1、ICS 65.150CCS B 52 54西藏自治区地方标准DB 54/T 02412021拉萨裂腹鱼人工繁殖技术规范2021 - 05 - 24 发布2021 - 06 - 24 实施西藏自治区市场监督管理局发 布DB54/T 0241-20211目 次前 言.21 范围.32 规范性引用文件.33 术语和定义.34 繁殖条件.35 亲鱼选择.36 人工催产.47 产后护理.58 受精卵孵化.5附录 A （资料性附录） 拉萨裂腹鱼外观特征及形状 .7附录 B （规范性附录） 鱼卵计数方法 .8附录 C （规范性附录） 鱼卵受精率孵化率测定 .9DB54/T 0241-20212前 言本标准按
2、照 GB/T 1.1 制定本标准的某些内容可能涉及到专利，本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由西藏自治区农牧科学院水产科学研究所提出。本标准由西藏自治区农牧业标准化技术委员会归口。本标准由西藏自治区农牧科学院水产科学研究所负责起草。本标准主要起草人：曾本和、王金林、刘海平、王万良、牟振波、旺久、次仁卓嘎、扎西央宗。本标准为首次制定。DB54/T 0241-20213拉萨裂腹鱼人工繁殖技术规范1范围本标准规定了野生拉萨裂腹鱼繁殖条件、 亲鱼选择、 人工催产、 产后护理及受精卵孵化的技术要求。本标准适用于拉萨裂腹鱼的人工繁殖。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡
3、是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 11607 渔业水质标准NY 5071 无公害食品渔用药物使用准则3术语和定义亲鱼 ： 形态特征符合分类学上拉萨裂腹鱼的有关规定，具有繁殖能力的雌、雄鱼，也称种鱼。拉萨裂腹鱼外观特征及形状见附录A。4繁殖条件4.1繁殖季节4 月上旬至 5 月上旬。4.2繁殖环境条件4.2.1繁殖水温繁殖水温应为1115 。4.2.2繁殖用水水质应符合GB 11607的规定。5亲鱼选择5.1亲鱼来源亲鱼来自野生捕捞。5.2亲鱼的捕捞与运输DB54/T 0241-20214亲鱼用围网捕捞后
4、，用活鱼运输设备充氧运输到繁殖基地。一般运输密度为低于200 kg/m3（鱼/水） ，具体依运输时间确定。运输时间在1 d以上，运输密度低于100 kg/m3；运输时间在1 d以内，运输密度低于200 kg/m3。5.3亲鱼暂养暂养池水温11.015.0 ，暂养密度1020 kg/m3，暂养期间流水池水流流速0.10.4 m/s，水交换速度70150 L/min，溶解氧保证在6 mg/L以上。5.4亲鱼选择5.4.1亲鱼质量体质健壮、无病无伤、无畸形，鳍鳞完整。5.4.2可繁殖亲鱼体长与体重雌鱼体重1050 g，体长48.5 cm；雄鱼体重346 g，体长34 cm。5.4.3可繁殖亲鱼表观特
5、征雌鱼表观特征：腹部膨大、柔软，有明显的卵巢轮廓，肛门略突出、发红，倒提腹腔下塌。雄性表观特征：腹部狭长，吻端出现明显珠星，轻压腹部，泄殖孔有乳白色精液流出，遇水即散。6人工催产6.1催产催产前，先用麻醉剂将亲鱼麻醉，再分别给雌鱼和雄鱼打催产针；雌鱼：根据亲鱼性腺成熟度确定采用1针注射或者2针注射。成熟度较好的亲鱼采用1针注射法，每千克雌鱼注射10 mg地欧酮和10 g促黄体释放激素A2，成熟度较差的亲鱼采用2针注射法，第一针每千克雌鱼注射2 mg地欧酮和2 g促黄体释放激素A2，24 h后注射第二针，每千克雌鱼注射8 mg地欧酮和8 g 促黄体释放激素A2；雄鱼：雄鱼采用1针注射法，在雌鱼注
6、射催产药物24 h后，每千克雄鱼注射5 mg地欧酮和5 g 促黄体释放激素A2。雌鱼成熟度较好特征 ： 雌鱼腹部膨大、柔软，有明显的卵巢轮廓，肛门略突出、发红，倒提腹腔下塌。雌鱼成熟度较差特征：腹部膨大、柔软，有明显的卵巢轮廓，腹部较硬，倒提下塌不明显。6.2效应时间对性腺成熟度较好的亲鱼采用1针注射法，雌鱼效应时间7296 h； 性腺成熟度较差的亲鱼采用2针注射法，雌鱼效应时间在96120 h。雄鱼效应时间48 h。6.3采卵采卵前，对所用工具进行消毒。采卵时用毛巾擦干鱼体及生殖孔，鱼体头朝上，尾部斜向下对着鱼卵收集装置挤卵，将卵粒顺盆边流入。挤卵时一只手抓住尾柄，用身体拖住鱼体，另一只手从
