1、耳电针缓解功能性消化不良大鼠胃部高敏的效应规律及对神经生长因子的影响周静珠1，程宏亮2，陈欢1，徐万里1，朱伟坚1，周帅1，张朝晖1(1 南京医科大学第一附属医院，江苏 南京 210029;2 南京中医药大学附属医院，江苏 南京 210029)摘要 目的观察耳电针在降低功能性消化不良(FD)大鼠胃部高敏感性中的作用规律，并探讨其对神经生长因子(NGF)的影响。方法实验一:将 16 只 10 d 龄 SD 雄性幼鼠随机分为对照组和耳电针组，每组 8 只。耳电针组幼鼠通过三硝基苯磺酸灌肠诱导 FD 胃部高敏模型，第 8周龄时选取双侧耳穴“胃”穴进行连续 5 d 电针刺激;对照组幼鼠仅给予生理盐水灌
2、肠。分别记录2 组大鼠第 8 周龄干预前颈部斜方肌肌电积分、腹部回撤反射评分和耳电针组大鼠单次耳电针后、5 次耳电针后及耳电针结束后第 3，5，10 天颈部斜方肌肌电积分，分析耳电针的即时效应、累加效应和维持效应。实验二:将 40 只 10 d 龄 SD 雄性幼鼠随机分为对照组、模型组、耳电针组、电针对照组，每组 10 只。除对照组外，其余组幼鼠通过三硝基苯磺酸灌肠诱导 FD 胃部高敏模型。第 8周龄时，耳电针组选取双侧耳穴“胃”穴、电针对照组选取双侧耳垂进行连续 5 d 电针刺激。干预结束后处死各组大鼠，HE 染色观察各组胃底及远端结肠的病理改变，ELISA 法检测血浆去甲肾上腺素(NE)水
3、平，T PC 和 Western blot 法检测胃底 NGFmNA 和蛋白表达情况。结果耳电针组大鼠第 8 周龄电针前胃部球囊扩张压力为 60 和 80 mmHg 时的肌电积分和腹部回撤反射评分均显著高于对照组(P 均 0 05)。胃部球囊扩张压力为 60 和 80 mmHg 时，单次耳电针后的肌电积分均明显低于第 8 周龄电针前(P 均 0 05)，5 次耳电针后的肌电积分均明显低于单次耳电针后(P 均 0 05)，耳电针结束后第 3 天的肌电积分与 5 次耳电针后比较差异均无统计学意义(P 均 0 05)，耳电针结束后第 5 天的肌电积分仍明显低于第 8 周龄电针前(P 均 0 05)，
4、耳电针结束后第 10 天的肌电积分与第 8 周龄电针前比较差异均无统计学意义(P 均 0 05)。各组大鼠胃底、结肠 HE 染色均未见明显炎症反应。模型组和电针对照组大鼠血浆 NE 水平、胃底组织中 NGFmNA 和蛋白相对表达量均明显高于对照组(P 均 0 05)，耳电针组大鼠血浆 NE 水平、胃底组织中 NGF mNA 和蛋白相对表达量均明显低于模型组和电针对照组(P 均 0 05)。结论耳电针可有效缓解功能性消化不良大鼠胃部高敏，多次干预效果更显著，且有一定的维持效应，其镇痛机制可能与调控血浆 NE 和胃底 NGF 表达有关。关键词 耳穴疗法;功能性消化不良;内脏高敏;神经生长因子doi
5、:10 3969/j issn 1008 8849 2022 22 004 中图分类号 332 文献标识码 A 文章编号 1008 8849(2022)22 3083 07 作者简介 周静珠，女，硕士，副主任中医师，研究方向为功能性胃肠病的诊治。基金项目 江苏省自然科学基金项目(BK20191065)Effect laws of ear electroacupuncture in relieving gastric hypersensitivity in rats with functionaldyspepsia and its effect on nerve growth factorZHO
6、U Jingzhu1，CHENG Hongliang2，CHEN Huan1，XU Wanli1，ZHU Weijian1，ZHOU Shuai1，ZHANG Zhaohui1(1 The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University，Nanjing 210029，Jiangsu，China;2 Affiliated Hospital ofNanjing University of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210029，Jiangsu，China)Abstract:Objecti
7、ve It is to observe the laws of ear electroacupuncture in reducing gastric hypersensitivity in rats withfunctional dyspepsia(FD)，and to explore its effect on nerve growth factor(NGF)Methods Experiment I:Sixteen10-day-old male SD rats were randomly divided into control group and ear electroacupunctur
