1、在细胞质中。注意事项： 1.材料的选择 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察； 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰，不可使用紫色表皮细胞)2.取材要点 取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。 3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。 4.安全要点 用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂； 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。 5.换用高倍镜观察材料时，只能用细准焦螺旋进行调
2、焦，切不可动粗准焦螺旋。（三）检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质实验原理：可溶性还原糖+ 斐林试剂砖红色沉淀。（水浴加热）脂肪小颗粒 + 苏丹染液橘黄色小颗粒。（要显微镜观察）蛋白质 + 双缩脲试剂紫色反应。实验材料：1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好。2.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好(实验前浸泡3h4h)。3.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白)。实验步骤：1、还原性糖的鉴定：（1）还原性糖：有还原性基团游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖。（2）试剂：斐林试
3、剂(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，现配现用。 (3)步骤：取样液2mL于试管中加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)水浴加热2min左右观察颜色变化(浅蓝色棕色砖红色)（4）结论：还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀2、脂肪的鉴定（1）步骤：取材：花生种子（浸泡3-4h）,将子叶削成薄片制作切片：(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央染色：(滴苏丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴体积分数50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精)制作装片：(滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片)镜检鉴定：(显微镜对光低
4、倍镜观察高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)（2）结论：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。（3）实验成功的要点：.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好(实验前浸泡3h4h)。该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片。滴苏丹染液染液染色2-3min，时间不宜过长，以防细胞的其他部分被染色。3、蛋白质的检测(1)试剂：双缩脲试剂(A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液)(2)步骤：试管中加样液2mL加双缩脲试剂A液1mL，摇匀加双缩尿试剂B液4滴，摇匀 观察颜色变化(紫色) (3）结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。(4)实验成功的要点：
5、蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白稀释液)。双缩脲试剂的使用，一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液)，再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液)。(四)用高倍镜观察线粒体和叶绿体实验目的：使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。实验原理：叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色，细胞质接近无色实验材料：观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而
6、小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。（若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。）方法步骤：步 骤注 意 问 题分 析1制片。用镊子取一片黑藻的小叶，放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。制片和镜检时，临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩，将影响对叶绿体形态和分布的观察。2低倍镜下找到叶片细胞3高倍镜下观察叶绿体的形态和分布4制作人的口腔上皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液用牙签取碎屑盖盖玻片5观察线粒体蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无色。讨论：1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么
7、？答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。（五）通过模拟实验探究膜的透性实验目的：1说明生物膜具有选择透过性 2尝试模拟实验的方法实验原理：某些半透膜（如动物的膀胱膜、肠衣等），可以让某些物质透过，而另一些物质不能透过。或者（玻璃纸）水分子可以透过，而蔗糖分子因为比较大，不能透过。可以用半透膜将不同浓度
8、的溶液分隔开，然后通过观察溶液液面高低的变化，来观察半透膜的选择透过特性，进而类比分析得出生物膜的透性。方法步骤：1取两个长颈漏斗，分别在漏斗口处封上一层玻璃纸。2在A漏斗中注入硫酸铜溶液，B漏斗中注入蔗糖溶液，并加入少许红墨水，使其略呈红色。3将两个漏斗分别浸入盛有蒸馏水的烧杯中，在两漏斗的液面处做标记4静置一段时间后，观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化，并将观察到的结果设计表格进行记录。讨论：1漏斗管内的液面为什么会升高？答：由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量，使得管内液面升高。2如果用一层纱布代替玻璃纸，漏斗管内的液面还会升高吗？答
9、：用纱布替代玻璃纸时，因纱布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不会升高。3如果烧杯中不是清水，而是同样浓度的蔗糖溶液，结果会怎样？答：半透膜两侧溶液的浓度相等时，单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量等于渗出的水分子数量，液面也不会升高（六）观察植物细胞的质壁分离与复原 实验原理：成熟的植物细胞有一大液泡。当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中，由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，液泡逐渐缩小，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，既发生了质壁分离。当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入到细胞液
10、中，液泡逐渐变大，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，既发生了质壁分离复原。材料用具：紫色的洋葱鳞片叶；刀片，镊子，滴管，载玻片，盖玻片，吸水纸，显微镜；蔗糖的质量浓度为0.3g/mL的溶液，清水 方法步骤：1、制作洋葱鳞片叶表皮的临时装片：选取洋葱鳞片叶外表皮紫色较深的部位，用刀片划一个0.7cm见方的小块，用镊子尖插入平行于根侧的一个边，紧紧捏住这侧整个边缘部分，然后稍用力慢慢撕取，将捏住的较厚的部分表皮用刀片切去，剩余部分展平于载玻片中央的水滴中盖上盖玻片，即制成临时装片。2、观察植物细胞的质壁分离与复原现象（1）观察洋葱表皮细胞用显微镜观察，可以看到洋葱鳞片叶表皮细胞中紫色的中央液
