1、.(1)荧光素类 Fluorescein标准荧光素(Reference standard)之一,在其基础上进行结构改造,可产生一系列荧光素衍生物。Fluorescein适用于Argon-ion Laser的488nm光谱线,有相对高的荧光吸收,较好的荧光产率以及良好的水溶性。标记蛋白时通常不会产生蛋白沉淀。与其他荧光素类衍生物一样,Fluorescein具有光淬灭率高,pH敏感性强与发射波谱宽的缺点。主要应用于聚焦激光扫描微阵列(Confocal laser scanning microscopy)和流式细胞计应用(Flow cytometry)。FITC异硫氰酸荧光素,Fluorescein
2、 isothiocyanate,是荧光素衍生物的一种,5-FITC较6-FITC更经常使用。FITC的异硫氰酸基能与氨基反应,可用于标记氨基修饰DNA,一旦形成,产物极为稳定。适用于Argon-ion Laser的488nm光谱线,Abs/Em=492/519nm(pH=9.0)。与蛋白的结合力也强。FITC具有荧光素衍生物的普遍特性。在水中易变坏,不能长久保存。FITC-Oligo 广泛用于杂交探针;FITC-多肽用于Edman降解蛋白测序;FITC也经常被用于蛋白电泳检测(即使是毛细管电泳)和荧光能量激发转移测试。FAM羧基荧光素,Carboxyfluorescein,是荧光素衍生物的一种
3、,5-FAM较6-FAM更经常使用。Carboxyfluorescein-5-succimidyl ester,即5-FAM(NHS)广泛存在于荧光标记试剂盒。与FITC相比,FAM与氨基反应更快,产物也更稳定,但FITC结合蛋白的量更大且进程更易于控制。FAM也适用于Argon-ion Laser的488nm光谱线,Abs/Em=492/518nm(pH=9.0),具有荧光素衍生物的普遍特性,在水中稳定。5-FAM主要应用于DNA自动测序中,标记其中的d/ddCTP(PE公司),也经常用于PCR产物定量,核酸探针等。TET四氯荧光素,Tetrachloro fluorescein,是荧光素衍
4、生物的一种。TET以及HEX均是在FAM基础上加以改进的,氯原子使FAM的Abs与Em值都产生一定的红移,并在一定程度上减弱了pH敏感性。TET也适用于Argon-ion Laser激发光源,Abs/Em=521/536nm 。TET,HEX,FAM和TAMRA可配合用于DNA自动测序中,其中TET用于标记d/ddATP,HEX用于标记d/ddGTP或d/ddATP(PE公司)HEX六氯荧光素,Hexachloro fluorescein,是荧光素衍生物的一种。适用于Argon-ion Laser激发光源,Abs/Em=535/556nm。(请参见TET介绍)JOE羧基-4,5-二氯-2,7-
5、二甲氧基荧光素,Carboxy-4,5-dichloro-2,7-dimethoxyfluorescein,是荧光素衍生物的一种,6-JOE更被广泛使用。JOE荧光产量高,pH敏感性弱,适合于标记蛋白。6-JOE也适合于Argon-ion Laser激发光源,Abs/Em=520/548(pH=9.0)常用于DNA自动测序,标记d/ddATP,也经常被用于进行电泳检测与PCR产物定量。(2)罗丹明类(Rhodamine dye) R 110标准荧光素(Reference standard)之一,在其基础上进行结构改造,即可产生一系列罗丹明类衍生物。与Fluorescein类衍生物相比,罗丹明类
6、荧光素具有更强的光稳定性,更高的荧光产量以及更低的pH敏感性罗丹明类荧光素极为适合于标记寡核甘酸,但蛋白会引起大多数罗丹明类荧光素的荧光淬灭,故大多数不适宜用于标记蛋白。R110被用于DNA自动测序。TAMRA全称羧基四甲基罗丹明,即Carboxytetramethylrhodamine,是罗丹明类荧光素衍生物,6- TAMRA被广泛使用。TAMRA是少数几个能用于标记蛋白的,6- TAMRA适用于Argon-ion Laser激发光源,Abs/Em=547/573nm(Ph=8.0),6-TAMRA(NHS)常用于荧光标记试剂盒中。6- TAMRA主要用于DNA自动测序中。Texas Red
7、Texas Red是一个长波长荧光素,与Fluorescein几乎没有波谱重叠,只适合于Ar-Kr Laser的568nm光谱线或He-Ne Laser的594光谱线,比Tetramethylrhodamine和LissamineTM Rhodamine B波长更长,荧光量更高。Texas Red在荧光微阵列和流式细胞计中更被经常作为第三波长标记(Third labels)。(3)BODIPY类 BODIPY类荧光素是由分子探针公司开发,以用来替代那些有部分缺陷的传统荧光素,普遍具有荧光产量高,pH敏感性低(无离子变化),光稳定性强以及发射波谱窄的优点,故BODIPY类荧光素已被广泛用于核酸,
