2.1.1 实验原理根据 Fenton 方法产生OH 自由基的模型，H 2O2 与亚铁离子反应生成OH 自由基,该反应为：H 2O2+Fe2+OH+ OH+Fe3+自由基一般存活时间比较短而且具有
15、较高活性的特点，而水杨酸能有效地捕捉羟基自由基且产生有色产物，因此，若在该体系加入一定量的水杨酸，将发生颜色反应。生成的有色产物在 510 nm 处被较强地吸收。业的发展重点，进一步采取措施，加快发展。加快启动实施一批重大行动举措。加快论证，启动实施新型医疗惠民、新能源、空间基础设施建设等一批重大行动举措，培育一批新增长点，引领经济社会发展。泓域咨询MACRO/ 干混砂浆项目投资备案报告2、项目建成投产后，可以大幅度提高企业的经济效益，为公司进一步发展创造条件；更为重要的是，项目承办单位在多年的生产服务承包中，积累了大量的生产经验和管理经验，自主研发的项目产品技术含量高、性能优良、节能环境保护
16、，在整个相关行业中市场潜力巨大。把握深化改革开放的新机遇，通过深化改革解决突出问题，推动全方位对外开放，变外在压力为内在动力，推动形成面向未来更具国际竞争力的经济结构和体制机制。把握加快绿色发展的新机遇，走生态优先、绿色发展之路，引领全球绿色发展，也为自身赢得更大发展空间。二、必要性分析1、2019年是中国经济新常态新阶段的关键一年。一是经济增速换挡还没有结束，中国经济阶段性底部还没有呈现；二是结构调整远没有结束，结构性调整刚刚触及到本质性问题；三是新旧动能转化没有结束，政府扶持型新动能向市场型新动能转换刚刚开始，新动能难以在短期中撑起中国宏观经济的基石，宏观投资收益难以在短期得到根本性逆转；四是在各种内外压力的挤压下，关键性与基础性改革的各种条件已经具备，新一轮改革开放以及第二轮供给侧结构性改革的窗口期已经全面出现。2、实践证明，稳中求进工作总基调是我们治国理政的重要原则，也是做好经济工作的方法论。要清醒看到，我国经济运行仍存在不少突出矛盾和问题，世界经济仍处于缓慢复苏的进程中。越是面对复杂的国内国际经济形势，就越要认识到明年贯彻好稳中求进工作总基调具有特别重要的意