11、泡，还可以看到原生质层紧紧地贴着细胞壁。 （2）观察洋葱表皮细胞的质壁分离： 从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，盖玻片下面的洋葱鳞片叶表皮就浸润在蔗糖溶液中。用高倍镜观察，可以看到细胞中的中央液泡逐渐变小，原生质层逐渐与细胞壁分离开来。 （3）观察洋葱表皮细胞的质壁分离复原 从盖玻片的一侧滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，盖玻片下面的洋葱鳞片叶表皮就浸润在清水中。用高倍镜观察，可以看到细胞中的中央液泡逐渐胀大，原生质层又逐渐贴着细胞壁。结论:外界溶液浓度细胞液浓度,细胞出现质壁分离现象；外界溶液浓度细胞液浓度,细胞出现质壁分离复原现象。
12、实验应用用途实验设计结论单一变量验证原生质层和细胞壁伸缩性大小成熟植物细胞+分离剂，镜检观察细胞形态发生质壁分离现象，证明原生质层的伸缩性比细胞壁大。植物细胞的结构特性判断细胞死活待测细胞+ 一定浓度的分离剂，镜检观察细胞形态能发生质壁分离和复原，说明细胞是活细胞。细胞的生活状态测定细胞液浓度待测细胞+ 一系列浓度梯度的分离剂，镜检观察细胞形态细胞液浓度介于未分离和刚发生分离的浓度之间。不同浓度的分离剂比较不同植物细胞的细胞液浓度不同植物细胞+同一浓度分离剂，镜检观察细胞发生质壁分离的时间先发生质壁分离的和分离明显的植物细胞的细胞液浓度小。不同植物细胞（七）探究影响酶活性的因素的实验实验目的：
13、1探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。 2培养实验设计能力。方法步骤：提出问题作出假设设计实验（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）实施实验分析与结论表达与交流。实例1：比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 实验原理：鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍 方法步骤：步骤注意问题解释取4支洁净试管，编号，分别加入2mL H2O2溶液不让H2O2接触皮肤H2O2有一定
14、的腐蚀性将2号试管放在90oC左右的水浴中加热，观察气泡冒出情况，与1号对照向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液，观察气泡产生情况不可用同一支滴管肝脏研磨液必须是新鲜的肝脏要制成研磨液由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增加酶与底物的接触面积2-3min后，将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方，观察复燃情况放卫生香时，动作要快，不要插到气泡中现象：4号试管产生气泡多，冒泡时间短，卫生香
15、猛烈复燃，3号试管产生气泡少，冒泡时间长，卫生香几乎无变化 避免卫生香因潮湿而熄灭实例2：温度对酶活性的影响实验原理：1淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈现红褐色或红棕色。）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注：市售a-淀粉酶的最适温度约60oC方法步骤：操作注意问题解释取3支试管，编上号，然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液另取3支试管，编上号，然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，分别放入热水（约60oC）、沸水和冰块中，维持各自的温度5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防
16、止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min保持各自温度时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察用表格的形式显示实验步骤号加入试剂或处理方法试管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/新鲜淀粉酶溶液/1mL1mL1mL2保温5min60oC100oC0oC60oC100oC0oC3将a液加入到A试管，b液加入到B试管，c液加入到C试管中，摇匀4
17、保温5min60oC100oC0oC5滴入碘液，摇匀2滴2滴2滴6观察现象并记录实例3:PH对酶活性的影响用表格开式显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）序号加入试剂或处理方法试管1231注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸馏水1mL/3注入氢氧化钠溶液/1mL/4注入盐酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL660oC水浴保温5min7加入斐林试剂，边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸1min9观察3支试管中溶液颜色变化变记录（八）叶绿体色素的提取和分离实验目的：1尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。2分析实验结果，探究叶绿体中有几种色素，以及
18、各自所呈现的颜色。实验原理：1叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙酮、乙醇等能提取色素。2层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种色素。实验材料：幼嫩、鲜绿的菠菜叶实验步骤：步 骤注 意 问 题分 析1提取色素5克绿叶剪碎，放入研钵，加SiO2、CaCO3和5mL丙酮（或10mL无水乙醇）迅速、充分研磨。（若没有无水乙醇，也可用体积分数为95%的乙醇，但要加入适量的无水碳酸钠，除去水分）加SiO2加CaCO3加丙酮迅速加SiO2为了研
19、磨得更充分。加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。因为叶绿素含镁，可被细胞液中的有机酸产生的氢代替，形成去镁叶绿素，CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸，防止叶绿体被破坏。叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。减少研磨过程叶绿素的分解，减少有毒性的丙酮挥发。2收集滤液漏斗基部放一单层尼龙布，研磨倒入漏斗内挤压，将滤液收集到小试管中，用棉花塞塞住试管口。尼龙布起过滤作用。试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。3制备滤纸条将干燥的滤纸，顺着纸纹剪成长10cm，宽1cm的纸条，一端剪去二个角，并在距这一端1cm处划一铅笔线。干燥顺着纸纹剪成长条一端剪去二个角可吸收更多的滤液。层析时，色素分离效果好。可使层
20、析液同时到达滤液细线。4划滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线，干后重复三次。滤液细线越细、越齐越好。重复三次。防止色素带之间部分重叠。增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更明显。5纸层析法分离色素将3mL层析液倒入烧杯中，将滤纸条（划线一端朝下）插入层析液中，用培养皿盖盖上烧杯。层析液不能没及滤纸条。烧杯要盖培养皿盖。防止色素溶解在层析液中，层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发6.观察实验结果扩散最快是胡萝卜素，扩散最慢是叶绿素b，含量最多的是叶绿素a。四种色素之所以能被分离，是因为四种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b).实验讨论： 1滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液？答：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿体