8、脂肪酸,磷脂以及各种受体。同时,由于在电泳过程中对序列片段影响小,故已被逐渐用于DNA自动测序。但相对而言, BODIPY类荧光素并不特别适合标记蛋白.BODIPY FL可代替FluoresceinBODIPY R6G可代替Rhodamine 6GBODIPY TMR可代替TetramethylrhodamineBODIPY TR可代替Texas Red这些BODIPY类荧光素具有与被替代物几乎类似的光谱特征,能共用同样的光过滤器与激发光源,但更具优点。(4)其他荧光素 Cascade blueCascade blue是在芘 (pyrene)结构基础上改造得来的,即sulfonated pyr
9、ene,它是一种短波长紫外激发荧光素,与另一种常用的紫外荧光素Aminocoumarin相比,Cascade blue的Em与Fluorescein有更小的光谱重叠,有更高的荧光吸收和更大的荧光产量. Cascade blue在376nm处存在第二个吸收峰,水中不稳定。Cascade blue 主要用于标记蛋白,作为极性示踪子(polar tracer)可进行膜蛋白定位等.但也能用于标记核酸和葡聚糖。Aminocoumarin一种短波长紫外激发荧光素,通常使用的是7-amino-4-methylcoumarin, 红移现象明显,比Cascade blue有更长的发射波长,肉眼观察明显,更适用于
10、confocal。表1:主要荧光激发光源Excitation sourcePrincipal spectrum lines(nm)Mercury-arc Lamp366,405,436,546,578Xenon-arc Lamp250-1000(continous)Tungsten-halogen Lamp350-1000(continous)Cr:LiSAF Laser430Helium-cadmium Laser325,442Argon-ion Laser488,514Nd:YAG Laser532Helium-neon Laser543,594,633Krypton-ion Laser5
11、68,647表2:主要荧光素一览表DyeAbs/Em Max(nm)NotesAcridine orange500/526green fluorescence bound to DNA, and red shift to 650 upon association with RNA, useful for flow cytometry.FAM492/518Most widely used green fluorescein, absorption overlaps the 488 nm spectral line of the argon-ion laser, prone to photoble
12、aching, pH sensitive between pH 5-8,is widely used for automated DNA sequencingFITC494/519Subject to argon-ion laser, widespread use for hybridization, immunoreagent, protein sequencing and FRETHEX535/556pH insensitive, used for automated DNA sequencingJOE520/548Intermediate-wavelength spectra, impo
13、rtant dye for automated DNA sequencing.Lissamine rhodamine B570/590Optimal for 568 nm excitation photostable,used in confocal laser scanning microscope.easier to label protein than TMR.Pyrene340/378 Excimer:470Long excited-state lifetime, spectral shifts due to excimer emission,used in protein comfo
14、rmation and oxygen sensors.ROX570/590spectra between Lissamine rhodamine B and Texas Red, used in automated DNA sequencing.TET521/536pH insensitive, used for automated DNA sequencingTetramethyl rhodamine555/580pH insensitive , photostable,Widely used for automated DNA sequencingTexas Red595/615Suite
