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奇症汇-清-沈源.docx

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资源描述

1、,每孔加生理盐水0.2ml,第10孔加0.4ml。2于第1孔和第8孔中各加入15稀释血清0.2ml。将第1孔混匀后从中吸出0.2ml移入第2孔,如此作对倍稀释直至第7孔,于第7孔中吸出0.2ml弃入消毒缸内。第8孔为血清对照。3于第1至第7孔中各加入0.2ml 4个血凝单位的病毒液,第9孔亦加入0.2ml病毒液作病毒对照。4稍加振摇后,每孔加入0.5鸡红细胞0.4ml,室温静置45分钟,观察结果。孔 号1234567血 清 对 照病 毒 对 照红 细 胞对 照生 理 盐 水(ml)抗 血 清 (ml)0.20.2 *0.20.20.20.20.20.20.20.20.20.20.2 0.2 0

2、.2弃去0.20.2 *0.2 0.4 血 清 稀 释 度110120140180116 013 2016404 个 血 凝 单 位 病 毒(ml)各 0.2 0.2 0.5 鸡 红 细 胞 悬 液(ml)各 0.4*为15稀释的抗血清结果:红 细 胞 对 照 孔 ,血球沉于孔底中心,呈钮扣状,表明红细胞无自凝现象;病毒对照孔,呈现凝集,表明病毒血凝功能正常;血清对照孔,血球沉于孔底中心,呈钮扣状,表明血清中无凝集因子;测定孔中,如血球沉于孔底中心,呈钮扣状,表明血清中有相应的血凝抑制抗体,为阳性孔;反之凝集者为阴性孔。血凝抑制效价:呈完全血凝抑制时的最高血清稀释度。附录:附录:1鸡胚的准备和

3、发育过程病毒的鸡胚培养,多采用来亨鸡卵,其优点为卵壳色白而薄,易于照视,如不能得到,一般家鸡卵也可应用。孵育温度通常在3839之间,相对湿度4060。孵育45天后即可在检蛋灯上检查鸡胚受精与否及发育情况。未受精之鸡蛋于4日后仅见模糊卵黄黑影,无鸡胚迹象。活的鸡胚于4日后即可见清晰之血管小网,中有刚刚发育之胚胎,自45天以后逐日检查胚胎生活情况,逐日增大之鸡胚则可见到清楚之绒毛尿囊膜上的血管及活动之胚胎。受精卵在通过输卵管时,已开始分裂,当产卵时已在卵黄中形成细胞,名为胚点,在适宜温度下即能继续分裂发育,形成中、外、内三胚层,逐步发育成各种器官。鸡胚的最外层为石灰质之卵壳,上有细孔以行气体交换,

4、下层为壳膜,很容易与孵壳分开,壳膜的功能是使气体分子和液体分子在内外两方面进行交换,因此在孵育鸡胚时需要一定的湿度和气流,如果湿度太低,鸡胚就容易脱水,引起鸡胚死亡,气流同样是重要的,孵育时如空气不流通,亦可造成鸡胚的死亡。因此壳和壳膜不是简单的覆盖,而是本身具有维持内部生命的功能。气室的功能是呼吸和调节压力,壳膜之下为血管丰富的绒毛尿囊膜,外为绒毛膜,系外胚层形成,内为尿囊膜,由内胚层形成,两膜结合之间为中胚层,因此绒毛尿囊膜是尿囊膜在生长发育过程中与绒毛膜相连而成,血管较多,起着胚胎呼吸器官的功能,氧气的交换是在膜的血管内通过卵壳孔而进行的。鸡胚孵育至第3天即出现尿囊,为直肠腹侧部分的膨出

5、物,尿囊腔是胚胎的排泄器官,内含尿囊液,初为透明液体,是单纯生理盐水溶液,以后尿囊液中尿酸盐迅速增加,胚胎发育到第1213天,尿囊液开始变得浑浊,若将其冷却即可见有沉淀物形成,主要是尿酸盐类。因此,在制备流感病毒抗原时,通常用盐水将尿液加以稀释后放4备用,这样可减少尿酸盐的沉淀,尿液量在鸡胚发育的第11至13天最高,平均为66.5毫升。羊膜为胚胎最内层包被,系由外胚层组成,羊膜腔盛有羊水,胎体浸泡于其中,羊水在起初是单纯的生理盐水,后来则蛋白质含量增加,羊水量平均为1毫升左右。卵黄囊附着于胚胎,卵黄囊膜系由内胚层的细胞组成,对培养病毒有重要作用,内包有卵黄,为胚胎之养料,卵白位于卵之锐端,为胚

