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10、dy screeningJMol Aspects Med， 2018， 59: 檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮檮 47 61 ( 上接第 51 页) Expression of B7H4 in breast invasive ductal carcinoma and its prognostic significance PIAO Li hua1，LI Hao yue2，FENG ying2，XUAN Yan hua2( 1 Department of Histology and Embryology， Medical College
11、 of Yanbian University，Yanji 133002，China; 2 Department of Pathology，Medical College of Yan- bian University，Yanji 133002，China) Abstract: To investigate the expression of B7H4 in breast invasive ductal carcinoma tissue and its relationship with clinicopathological factors and prognosis，B7H4 protein
12、 was measured in 123 cases of cancerous tissue and 30 samples of normal breast tissue by immuno- histochemical staining The correlation of B7H4 expression with clinicopathological features and patients survival rates was investigated The results showed that the positive staining rate of B7H4 protein
13、 was 38 2% ( 47/123) in cancerous tissue，which was significantly higher than that in normal breast tissues ( P 0 01) The B7H4 expression was correlated with clinical stage，HER2 expression and lymph node metastasis ( ： 作者单位： 贵阳医学院神经病学教研室（ 李媛） ； 贵阳医学院附属医院神经内科（ 楚兰、 张艺凡） 通讯作者： 楚兰， ： 重症肌无力免疫学机制研究进展 李媛 楚兰
14、 张艺凡 摘要： 重症肌无力（） 是一种神经肌肉接头（ ） 传递障碍的获得性自身免疫性疾病， 发病机制主要以 体液免疫为主、 细胞免疫依赖及补体参与。研究表明，的发病与多种淋巴细胞及其亚群、 抗体、 补体及各种 细胞因子之间复杂的相互作用有关。故了解的免疫学发病机制对的诊断及治疗有重大意义。 关键词：重症肌无力；淋巴细胞；抗体；细胞因子 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） 重症肌无力（ ，） 是指主 要由乙酰胆碱受体抗体 （ ， ） 介导、 细胞免疫依赖、 补体参与、 主要累 及神经肌肉接头（ ） 突触后膜乙酰胆碱受体的 获得性自身免疫性疾病 。 的发病率根据人 种和环境的不同略有
