1、实验 细菌分离培养与培养性状观察 一、目的要求 l从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法成为分离； l纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由 一个细菌分裂、繁殖而产生的后代； l分离培养的目的在于从被检材料中、或者从污染的众 多杂菌中分离出纯的病原菌。 一、目的要求被检材料或病料 分离 单个菌落 纯培养物 纯培养 移植培养 。 一、目的要求 1、掌握细菌（需氧菌、厌氧菌）分离培养的基本要领 2、掌握钓菌、纯培养及移植技术 3、了解细菌在固体、液体培养基中的生长表现 4、了解培养性状对细菌鉴别的重要意义 接种工具 接种针和接种环：由三部分组组成，即环（针）、金 属柄和绝缘柄。接种前后都
2、要过火灭菌。接种针用于 穿刺接种细菌，接种环用于固体、液体培养基的细菌 接种。 接种环境 VS-1300-U型洁净工作台 接种的基本程序 灭菌接种环 沾取标本 接种 灭菌接种环 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境 一、目的要求 （一）常用的细菌培养方法 1、需氧菌分离培养法 （1 1）平板划线分离法）平板划线分离法 目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以便获得 纯菌。 一、目的要求 一、常用的细菌培养方法 1、需氧菌分离培养法 （1 1） 平板划线分离法平板划线分离法 方法： 分区划线法：适用于含菌量较多的标本。 连续划线法：适用于含菌量较少的标
3、本。 一、目的要求 1、常用的细菌培养方法 （1）需氧菌分离培养法 1. 1. 平板划线分离法平板划线分离法 方法： 分区划线法：适用于含菌量较多的标本。 分区划线法 第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环 连续划线法 一、目的要求 （一）常用的细菌培养方法 2、厌氧菌分离培养法 （1）肝片肉汤培养法 （2）焦性没食子酸法 一、目的要求 （一）常用的细菌培养方法 3、兼性厌氧菌分离培养法 一、目的要求 （二）钓菌、纯培养及细菌移植技术 细菌移植 斜面培养基接种法：用于培养，保存菌种及其它实验用。 液体培养基接种法：用于增菌及鉴定细菌生长特点，如表面 生长，沉淀生
4、长，均匀混浊生长等。 二、材料 1. 器材：接种环、酒精灯、打火机。 2. 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基及其培 养液，试管斜面培养基。 3. 菌种：大肠杆菌、未知混合菌种各1支。 一、目的要求 （三）细菌在培养基上的生长表现 1、细菌在固体培养基中的生长现象 菌落 定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单 一肉眼可见的细菌集团。 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度 、湿润度、黏度、溶血性。 菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。 菌落与菌苔 菌落 菌苔 一、目的要求 （三）细菌在培养基上的生长表现 2、细菌在液体培养基中的生长现象 混浊 沉淀：多见于链状排列的细菌。 菌膜：多见于厌氧菌。 菌膜 菌沉淀均匀浑浊 对照 一、目的要求 （三）细菌在培养基上的生长表现 3、细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛细菌： 在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘 模糊。 无鞭毛细菌： 只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。 有动力 现象 无动力 现象 思 考？ 1、细菌分离培养的目的是什么？何谓纯培养？ 2、培养皿培养时为什么要倒置？ 3、分别描述大肠杆菌、混合菌种在液体培养基 、固体培养基中的生长表现。 谢谢！