6、胎发育晚期之养料。2Hanks溶液配制,先配成下列甲、乙两种原液。原液甲:NaCl160克 KCl8克 加入800毫升双蒸水MgSO47H2O2克MgCl2H2O2克CaCl2 2.8克溶于100毫升双蒸水将上述二溶液混合后加双蒸水至1000毫升,加2毫升氯仿作为防腐剂,保存于4冰箱。原液乙:Na2HPO412H2O304克KH2PO41.2克 加入800毫升双蒸水葡萄糖20克04酚红液 100毫升加入双蒸水使成1000毫升,加入2毫升氯仿作为防腐剂,保存于4冰箱,使用前按以下比例配成。原液甲1份原液乙1份双蒸水18份以9磅10分钟灭菌,此溶液存于4冰箱,可使用1个月。3营养液的配制Hanks

7、液1000毫升水解乳白蛋白5克配制成0.5之水解乳白蛋白溶液,分装小瓶以9磅10分钟灭菌,使用前再加入510无菌牛血清,并调整pH(用NaHCO3溶液校正)。40.25胰蛋白酶溶液配制胰酶2.5克Hanks使用液1000毫升青霉素10毫升(最终浓度100单位/毫升)链霉素10毫升(最终浓度100单位/毫升)加胰酶和抗生素于Hanks液中,震荡使其溶解,加压过滤除菌,分装,20低温备用,一瓶最好用一次,不宜反复冻融。3流感病毒的分离和鉴定过程:【材料】患者早期漱口液(用大管肉汤收集)、910日龄鸡胚、1毫升注射器及针头(16号)、抗生素(每毫升含青霉素2万单位及2万微克链霉素)、无菌小试管、吸管

8、、0.5鸡红细胞、已知各型流感免疫血清。【方法】 病人急性期的漱口液 (抗生素处理) 活鸡胚培养(羊膜腔接种) 孵育35 72小时 收获羊水进行血凝滴定 () () 血凝抑制试验与 盲传鸡胚,方法同上,如又为 补体结合试验定型 阴性则须再盲传一次,一共三次 ,仍为阴性则报告阴性(一)分离标本处理:采集之标本保存于冰壶内,及时进行分离,如不能进行分离则需保存于20以下,漱口液经低速沉淀后,吸取上清液1毫升,加抗生素0.10.2毫升。取1012日龄鸡胚一只,将处理过的材料0.2毫升,接种于鸡胚尿囊(初次分离多用羊膜腔接种,此处由于初学,羊膜腔接种难以掌握,暂以尿囊接种代替)。接种完毕后孵育35,7

9、2小时后收获尿囊液。孵育72小时后将鸡胚置4冰箱过夜,目的是使鸡胚冻死并不易在收获尿囊液时出血,注意放入冰箱时必须使天然气室(大头)朝上。自冰箱取出鸡胚,放在蛋架上(一般是大头朝上),用碘酒消毒气室端卵壳,然后持镊子小心击破气室端卵壳并打开之。再用眼科小镊子撕破卵膜及绒毛尿囊膜,以便用毛细管吸取尿囊液,将尿囊液吸入中号试管内。将尿囊液进行血凝滴定,以测定是否有病毒生长。(二)鉴定将已测定过血凝的尿囊液,用已知各亚型血清进行抑制试验。将尿囊液与已知各型血清进行补体结合试验。(一般补体结合试验所用抗原多为可溶性抗原,具有型的特异性;血凝试验中抗原为颗粒性,具有株的特异性;补体结合试验所用的血清以豚

10、鼠制备的免疫血清为宜)。根据各个步骤的试验结果,判断所分离的病毒属于何种病毒。2鸡红血球的制备取10ml鸡血加入3.8枸橼酸钠1ml,迅速混合,存放于4冰箱,时间不超过3天,使用前取红细胞悬液加510倍体积生理盐水洗涤3次,最后一次以2000转/分的速度沉淀10分钟,洗涤后的红细胞按体积用生理盐水稀释成0.5悬液备用。3ELISA试剂:包被液和稀释液pH9.6,0.01M Na2CO3NaHCO3缓冲液Na2CO31.59gNaHCO32.93g 加蒸馏水至1000ml 该液应保存于4,一次配制应用期不宜超过10天。洗涤液(pH7.4磷酸缓冲液)NaCl 8gNa2HPO412H2O20gKH

