1、 生化实验技术专题主要内容：介绍生物大分子分离纯化的一般步骤和原则；介绍层析技术、电泳技术、离心技术、超过滤技术的原理及其应用；总结蛋白质、核酸、酶、氨基酸测定的主要方法。目录第一节 生物大分子物质的制备第二节 几类主要的生化实验技术第三节 蛋白质、核酸的检测第一节 生物大分子物质的制备一一般过程和原则二注意事项三纯化方案的设计和评价例：宇佐美曲霉537酸性蛋白酶的纯化确立有效成分的测定方法材料的选择和预处理细胞的破碎和细胞组分分离有效成分的抽提有效成分的纯化和浓缩生物大分子分离纯化的一般步骤和原则层析法 电泳法 超离心法 透析和超滤盐析（硫酸铵盐析）等点电沉淀有机溶剂沉淀离心前处理 粗分级
2、细分级 材料选择与处理细胞破碎（机械破碎、溶账和自溶、酶解、化学处理）生物组织 提取液 粗产品 结晶分子大小溶解度电荷性质吸 性质生物 和 原理硫酸铵溶液 和度计 注意事项原则： 生物分子 性、 解1 制 的pH2 制 3注意提取过程 的溶液 4 提纯过程 一 子 宇佐美曲霉537酸性蛋白酶的纯化纯化步骤 蛋白 纯化 （mg） （U） （U/mg蛋白） （%）1、粗酶液 80 4320 54 1 1002、currency1沉淀 29 3585 123 2.27 833、“酸沉淀 21 2980 141 2.64 694、盐析 4 1771 464 8.52 415、沉淀 1 1166 110
3、4 20.29 276、结晶 0.12 130 1072 19.70 3第二节 几类fi要的生化实验技术一、层析技术二 、电泳技术三 、离心技术fl 、透析和超过滤一层析技术（chromatography）1层析技术一般原理2层析技术分类3 层析技术层析技术原理层析技术一 物理的分离方法 层析”溶的 组成一定 吸 的液）一 （液 ）层析 物 组分理化性质（ 吸 、分子 和大小、分子 性、分子 和 、溶解度等）的 组分 程度 分 定 过 组分 度 分离物层析 的分离 定物的组分 的分 一般分 ” ） 物组分的分 大 分离开物质层析 的行为并 直接 定其 取 它的有效分 =某一物质A 的 量某一物质B 的 量