8、e group，with 8 rats in each3803现代中西医结合杂志 Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine 2022 Nov，31(22)group The young rats in the ear electroacupuncture group were given trinitrobenzene sulfonic acid by enema to induce FDgastric hypersensitivity models The EMG scores of cervi
9、cal rhomboid muscle and abdominal retraction reflex scores of therats at the 8 th week of age in the two groups before the intervention，and the EMG scores of cervical rhomboid muscle ofrats in the ear acupuncture group after once ear acupuncture，5 times ear acupuncture and on the 3 rd，5 th and 10 th
10、 dayafter the end of ear acupuncture were recorded respectively，to analyze the immediate，cumulative and maintenance effectsof ear acupuncture Experiment II:Forty 10-day-old male SD rats were randomly divided into control group，modelgroup，ear electroacupuncture group and electroacupuncture control gr
11、oup，with 10 rats in each group The FD gastric hy-persensitivity model was induced by enema with trinitrobenzene sulfonic acid in the pups of all groups except the controlgroup At the age of 8 weeks，the ear acupuncture group selected bilateral ear acupuncture points“stomach”and the con-trol group sel
12、ected bilateral ear lobes for 5 d of continuous electroacupuncture stimulation After the intervention，the rats ineach group were executed，and the pathological changes of gastric fundus and distal colon were observed by HE staining，plasma norepinephrine(NE)level was measured by ELISA，and mNA and prot
13、ein expression of gastric fundic nervegrowth factor(NGF)were detected by T-PC and Western blot esults The EMG scores and abdominal retraction re-flex scores of the rats in the ear electroacupuncture group were significantly higher than those in the control group at 60 and80 mmHg of gastric balloon d
14、ilatation pressure before ear electroacupuncture at the 8 th week of age(P 0 05)The EMGscores after once ear electroacupuncture were significantly lower than those before electroacupuncture at the 8 th week of ageat gastric balloon dilatation pressures of 60 and 80 mmHg(all P 0 05)，the EMG scores af