15、差异。国内文献报道 平 均发病 率 约 为 （ 万 人 年） ， 其 中 女 性 （ 万人年） ， 男性 （ 万人年） 。 临床特点是活动后加重、 休息或应用胆碱酯酶 抑制剂治疗后减轻， 晨轻暮重的骨骼肌无力。免疫 学特点主要是血清中产生特异性抗体滴度增高， 例 如 、 肌 肉 特 异 性 酪 氨 酸 激 酶 受 体 抗 体 （ ， ） ， 以及近年来 发现的低密度脂蛋白受体相关蛋白抗体（ ， ） 等。 被认为是经典的体液免疫疾 病， 抗 体 反 应 依 赖 淋 巴 细 胞， 辅 助 细 胞 及 细胞在主要组织相容性复合体（ ）类 分子帮助下能识别乙酰胆碱受体（ ） 表位， 从 而促进细胞产生
16、抗体 。综上， 拥有特殊的 免疫学机制， 本文将对 血清免疫学的研究进 展进行介绍。 淋巴细胞亚群 细胞表面有多种标志性抗原。按照功能和 表面标 志 可 以 分 成 很 多 种 类： （） 辅 助 细 胞 （ ， ） ： 它可以通过增生扩散来激活 其他类型的免疫细胞， 其主要表面标志是 。 细胞调控或辅助其他淋巴细胞发挥功能； 协助 活化细胞产生抗体； 也可协助杀伤性 细胞及 巨噬细胞发挥免疫功能。（ ） 细胞毒性细胞（ ， ） ： 它可以对产生特殊抗原反应的 目标细胞进行杀灭， 其主要表面标志是 。（） 调节抑制 细胞（ ， ） ： 负责调节机体免疫反应。对各种 细胞和 细胞都有抑制作用，
17、调节和控制免疫反应， 维持 免疫自稳性（ 即免疫耐受性） 。 细胞 细胞 也 称 为 ， 初始 细胞接受抗原刺激后首先分化为 细 胞。 细胞继续分化为种 细胞亚群， 即 、 和 细 胞。研 究 表 明： 患 者 的 和 细胞的免疫活性均有增强， 它们可能 通过细胞因子作用于 特异性 细胞， 从而 激活体液免疫。而 细胞分泌的转化生长因 子（ ） 主要发挥抑制作用。 细胞主要分泌白细胞介素（ ） 、 、 干扰素（ ） 、 肿瘤坏死因子（ ） 等， 启动细胞免疫 ， 激活巨噬细胞及细胞毒性 细胞， 参与迟发型超敏反应 。 是 细胞 最主要的生长、 分化因子， 可诱导 细胞增殖及 产生 、 激活巨噬
18、细胞、 刺激 细胞、 促进 细胞增殖及分泌抗体， 主要起免疫增强作用 。 等 研 究 发 现， 向 自 身 免 疫 性 重 症 肌 无 力 （ ） 小鼠体内注入 抗 的单克隆抗 体（ ） 免疫复合物可有效地促进功能性调节性 细胞增殖， 进而抑制 ， 减轻小鼠的 症状。硫唑嘌呤、 环孢素均具有抑制 与其受 体结合的作用， 从而达到减轻 患者临床症状。 主要由巨噬细胞和 细胞等抗原呈递细胞 产生， 可诱导 细胞向 细胞的分化， 诱导其 产生 。在 （ ） 大鼠体内同时注 射电鳐 免疫原（ ） 与 发现， 其 血清抗 抗体水平比单独用 中国神经免疫学和神经病学杂志 年月第 卷第期 ， ， ChaoX
19、ing 免疫的大鼠高， 表明在 的发病中 起致病 作用 。 是一种同源二聚体糖蛋白， 具有多 种免疫调节功能， 能够增加 类分子的表 达、 激活巨噬细胞， 在诱导淋巴细胞成熟并辅助 的产生、 诱发 临床症状产生中起 重要作用 。实验证明， 大鼠诱导 的同 时 给 予 大 鼠 皮 下 注 射 可 使 诱 导 的 临床症状明显加重， 同时 和 细胞水平也明显增高。推断 是一种促 的免疫因子。 主要由活化的巨噬细胞、 单 核细胞和 细胞产生， 是炎性反应和免疫调节的 重要因子， 可诱导广泛的炎性级联反应并诱导抗原 提呈细胞（ ） 的活化 ，。许多研究表明 通过其受体介导的信号转导系统参与了 的发 病
20、。国外学者发现： 患者 位点 基因频率显著增加， 尤其是胸腺增生的患者中， 且 此趋势 在 女 性、 早 发 型 患 者 中 更 为 明 显， 而 且 （）患者外周血单个核细胞分泌 增加， 均提示 基因多态与 的分 泌有关， 导致 患者免疫系统紊乱。 型细胞主要分泌 、 、 、 、 、 等细胞因子， 可促进细胞的增殖、 分 化和抗体的形成， 故 细胞的主要作用是辅助 特异性淋巴细胞增殖并产生 ， 启动体 液免疫应答 。下调巨噬细胞及细胞毒性 细胞 的功能， 参与 介导的变态反应的致病过程， 和 的相互作用通过其分泌的细胞因子的 叠加、 协同， 或者拮抗等方式发挥作用 。 为 的特征性细胞因子，