7、前向后挤DB54/T 0241-20215压鱼体腹部，先挤出的数粒卵粒废弃，若出现带血丝鱼卵、卵不游离呈团状、夹杂卵巢膜时，应立即停止采卵，每尾亲鱼采卵时间不超过1 min。6.4采精采精前，对所用工具进行消毒。采卵时用毛巾擦干鱼体及生殖孔，鱼体头朝上，尾部斜向下，泄殖孔对着精液收集装置挤精液。挤精液过程中遮光，精液冰盒中保存。精液显微镜检测，合格精液加入生理盐水中激活率80%以上，激活时间4060 s。6.5授精采卵后，按雌亲鱼和雄亲鱼2： 1或3： 1比例进行配比，将雄鱼精液迅速倒入已采好的鱼卵中，用柔软羽毛迅速搅匀，沿盆内壁加入相当于总卵量（kg） 30%的生理盐水，迅速搅拌1 min，
8、再继续加入相当于总卵量50%的生理盐水，搅拌均匀后静置35 min。6.6清水冲洗用清水反复漂洗受精卵， 洗去受精卵中多余的精液及鱼卵收集装置中的脏物， 直至鱼卵收集装置中水质清澈无杂质。7产后护理产后亲鱼注射1020万单位青霉素钾，在流速0.10.4 m/s，水交换速度70150 L/min环境下冲水4060 min，再用23%的Nacl浓度盐水消毒，提高其成活率。8受精卵孵化8.1孵化装置使用孵化槽和溢水型鱼卵孵化器结合进行孵化。8.2孵化条件水质应符合GB 11607的规定。孵化水温920 ，pH 7.58.5，溶解氧大于6 mg/L；水流量保持在317.5 L/min，使受精卵在浮性孵
9、化框中处于静置状态；鱼卵孵化前，必须对所有孵化设备、工具进行消毒，所用渔药应符合NY 5071的规定。在日平均水温12 的情况下，从受精至出膜，孵化时间1114 d。8.3孵化方法在平均水温12 ，鱼卵授精后的前4 d（受精卵发育到肌节出现期前） ，肌节出现期前，采用平列槽和孵化框孵化；4 d后，采用圆柱形溢水型孵化；鱼卵授精4 d后（受精卵发育到肌节出现期后） ，剔除死卵，将受精卵移入圆柱溢水型鱼卵孵化器中孵化，直到鱼苗全部出膜。平列槽孵化 ： 用于肌节出现期以前受精卵。孵化框置于平列槽中，从平列槽的一端泵入曝气后的井水，将受精卵平铺于孵化框内，放卵密度以均匀铺满孵化框为宜；平列槽中水流速为
10、0.010.02 m/s，水流量317.5 L/min，溶氧6 mg/L以上，水温9.020.0 ，pH 7.58.5。每隔8 h轻轻搅动鱼卵1次。圆柱溢水型鱼卵孵化器 ： 用于肌节出现期以后受精卵。鱼卵孵化器从底部连接外部水源，保持持续进水；将受精卵移入鱼卵孵化器，受精卵在底部水流作用下上下翻滚；出苗后的卵膜和死卵漂浮在水面上，并顺水流从鱼卵孵化器上部的溢水口排出 ； 将鱼卵孵化器从底部连接外部鱼池，取出鱼卵孵化器内DB54/T 0241-20216的进水管，鱼苗随水流一起从鱼卵孵化器底部排出到鱼池中，完成鱼苗的收集。溢水型鱼卵孵化器用水为曝气后的井水，水温920 ，溶解氧保证在6 mg/L
11、以上，出水孔的水流速为0.10.2 m/s，孵化密度为0.10.2万粒每升水。8.4孵化管理孵化过程中水霉防治方法应符合 NY 5071 的规定。每天定时测定水温、溶解氧，记录死卵数量，并做好孵化记录。DB54/T 0241-20217A A附录A（资料性附录）拉萨裂腹鱼外观特征及形状图1 拉萨裂腹鱼外观特征及形状素描摘自：西藏鱼类及其资源图2 拉萨裂腹鱼照片DB54/T 0241-20218B B附录B（规范性附录）鱼卵计数方法先抽样,用电子天平称取 3 g 鱼卵，计数其卵粒数，然后计算出 1 g 鱼卵的卵粒数；重复取样 3 次，取平均值。再用重量法统计鱼卵总数,将所有鱼卵用校准过的电子天平
12、进行称量，鱼卵总克数乘以 1 g鱼卵的粒数，即为鱼卵总数量。 鱼卵数（粒）=总重1 g 鱼卵卵粒数DB54/T 0241-20219C C附录C（规范性附录）鱼卵受精率孵化率测定C.1 受精率：在平均水温 12 条件下，孵化第 3 d（原肠中期）时进行统计。方法是从每个孵化框中随机取 300 粒鱼卵用解剖镜观察鉴别，胚胎发育正常（胚盘透明）为受精卵，并以此计算受精率。受精率=孵化第 3 d 活卵数（原肠中期受精卵数）/孵化鱼卵总数100%。以重量法计算仔鱼总数。C.2 孵化率：在平均水温 12 条件下，孵化第 3 d（原肠中期）采用体积法统计受精卵总数，第4 d（原肠中期）至鱼苗全部出膜每天记录死卵数，以此计算孵化率。孵化率=（孵化第 3 d 活卵总数-孵化第 3 d 至鱼苗全部出膜死卵数）/孵化第 3 d 活卵总数100%。