15、ter 5 times ear electroacu-puncture were significantly lower than those after once(all P 0 05)，the differences between the EMG scores on the 3 rdday after the end of the ear electroacupuncture and after 5 times ear electroacupuncture were not statistically significant(allP 0 05)，and the EMG scores o
16、n the 5 th day after the end of the ear electroacupuncture were still significantly lowerthan those before ear electroacupuncture at the 8 th week of age(all P 0 05)，and the differences between the EMGscores on the 10th day after the end of the ear electroacupuncture and those before the electroacup
17、uncture at 8 th week ofage were not statistically significant(all P 0 05)No obvious inflammatory reaction was found in HE staining of stom-ach fundus and colon of rats in each group The level of plasma NE and the relative expression of NGF mNA and proteinin the gastric fundus tissue of rats in the m
18、odel group and the electroacupuncture control group were significantly higher thanthose in the control group(all P 0 05)，the level of plasma NE and the relative expression of NGF mNA and protein inthe gastric fundus tissue of rats in the ear electroacupuncture group were significantly lower than tho
19、se in the model groupand the electroacupuncture control group(all P 0 05)Conclusion Auricular electroacupuncture can effectively relievethe gastric hypersensitivity in rats with functional dyspepsia，and the effect of multiple interventions is more significant，andhas a certain maintenance effect Its
20、analgesic mechanism may be related to the regulation of the expression of NE in plasmaand NGF in gastric fundusKeywords:ear point therapy;functional dyspepsia;visceral hypersensitivity;nerve growth factor慢性内脏痛是功能性消化不良(functional dys-pepsia，FD)患者最常见的症状之一，其中内脏高敏是 FD 慢性内脏痛关键机制之一1 3。神经生长因子(NGF)在启动以及长期加剧
21、炎症反应的疼痛敏感性中起着关键作用，其能引起传入神经敏化，从而引起内脏高敏4。相关实验研究发现，幼年大鼠的肠道轻度炎症刺激可引起成年后出现自主神经功能紊乱，交感神经活性增加而迷走神经低张，血浆去甲肾上腺素(NE)水平升高，胃底部肌层 NGF 表达上调，继而出现内脏高敏5。在 FD 患者中也检测到胃底部 NGF mNA 表达升高6。目前内脏痛的治疗手段非常有限且效果不佳，长期服用镇痛药物易出现成瘾性，并可能出现继发性消化道损伤。耳穴疗法是祖国传统外治疗法，广泛运用临床各科疾病。基于耳郭上独特的体表迷走神经耳支分布，耳穴疗法可以通过刺激耳迷走神经来调控内脏感觉、运动7 8。耳迷走神经主要分布在耳郭
22、的耳甲区，本课题组前期研究显示单次耳电针耳甲区“胃”穴可以有效缓解 FD 大鼠内脏高敏，且此效应与调节迷走神经功能密切相关9。本研究通过建立幼鼠三硝基苯磺酸灌肠诱导 FD 胃部高敏模型，观察肌电图、动物行为学、血浆 NE、胃底 NGF mNA 和蛋白表达情况，进一步研究了耳电针的效应规律及机制。1实验材料与方法1.1实验动物购入 SPF 级别孕鼠 辽宁长生生物技术股份有限公司，许可证号:SCKX(辽)2020 4803现代中西医结合杂志 Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine 2022 Nov，