21、 可刺激细胞增殖及 合成， 在抗体合成及其类型的转换过程中必不可 少。一些学者认为 是 细胞活化的启动因 子， 可介导 活化的淋巴细胞产生 ， 参与 的病理进程。然而另外一部分研究认为 能通过抑制 细胞的功能来抑制细胞免 疫 。因此 在 发病中的具体作用尚不明 确， 有待进一步研究 。 主要由 细 胞和激活的肥大细胞产生， 可促进 细胞分化与 生长， 诱导嗜酸性粒细胞分化， 促进 合成， 诱 导细胞毒 细胞（ ） 的生成 。国外学者进行 基因敲除造模 发现其后代发病率较 正常组低也证明了 的致病性 。 是由 个氨基酸组成的相对分子质量为 的多 肽， 基因位于号染色体， 可抑制巨噬细胞的抗原 呈
22、递功能和 细胞应答， 间接抑制 细胞活 性 。目前对 的作用尚有争论： 一些学者 认为 可加重 的病情； 然而另有研究 发现胸腺未切除的 患者外周血单个核细胞 基因表达减少。尽管具体的机制尚未阐明， 但初步可证实 多态性参与了 的病理过 程 。 细胞分泌的 主要效应功能是抑制 细胞介导的免疫应答和炎性反应。近年来发 现， 是一种重要的内源性免疫抑制性细胞 因子， 可抑制免疫活性细胞的增殖， 如可以抑制 、 联合诱导的胸腺细胞的增生， 抑制淋巴 细胞的增殖和分化， 并降低其活性， 还可以抑制促 炎性细胞因子的生成， 如 和 等 。 研究人员从 的血清检测中发现小鼠 症状的好转往往伴随有 水平的升
23、高 ； 也 有学者报道， 患者外周血单个核细胞 水平高于正常对照组， 且 水平与病程有关， 表明 患者在启动免疫激活机制的同时也启动 了免疫抑制机制。在 患者中由于某些原因导 浓度降低， 它所介导的 的表达降 低， 从而 细胞的数量或者免疫抑制功能降低 或者缺陷， 对 、细胞的活化与增殖的抑制作用 降低，最终导致 的产生增多。这可能是 引起 患者机体免疫平衡失调、 产生抗体的机 制之一， 在 患者发病中发挥重要作用 。这 些研究均提示通过提高 ， 使 、 及 细胞之间达到相对平衡， 以达到重建体内免疫 稳态。这可能成为一种有前景的免疫治疗方法。 细胞 细胞也称为抑制性 淋 巴细胞（ ） ， 主
24、要通过两种机制发挥细胞毒作用： 一是分泌穿孔素、 颗粒酶、 颗粒溶解素及淋巴毒素 等物质直接杀伤靶细胞； 二是通过 途径 诱导靶细胞凋亡。 细胞与 细胞构成一个错 综复杂的免疫调节系统， 生理情况下处于动态平 衡。对于免疫应答的调控和免疫自稳均具有重要 意义， 一旦失调将导致病理性反应。但是 细胞作为抑制性 细胞， 其如何参与 的发生 目前尚存在争议 。大部分学者达成以下共识： 患者外周血中 、 细胞百分率升高， 细胞百分率降低， 比值增高。 细胞 的主要功能 是通过抑制性调节 和 细胞的活化与 增值， 达到免疫的负调节作用。人类自身免疫疾病 常常被冠以 细胞相对缺乏的特 中国神经免疫学和神经
25、病学杂志 年月第 卷第期 ， ， ChaoXing 点。 等 依据此原理， 将含有 和抗 的 组成的免疫复合物注射至 模型中 后发现， 细胞在该实验模型中出现持续并且 有效的增长。增殖的 细胞可能抑制 细胞 及细胞对 的自体反应， 同时减缓肌肉无 力的症状 。综上， 细胞主要产生于正常胸 腺， 是一种功能成熟的 细胞亚群， 其具有抑制抗 原特异性反应性 细胞免疫反应的功能， 也与免 疫耐受的维持有关。同时国内外研究人员发现 细胞的比值下降与 的发病有着密切 关系， 故调节 细胞水平对 未来的治疗有 着重要的意义。 淋巴细胞亚群 淋巴细胞（ ） 是体液免疫的主 导细胞， 起源于骨髓， 发育成熟后
