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银行内控合规自查报告范文.docx

上传人:林小宇 文档编号:516487 上传时间:2019-08-03 格式:DOCX 页数:11 大小:20.96KB
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2、0187a440b7b0ee19c6c9579e豲豏林小宇0002000001思想汇报20190802153101393182C泡后可制成透明的干板,有利于扫描定量及长期保存。 2、醋酸纤维薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳相比,操作简单,但分离效果不太好。如血清蛋白在醋酸纤维素薄膜电泳中,只能分离出 56 条区带,而聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离出数 10 条区带。一、实验目的1.掌握电泳法分离血清蛋白质的原理;2.掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作方法。 二、实验原理1.电泳:是指带电粒子在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。在一定 pH 条件下,不同的蛋白质于具有不同的等电点而带不同性质的电

3、荷,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,即它们的电泳迁移率不同,因此,可使它们分离 2.影响电泳迁移率的因素:内在因素:蛋白所带净电荷的量、蛋白的大小和形状 外界因素:电场强度、溶液的 pH 值、溶液的离子强度和电渗现象3.血清中各种蛋白质的等电点在之间,在的缓冲溶液中均带负电荷,在电场中向正极泳动。血清中各种蛋白质的等电点不同,所以带电荷量也不同。此外各种蛋白质的分子大小各有差异,因此在同一电场中泳动的速度不同。分子小而带电荷多者,泳动较快;反之,则较慢。4.醋酸纤维素溶于有机溶剂后,涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。该膜具有均一的泡沫状的结构,厚度约为 120 m,有很强

4、的通透性,对分子移动阻力很小。该薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高,对样品无拖尾和吸附现象等优点。现已广泛用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、血红蛋白、酶的分离和免疫电泳等方面5. 经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为 5 条区带,从正极端依次为清蛋白、1 球蛋白、2 球蛋白、 球蛋白及 球蛋白,经染色可计算出各蛋白质的百分含量。三、实验材料及试剂 1、实验器材1. 电泳仪:为电泳提供直流电源。 2. 电泳槽:为电泳提供场所。3. 血清加样器 :可用盖玻片或微量加样器。 4. 醋酸纤维素薄膜:2cm8cm5. 其它: 培养皿、滤纸、镊子等 2、实验材料及试剂 材料:牛血清1.巴比妥-巴

5、比妥钠缓冲液 % 氨基黑 10B 染色液 3.漂洗液4.透明液:临用前配制甲液:取冰乙酸 15ml,无水乙醇 85ml,。 乙液:取冰乙酸 25ml,无水乙醇 75ml。 5.保存液:液体石蜡6.定量洗脱液 四、实验步骤 1、电泳槽的准备电泳槽有两个互相隔离的槽,各自装有缓冲液,接不同的电极,红色为正极,黑色为负极。每个槽上都有一根可移动的横杆,滤纸的一头搭在横杆上,另一头浸入缓冲液中,形成了滤纸桥。点好样的醋酸纤维薄膜就搭在滤纸桥上。 2、醋酸纤维素薄膜的润湿将醋酸纤维素薄膜完全浸泡于缓冲液中约 30min 后,用镊子小心夹住薄膜一端,放在折叠的滤纸中,并用滤纸吸干表面液体。 3、点样把膜条

6、铺在玻璃板上,将点样器在血清中沾一下,再在膜条一端处轻轻水平地落下并随即提起,这样即在膜条上点上了细条状的血清样品。此步是实验的关键。4、电泳将点样端的薄膜平贴在阴极电泳槽支架的滤纸桥上,另一端平贴在阳极端支架上(见下图)。要求薄膜紧贴滤纸桥并绷直,中间不能下垂。连接好电泳仪。在室温下电泳,打开电源开关,调节电流强度/cm 膜宽度电泳时间约为 1h。电泳后,关闭电泳仪切断电源。 5、染色:电泳完毕后将薄膜取下, 放在含氨基黑 10B 染色液的培养皿中浸泡 5-10min。 6、漂洗:将薄膜从染色液中取出,自来水下冲洗除去多余的染色液后放入盛有漂洗液的培养皿中漂洗,直至背景蓝色脱尽,条带清晰为止

7、,可得到色带清晰的电泳图谱 。 7、透明将脱色吹干后的薄膜浸入透明甲液中 2min,立即放入透明乙液中浸泡 1min,取出后立即紧贴于干净玻璃板上,两者间不能有气泡。约 2min3min 薄膜完全透明。若透明太慢可用滴管取透明乙液少许在薄膜表面淋洗一次垂直放置待其自然干燥,或用吹风机冷风吹干且无酸味。再将玻璃板放在流动的自来水下冲洗,当薄膜完全润湿后用单面刀片撬开薄膜的一角,用手轻轻将透明的薄膜取下,用滤纸吸干所有的水分,最后将薄膜置液体石蜡中浸泡 3min,再用滤纸吸干液体石蜡,压平。此薄膜透明,区带着色清晰,可用于光吸收计扫描。林小宇0002000001思想汇报20190802153101

8、4711910Z(鰀鸁匀%萀砯鸁鸁鰀鸁讀缁缀螏頀h栀$茶采油实习报告5000字.docxpic1.gif采油实习报告5000字.docx2019-820a50fed9-db91-44a7-830c-1d2a296b99e9gI14ucUFAq05A3OWFDgU5wCKmITIrmWxGLZLFIvbGIAcBrbvxAbG7w=采油,实习,报告,5000e3b276deff69e4df7347fd8697110656豱豏林小宇0002000001思想汇报20190802153101299231C0G(鸁匀敹H#砱鸁倂鸁鸁讀缁搀螏頀h栀$茺采摘机器人设计开题报告.docxpic1.gif采摘机

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