23、31(22)0001，选取新生雄性大鼠进入实验。实验动物饲养条件为室温22 24，湿度50%，光照周期12 h/12 h，母鼠自由进食，幼鼠与母鼠同笼饲养。本研究获得 南京医科大学实验动物福利伦理委员会 审查同意(IACUC 2004001)。1.2主要试剂及仪器华佗牌一次性无菌针灸针(0 25 mm 25 mm，苏州医疗用品厂有限公司，中国)，电针仪(CMNS6 2 型，无锡佳键，中国);肌电图电极线(AE Medical，Farmingdale，NJ，美国);肌电图放大器(EMG 100C;Biopac systems，Inc，SantaBarbara，CA，美国);大鼠 NE 酶联免疫分
24、析试剂盒(MM 203021，酶免，中国);酶标仪(MultiskanFC，Thermo，美国);低温离心机(D3024，SCILO-GEX，美国);eal time PC 仪(TL998 IV，天隆科技，中国);梯度 PC 仪(TC1000 G，SCILOGEX，美国);DYCZ 24DN 型垂直电泳装置(北京市六一仪器厂，中国);IPA 裂解液，BCA 试剂盒、GAPDHpolyclonal antibody、NGF abbit pAb(南京恩晶生物，中国)。1.3实验方法按照实验目的，为了减少实验操作对观察指标的影响，分为 2 部分实验。1.3.1实验一将 16 只 10 d 龄雄性幼鼠
25、随机分为对照组和耳电针组，每组 8 只。耳电针组幼鼠参照文献 4 制备 FD 胃部高敏模型:用 1 mL 注射器抽取配置好的三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠溶液(用量为 130 mg/kg，溶解入含 10%乙醇的生理盐水0 2 mL 中)，然后将1 mL 注射器连接2 cm 的细软管插入幼鼠远端结肠灌肠，灌肠后保持头朝下位置 2min，以防止液体流出。对照组幼鼠灌入等量生理盐水。造模后，所有幼鼠与母鼠继续共同饲养。2 组大鼠第 7 周龄时，埋置胃部气囊(腹腔注射 2%戊巴比妥钠 30 mg/kg 麻醉后进行腹部剃毛，用外科刀片做前正中切口，打开腹腔，找到胃底，做荷包缝合，用眼科剪剪开小口，插
26、入气囊，连接气囊的 PE 管从肌肉层穿出到皮下走行至颈部出)和颈部肌电图检测电极(于大鼠颈部一侧肩峰下斜方肌埋置一对肌电图电极，电极线留在颈部与 PE 管一起穿出)，恢复 1周后，第 8 周龄进入实验。对照组大鼠不做特殊处理;耳电针组大鼠接受电针耳穴刺激:采用 2 0%2 5%异氟烷吸入麻醉后，将大鼠放入特定装置固定，麻醉清醒后开始电针治疗。参照人体耳穴分布，选用双侧耳穴“胃”穴(参照人体的耳穴“胃”，属于耳迷走神经分布区)9 10。针刺后连接电针，电针参数:2 Hz，连续波，1 0 1 5 mA(以大鼠耳部微微颤动为度)。每次治疗 30 min，每日1 次，连续5 次。1.3.2实验二将 4
27、0 只 10 d 龄雄性幼鼠随机分为对照组、模型组、耳电针组、电针对照组，每组 10只。除对照组外，其余组幼鼠均按照实验一中方法建立 FD 胃部高敏模型。各组大鼠第 8 周龄进入实验，耳电针组按照实验一中方法进行电针，电针对照组选取双侧大鼠耳垂进行电针(其余操作同耳电针组)，每次治疗 30 min，每日1 次，连续5 次。对照组和模型组大鼠不做针刺干预，每日抓取固定于特殊装置内，连续 5 d。1.4检测指标及方法1.4.1实验一分别记录 2 组大鼠第 8 周龄时(电针干预前)颈部斜方肌肌电积分、腹部回撤反射评分和耳电针组单次耳电针后(即时效应)、5 次耳电针后(累加效应)及耳电针结束后第 3，
28、5，10 天(维持效应)颈部斜方肌肌电积分。肌电检测方法:将肌电图电极连接肌电图记录仪，用三通管分别连接胃部气囊的 PE 管、血压计和血压计气囊，测定在不同压力下(20，40，60，80 mmHg，1 mmHg=0 133kPa)肌电图的数值，通过肌电分析软件自动对原始数据进行滤波降噪处理，数据归一化与统计分析。腹部回撤反射评分方法及标准:将大鼠放于特定的透明固定器，使之能自由活动而便于观察。给予大鼠胃部气囊充气后进行不同压力(20，40，60，80mmHg)刺激，引起大鼠的疼痛。0 分:对胃部扩张无反应;1 分:有动作停顿后出现短暂的头部运动行为;2 分:可见腹部肌肉收缩;3 分:有腹部抬起
29、行为;4 分:身体拱起，并抬起盆腔和阴囊11。1.4.2实验二1.4.2.1胃壁和肠壁病理形态各组大鼠在相应处理5 d 结束后，给予巴比妥钠100 mg/kg 腹腔注射麻醉，迅速开腹，取胃底部和远端结肠，用 10%福尔马林固定，脱水，石蜡包埋，切片经 HE 染色，光学显微镜下观察胃壁和肠壁有无结构改变。1.4.2.2血浆 NE 水平心脏取血，按照 ELISA 说明书检测血浆 NE 水平。1.4.2.3胃底组织中 NGF mNA 表达情况采用T PC 法检测:TIzol 试剂盒提取胃底组织内总NA，反转录合成 cDNA。引物序列:actin 上游5 TGCTATGTTGCCCTAGACTTCG