26、进入外周血淋巴 细胞池（ 主要包括脾脏、 淋巴结等） 。外周 淋巴 细胞通常处于静息状态， 若遇到特异性抗原与相关 细胞因子的刺激， 会被诱导成活化性 淋巴细胞， 并在 与 细胞的协助下， 通过一系列复杂 的细胞信号传导机制， 诱导 淋巴细胞转化成分 泌特异性抗体的浆细胞以及记忆性 淋巴细胞， 发挥免疫作用 。在正常情况下， 胸腺 淋巴细 胞的数量只占， 但在 患者的胸腺中却发现 大量 淋巴细胞聚集， 并形成典型 的生发 中 心 （ ） ， 被认为是 发生发展的关键 病变。在不明原因促发的炎性反应下， 补体系统被 激活， 上述细胞被破坏， 大量 和 等释 放， 在趋化因子的介导下， 外周大量淋
27、巴细胞聚 集到胸腺当中， 形成生发中心， 随后 细胞调 节功能出现异常， 静息 淋巴细胞被活化， 各种 （ 如 树 突 状细胞、 巨噬 细 胞等） 将 和 提呈给活化 淋巴细胞， 诱导 淋巴细胞 转化成分泌抗 或抗 的浆细胞， 进入血液循环， 导致 发病 。免疫抑制剂中 环磷酰胺对 细胞有很强的抑制作用； 利妥昔单 抗通过多种机制清除体内 细胞， 故均被推荐用 于难治性 。 ， 即 补 体 受 体 （ ） ， 表达在各阶段的淋巴细胞膜， 与补体系统之 间存在密切的联系， 并随着淋巴细胞的活化而 逐渐升高。主要分布在细胞胞膜上， 在细胞 表面分为胞外域、 跨膜域和胞质尾区， 、 、 等补体免疫复
28、合物可以通过 这一受体 活性激活细胞， 使 细胞分泌特异性抗体。国 内研究结果显示 患者 和 双阳性 的细胞显著高于健康对照人群， 提示 患者 存在特异性细胞的过度激活 。 ， 主要表达在 淋巴细胞膜中的一种跨 膜蛋白， 其参与 、 、 组 成 的复 合 物， 协助细胞抗原受体对特异性抗原的辨别及 淋巴细胞的活化； 并在生发中心形成及 淋巴细 胞向浆细胞转化过程中具有独立的促进作用， 但 最重要的作用在于降低 淋巴细胞摄取抗 原的阈值， 提高 淋巴细胞对外源性抗原的识别 能力， 是 淋巴细胞抗原识别与摄取状态的关键 标记物， 并通过介导活化 淋巴细胞与抗原间的 作用来维持淋巴细胞的活性 。 细
29、胞活化因子受体（ ） 属于肿瘤坏 死因子受体家族的一员。 是 细胞的重要 存活因子， 可由单核细胞、 巨噬细胞、 树突状细胞以 及中性粒细胞表达， 主要与细胞表面的 结合， 介导细胞分化、 增殖和存活。有研究表明 患者外周血中 细胞明显增 加， 提示与发病机制有关。易芳芳等研究表明对难 治性 患者采用小剂量他克莫司治疗后， 患者 体内外周血 细胞数量有所降 低 。 ， 一种跨膜糖蛋白， 前淋巴细胞可见其 表达， 另外在浆细胞中也有表达。近期研究发现 具有维持浆细胞抗体分泌及延长浆细胞生 命的功能， 能体现出体液免疫的终末状态 。 主要集中于神经细胞和肌细胞之间的 突触， 由两个和、 、亚单位各
30、一个组成的五聚 体， 这些亚单位排列为类似长管状， 形成穿越细胞 膜的通道。其中蛋白亚单位是细胞膜外结合乙 酰胆碱的主要位点， 包括被抗乙酰胆碱自身抗体识 别的主要免疫原区。大多数 都直接作用 于该区发挥作用。当乙酰胆碱识别 上的两 个细胞外部位时， 受体结构发生细微变化， 即通 道开放阳离子进入细胞膜内， 形成终板电位导致肌 肉收缩。 有不同的亚型， 在 患者 （ 即 患者血清中可检测出 ） 体内主要 是 和 亚型， 可激活补体共同参与免疫 反应。 和 亚型的 主要有种 中国神经免疫学和神经病学杂志 年月第 卷第期 ， ， ChaoXing 致病机制： （ ） 在突触后膜上结合补体， 最终形
31、成膜 攻击复合物； （ ） 结合突触后膜上的 ， 导致 的 内 吞 和 退 化； （） 可 阻 断 乙 酰 胆 碱 和 的结合或者使离子通道关闭 。国内外许 多研究研究表明， 抗 的滴度与疾病的严 重程度无明显关系。 根据 等报道， 大约占 的全身型及 的 眼 肌 型 患 者 血 清 中 可 检 测 出 ， 即 。但是这个比例在中 国人 种 中 比 例 有 所 降 低，大 约 占 。 主要根据其临床症状和发 病机制分为早发型 、 迟发型 和伴发胸腺瘤 。早发型 指发病年龄小于 周岁。其首 发症状常为眼外肌无力， 随后病情逐渐进展， 发展 为全身肌肉无力。该型 通常会出现胸腺增 生， 其生发中心