11、2PO40.2gTween200.5ml加蒸馏水至1000ml酶标羊抗人抗体用洗涤液(不加Tween20,改加1兔血清)稀释。底物液(柠檬酸缓冲液)0.2M Na2HPO4(28.4g/L)25.7ml0.1M C6H8O7H2O(21.02g/L)24.3mlH2O50m鐀(匀琀讀缁朰H缀窚掉椀眂范圄垄圄愄甄約約約獻蹑譥葧躀葠暋屝鑏葠搀漀挀攀昀愀愀攀最椀昀獻蹑譥葧躀葠暋屝鑏葠搀漀挀尀尀戀攀挀搀攀愀攀戀攀攀昀搀猀挀眀瘀匀吀栀栀琀瘀搀昀嘀堀欀猀洀甀砀娀眀甀嘀渀欀眀匀漀一渀圀堀欀儀猀蹑譥躀暋屝鐀萀桨琀琀瀀猀眀眀眀眀攀渀欀甀渀攀琀挀漀洀椀氀攀刀漀漀琀尀圀攀渀欀甀渀攀琀椀氀攀刀漀漀琀尀搀戀戀愀搀搀搀愀

12、愀攀昀攀搀攀戀&栀!葠絶晹敏最匀夀戀琀焀漀吀瀀昀樀唀渀欀砀砀嘀眀稀瘀琀氀堀唀眀攀愀漀戀椀眀堀氀娀琀搀圀渀猀椀椀獻蹑譥葧躀葠暋屝鑏葠猀蹑譥葧躀葠暋昀葲晔奏罛脀艺癙救葧譥葧躀畠葎卾菿獛乑k葎絵襔桛豑厎敏獣膗葎煶魒眰奭捎屒腹魜鱏塵葝襶桛豑敔吁蜀茀;忨址忨胔- 耀聮i縀$萟2020卫生院医生个人工作总结范文.doc985bb9190fc24a089bc27c5c3e12038c.gif2020卫生院医生个人工作总结范文.doc2021-2147d5ca114-9684-4b9f-aba7-af25a593590bXzkJ1Wp6fVjQZL3Q5p2tjjq9IHIfnGSBg3/guw2t0xl43

13、xIK59CVCQ=2020,卫生院,医生,个人,工作总结,范文https:/ 乡镇卫生院医生个人工作总结【一】20 xx年在卫生局和乡党委、政府正确领导下,紧紧围绕2017年下达的目标任务,积极应对突发公共卫生事件,借新型农村合作医疗实施,努力解决群众看病难、看病贵问题,在全院干部职工共同努力下取得了明显的社会效益和经济效益。 一、狠抓行动、树新风、全面提升我院整体形象 1、以病人为中心,提高服务质量,创人民满意卫生院是我院发展目?06(琀匀琀讀缁H缀満趀椀眂漃潎龃桙Q梉搀漀挀攀挀搀愀搀愀搀最椀昀潎龃桙Q梉搀漀挀尀尀戀搀戀戀愀戀搀愀戀戀樀猀挀匀堀漀吀挀氀瘀栀倀搀瘀瘀礀焀甀一眀焀眀爀爀欀唀礀伀

14、栀琀眀吀焀礀漀儀潎鼀桙梉梈琀琀瀀猀眀眀眀眀攀渀欀甀渀攀琀挀漀洀椀氀攀刀漀漀琀尀圀攀渀欀甀渀攀琀椀氀攀刀漀漀琀尀昀攀搀戀搀昀攀戀愀栀销蘀R葠絶晹敏樀昀渀猀渀昀匀挀稀甀氀攀儀娀漀嘀戀最匀唀焀唀樀刀搀稀攀琀椀吀爀刀焀瘀爀猀漀匀渀樀礀潎龃桙Q梉鬀梉澈鵨魾紀餀谀鬀焀綄綀傀馂鬀梉澈萀瞅嬀嬀傄儀傃渀歬潰轷偨覂饛刀妗傄謀罱潮餀媀嘁蜀茀丄;煼唙煼胔-騀i縀$菷妇联主席个人述职述廉报告5篇.doc4e1e5f8ceeaa4ae0a8393567c12b3d13.gif妇联主席个人述职述廉报告5篇.doc2021-2140094e475-b490-427e-963f-a4d98a858ea8U3FXLOuItkkJ

15、6zbcm94/UIQlkHTmVBxWZrWaskN9ksVgp1q0YG7rUA=妇联,主席,个人,述职,报告https:/ 5 篇 在工作中,作为妇联主席的我们有时要写述职述廉报告的。朋友,写述职述廉报 告要注意哪些格式呢 ?下面就是小编给大家带来的妇联主席个人述职述廉报告 5 篇,希 望大家喜欢 ! 妇联主席个人述职述廉报告 (一) 尊敬的领导,各位同事: 大家好! 一年来,本人在区委、区政府的正确领导下,在部门及基层妇联组织的大力支持 下,认真贯彻落实党的十九大会议精神,围绕 “保增长、保FA(匀倀讀缁蜰H缀窚掊椀缂儃笃儓攓洓洓洓锓锓锓锓锓锓锓锓锓锓锓锓锓锓锓锓搀漀挀砀愀戀戀攀愀昀攀

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