30、3，下游 5GTTGGCATAGAGGTCTTTACGG 3;NGF 上游 5CCAGAGGCGGGGTTTCAT 3，NGF 下 游 55803现代中西医结合杂志 Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine 2022 Nov，31(22)TGAGACACTCGCTCAGCTTC 3。反应体系:2 qPC MasterMix 10 L，Forward Primer 0 6 L，e-verse Primer 0 6 L，模板1 L，Nuclease FreeWater7 8 L。反应条件:95 0 1
31、0 min;95 0 5 s，60 0 30 s，40 个周期;熔解曲线:60 95 0，0 5，5s/次。按照 2 Ct相对定量计算公式计算目的基因相对表达量。1.4.2.4胃底组织中 NGF 蛋白表达情况采用Western blot 法检测:取 80 冰冻的胃底组织，匀浆、裂解、离心后取上清液，采用 BCA 蛋白定量法检测蛋白浓度，配制 SDS 变性聚丙烯酰胺凝胶，将蛋白样品与 5 上样缓冲液混合后，煮沸变性 5 min，冰浴 5 min。上样，10%聚丙烯酰胺凝胶电泳，4 350 mA 恒流转膜 2 h，将膜置于 1 孵育封闭液中，室温摇动封闭 2 h，加一抗孵育封闭液中，4 摇动过夜。
32、洗膜 4 次，加二抗孵育封闭液中，室温作用1 5 h，洗膜 4 次后显影机中显影。使用 Image J 测量灰度值，以目的蛋白与内参 GAPDH 灰度值的比值作为相对表达量。1.5统计学方法应用 SPSS 22 0 统计软件进行数据统计学处理，符合正态分布的计量数据采用均数 标准差(?x s)表示，重复测量数据用两因素方差分析，2 组比较采用独立样本 t 检验，多组比较采用单因素方差分析，组内两两比较用 LSD 检验，P 0 05 为差异有统计学意义。2结果2.1实验一中 2 组大鼠肌电积分和腹部回撤反射评分比较胃部球囊扩张压力为 40，60 和 80 mmHg时，耳电针组大鼠第 8 周龄电针
33、前的肌电积分均明显高于对照组(P 均 0 05);胃部球囊扩张压力为60 和 80 mmHg 时，耳电针组大鼠第 8 周龄电针前的腹部回撤反射评分均明显高于对照组(P 均 0.05)。见图 1。2.2实验一中耳电针组大鼠不同时间点肌电积分图 1不同胃部球囊扩张压力下 2 组大鼠第 8 周龄时肌电积分和腹部回撤反射评分比较胃部球囊压力为 20 和 40 mmHg 时，单次耳电针后、5 次耳电针后、耳电针结束后第 3，5，10 天的肌电积分与第 8 周龄电针前的肌电积分比较差异均无统计学意义(P 均 0 05)。胃部球囊扩张压力为 60 和 80 mmHg 时，单次耳电针后的肌电积分均明显低于第
34、8 周龄电针前(P 均 0 05);5 次耳电针后的肌电积分均明显低于单次耳电针后(P 均 0.05);耳电针结束后第 3 天的肌电积分与 5 次耳电针后比较差异均无统计学意义(P 均 0 05);耳电针结束后第 5 天的肌电积分均明显高于 5 次耳电针后(P 均 005)，仍明显低于第8 周龄电针前(P 均 0.05);耳电针结束后第 10 天的肌电积分均明显高于 5 次耳电针后(P 均 0 05)，与第 8 周龄电针前比较差异均无统计学意义(P 均 0 05)。见图 2。2.3实验二中各组大鼠胃底、远端结肠 HE 染色形态胃底 HE 染色显示:对照组大鼠胃底部黏膜层被覆单层柱状上皮，排列整
35、齐，固有层内有胃腺，胃腺颈部可见少量黏液细胞，各部位未见明显病变;各造模组大鼠胃壁组织结构同对照组，黏膜层上皮细胞无变性坏死，胃腺颈部黏液细胞数量轻度增多，固有层无增多的炎细胞，黏膜下层无充血、水肿，无炎细胞浸润，肌层细胞无变性坏死，见图 3。远端结肠HE 染色显示:对照组和各造模组大鼠远端结肠黏膜上皮细胞无变性、坏死，黏膜固有层和黏膜下层无充血、水肿，无炎细胞浸润，肌层、浆膜层无炎细胞浸润或其他病变。见图 4。2.4实验二中各组大鼠血浆 NE 水平比较模型组和电针对照组大鼠血浆 NE 水平均明显高于对照组(P 均 0 05)，耳电针组大鼠血浆 NE 水平均明显低于模型组与电针对照组(P 均
36、005)。见图5。2.5实验二中各组大鼠胃底组织中 NGF mNA 及蛋白表达情况比较模型组和电针对照组大鼠胃底组织中 NGF mNA 和蛋白相对表达量均明显高于对照组(P均 0 05)，耳电针组大鼠胃底组织中6803现代中西医结合杂志 Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine 2022 Nov，31(22)图 2不同胃部球囊扩张压力下耳电针组大鼠不同时间点肌电积分图 3对照组和胃部高敏各组大鼠胃底组织病理形态(HE 染色，200)图 4对照组和胃部高敏各组大鼠结肠组织病理形态(HE 染色，200