32、刺激 细胞对 反应。迟发 型 患者发病年龄大于 周岁， 大多数患者胸 腺正常或萎缩； 伴发胸腺瘤的 主要见 于老年 患者。同时需注意的是各种胸腺异 常， 如胸腺增生、 胸腺瘤等均常见于 。 治疗方面： 患者对乙酰胆碱酯酶抑制剂 及糖皮质激素较为敏感， 一般情况下， 治疗效果尚 可。 肌肉特异性酪氨酸激酶（ ， ） 是一种突出后膜蛋白， 相对分 子量为 ， 其细胞外区由个 样区域和 一个半胱氨酸聚集区构成， 细胞内区由一个近膜 区、 一个激酶区和 末端尾部组成 。 蛋 白对 的发育扮演着重要的作用。在这一过 程中运动神经元轴突生长并分泌集聚蛋白， 聚集蛋 白与肌肉细胞膜表面的 相互作用， 从而激
33、 活 发 育 的 信 号 级 联。 同 时 也 是 聚集的必备蛋白， 研究证实从神经末梢释放 出 来 的 肌 联 蛋 白 通 过 通路使 后膜上的 聚集 和胞内信号转导引起 后膜下细胞核 转录增加。 并非仅参与 的发育， 其在 成熟后的结构维持和再生中也发挥着重要作 用 。与 不同， 主要是 亚型， 这类亚型不结合补体， 它主要与 的 样 结 构 域 相 结 合 发 挥 其 致 病 作 用。 在 诱导的 动物模型中， 后膜 的 及 受体数量下降， 正常而复杂的 后膜上接头褶皱出现明显的结构简化现象。 表明 与 受体分子的结合加速了 后者的降解或直接抑制后者功能， 使得 超微 结构破坏， 进而导
34、致 的信号输出减少， 肌细 胞动作电位阈值增加， 出现 的信号传导障 碍， 最终出现 症状。 年， 等 发 现 大 约 有 抗 阴 性 的 患 者 可 检 测 出 （ 即 患者） 。但是国内外文献报道该抗体阳 性比例各有不同， 这种区别是源于种族、 环境及检 测方法的差异因素。通过对这些患者的临床表现 分析得出， 阳性的患者常常累及面肌、 延髓及呼吸肌等， 导致严重的临床表现， 同时可出 现肌肉萎缩， 但这些患者较少累及眼肌， 较少出现 胸腺的异常。与 明显不同的是， 多数文 献均有报道 患者病情的严重程度与血 清 滴度呈正比 。治疗方面： 该类患 者通常对乙酰胆碱酯酶抑制剂疗效欠佳， 国内外
35、文 献均显示采用血浆置换、 静脉注射免疫球蛋白及联 合应用免疫抑制剂治疗较单用乙酰胆碱酯酶抑制 剂、 糖皮质激素治疗效果更佳 。 低密度脂蛋白受体相关蛋白（ ） 是低密 度脂蛋白受体（ ） 家族中的一员， 家 族成员具有相似的分子结构， 包括个跨膜结构， 个长的细胞外 末端和个短的细胞内 末端。 在细胞外的部分拥有一个配体结合区域， 此区域可 和多种蛋白结合发挥作用 。 和运动神经 元轴突释放的聚集蛋白结合后与突触后膜上的 形成三聚体复合物。该复合物使 细 胞内的部分磷酸化， 从而被激活。一旦 发 生了酪氨酸磷酸化， 细胞内的部分会招募 这个肌肉特异性衔接蛋白。 的聚集 和磷酸化使得突触后膜上
36、的 蛋白累积， 这 对突触信息传递的稳定性及准确性将产生必要作 用。聚集蛋白结合 的有效区 域 后 加 强 了 与 之间的结合（ 与 之间 的结合区域是个 区域中的后个和个 螺旋区域中的前个， 也就是说 结构中第 、个 重复区域与第个螺旋在结合聚 集蛋白时并不需要， 但是这个区域对于 结合 却至关重要） 并刺激 激酶活化 。 中国神经免疫学和神经病学杂志 年月第 卷第期 ， ， ChaoXing 同时还是 信号通路上的阻断剂， 其介 导的信号通路涉及骨骼肌的形成及肾脏发育等方 面。总之， 与其他蛋白一起对 的形成 及维持扮演着不可或缺的重要作用。 文献显示， 现约有 （ 世界范围内报 道比例各不相同， 推测原因可能与种族、 环境及检 测方 法 存 在 差 异 有 关）的 患 者 体 内 不 能 发 现 或 ， 即所谓的血清学双阴性的 患者。但近年来研究发现， 一些血清学双阴性 的 患者中可检测出 ， 即 。 等 证实 能干扰聚集蛋白 与 的结合， 从而影响 后膜上 聚 集。 也属于 亚类， 能够激活补体。 故可推测 致病机制可能和