37、)7803现代中西医结合杂志 Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine 2022 Nov，31(22)图 5对照组和胃部高敏各组大鼠血浆 NE 水平NGF mNA 和蛋白相对表达量均明显低于模型组和电针对照组(P 均 0 05)。见图 6 及图 7。图 6对照组和胃部高敏各组大鼠胃底组织中NGF mNA 相对表达量图 7对照组和胃部高敏各组大鼠胃底组织中 NGF 蛋白表达情况3讨论灵枢口问 中记载:“耳者，宗脉之所聚也。”耳与诸多经络有连属关系，刺激耳穴可调和阴阳和脏腑功能。诸多研究表明，耳郭上分
38、布着人体唯一的体表迷走神经，刺激耳迷走神经分布区可以激活大脑相关通路，从而激活迷走神经传出支配内脏的纤维，对内脏功能起调节作用7 8。本课题组前期研究显示，耳电针可通过改善迷走神经活性，缓解FD 内脏高敏，即时效应明显9。诸多研究表明，针灸镇痛具有累加效应和长时程维持效应10 11。李为民等12 采用电针“足三里”和“上巨虚”干预肠易激综合征大鼠内脏痛，结果显示单次电针 5 min 后即开始显现镇痛效应，20 30min 后达到高峰，能维持 20 90 min;且多次电针疗效优于单次电针，停止电针后镇痛效应仍可以维持一段时间。吴鎏桢等13 研究表明，电针刺激对大鼠吗啡戒断症状的抑制作用有累加效
39、应，多次治疗后抑制效应可维持 1 周。基于上述研究结果，本实验设计了耳电针的疗效观察时间点，采用较为成熟的FD 内脏高敏大鼠模型，进一步观察了耳电针的累加效应和维持效应。FD 内脏高敏模型的特点是在大鼠幼年时期给予远端结肠炎症刺激，在大鼠成年后表现出功能上的内脏高敏，而胃黏膜和结肠黏膜无明显的炎症反应，这与临床上 FD 的诊断相符合14。本实验通过肌电检测证实成功复制了非炎症性的内脏高敏模型，胃、结肠黏膜病理观察证实幼年造模未对成年大鼠胃肠及远端结肠造成炎症反应。耳电针的效应研究结果显示，5 次耳电针的累加镇痛效应明显优于单次的即时效应，且电针结束后第 3 天镇痛效应仍维持较好;在电针结束后第
40、 5 天效应虽有减弱，但仍具有镇痛效应;在电针结束后第 10 天效应衰减，镇痛效应不明显。提示给予 FD 大鼠耳电针，可有效缓解胃部高敏，即时效应明显，5 次耳电针治疗的累加效应显著，且有一定的维持效应。NGF 具有神经元营养和促突起生长双重生物学功能，是一种神经细胞生长调节因子。NGF 对中枢及周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用15，其与内脏高敏关系密切16 18。相关研究显示，内脏痛大鼠外周组织中 NGF 表达升高4，16，19;大鼠新生期结肠刺激可导致成年后结肠组织中 NGF 表达升高，引起感觉神经元电生理改变，致肠易激综合征内脏高敏感20;早期的母婴
41、分离可引起成年后肠神经系统可塑性改变，通过阻断 NGF 信号通路可部分缓解内脏高敏21。本实验结果表明，模型组大鼠血浆 NE 水平、胃底组织中 NGF mNA 和蛋白表达量均明显高于对照组，说明幼年时期的结肠炎症刺激可导致成年后大鼠胃底组织中 NGF 表达增高，这可能与血浆NE 水平升高有关。因为幼年时期的结肠炎症刺激，可上调在腹腔神经节的酪氨酸羟化酶水平，从而促进胃底肌层外的 NE 释放，NE 增加会依赖性地上调NGF，NGF 成比例地增加胃扩张的内脏运动反8803现代中西医结合杂志 Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and W
42、estern Medicine 2022 Nov，31(22)应19。耳电针组大鼠血浆 NE 水平、胃底组织中NGF mNA 和蛋白表达量均明显低于模型组，说明耳电针可抑制 NE 释放，下调 NGF 表达，这可能是耳电针缓解内脏高敏的机制之一。综上所述，耳电针可缓解 FD 内脏高敏，多次干预效果更显著，且有一定的维持效应，其缓解效应可能与调控血浆 NE 和胃底组织 NGF 的表达有关。本实验结果为耳穴疗法调节功能性胃肠病提供了客观依据，有利于耳穴疗法在临床中的推广运用。但本实验未观察该疗法对大鼠胃排空及其他相关症状的影响，机制研究比较局限，未进行中枢机制及相关通路的探讨，有待进一步研究。利益冲
43、突:所有作者均声明不存在利益冲突。参考文献 1 Sperber A D，Bangdiwala S I，Drossman D A，et al World-wide Prevalence and Burden of Functional GastrointestinalDisorders，esults of ome Foundation Global Study-Sci-ence DirectJ Gastroenterology，2021，160(1):99 114 2Ford A C，Mahadeva S，Carbone M F，et al Functionaldyspepsia J Lance
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