15、d for the Ar-Kr 568nm and He-Ne 594nm spectra, brighter and lower background than other red dyes as third label, used in confocal laser scanning microscopesDansyl Chloride372/NDEnvironmentally sensitive, large stokes shift for protei sequencingDabcyl453/noneBroad absorption, no fluorescence, as a qu
16、enching group useful for fluorescence resonance energy transfer (FRET)CR-6G525/555Spectral between fluorescein and tetramethylrhodamine, good photostable, preferred nucleotide off proteinCascade Blue400/420Resistant to quenching upon protein conjugation, Water soluble.BODIPY R6G528/547Substitute for
17、 rhodamine 6G,Useful for automated DNA sequencingBODIPY FL505/513pH insensitive, narrow spectral bandwidth, useful for automated DNA sequencing, preferred protein conjugation.Amino-coumarin345/445Widely used blue fluorescent dye, visibly brighter and easier for microscopes.灐灐二是控制致病菌的繁殖,三是杀灭致病菌。三、细菌性
18、食物中毒预防措施在食品加工操作中,应根据以上三项原则,采取相应的预防措施:1避免污染。即避免熟食品受到各种病原菌的污染。如避免生食品与熟食品接触;经常洗手,接触直接入口食品的人员还应消毒手部;保持食品加工操作场所清洁;避免昆虫、鼠类等动物接触食品。2控制温度。即控制适当的温度以保证杀灭食品中的病原菌或防止病原菌的生长繁殖。如食品加热中心温度应达到70以上,长时间存放熟食品应将温度控制在60oC以上或10以下。3控制时间。即尽量缩短食品存放时间,不给病原菌生长繁殖的机会。熟食品应尽量当餐食用;食品原料应尽快使用完。4清洗和消毒。接触食品的物品应洗净;接触直接入口食品的物品,除清洗外还应消毒。生食
19、的蔬菜水果也应进行清洗消毒。5控制加工量。食品的加工量应与加工条件相吻合。食品加工量超过加工场所和设备的承受能力时,难以做到按食品安全要求加工,极易造成食品污染,引起食物中毒。四、化学性食物中毒常见原因化学性食物中毒是因各种有毒化学物质所引起其常见原因有:1食品中天然有毒有害物质,如毒蘑菇、四季豆、生豆浆等。2食用农产品农药兽药残留超标,如蔬菜中有机磷农药等。3食品在加T过程受化学有毒有害物污染,如误将亚硝酸盐作为食盐使用。五、化学性食物中毒预防措施预防化学性食物中毒,应根据不同类型的中毒的特点,分别采取相应的预防措施。1不吃、不用有毒品种。毒蘑菇、发芽马铃薯中的毒素在加工中难以去除,最有效的
20、预防措施是不食用、不使用这些有毒品种。2保证来源正规。预防农药兽药引起的食物中毒,应选择正规渠道供应的产品,并查验相关检验报告。3正确加工操作。生豆浆、四季豆、蔬菜中农药等引起的食物中毒,都可以通过加工进行预防。如:预防生豆浆食物中毒。生豆浆加热至80时出现假沸现象,会有许多泡沫上浮,此时将上涌泡沫除净,煮沸后再以文火维持煮沸5分钟左右,可使其中引起中毒的胰蛋白酶抑制物彻底分解破坏。预防四季豆食物中毒。烹饪时先将四季豆放入开水中烫煮10分钟以上再炒。烹饪时必须烧熟煮透。预防农药引起的食物中毒。蔬菜粗加工时以食品洗涤剂溶液浸泡30分钟后再冲洗干净,烹饪前再经烫泡1分钟,可有效去除蔬菜表面的大部分
21、农药。保障食品安全和公众健康是每个餐饮服务单位的责任所在,让我们更好地学习和执行食品安全法、食品安全法实施条例、餐饮服务食品安全监管管理办法和餐饮服务食品安全操作规范的要求,进一步提高食品安全责任意识,规范加工操作,依法诚信经营,接受社会监督,为保障消费者的饮食安全,提高餐饮服务食品安全水平而努力!;.李白长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。刘禹锡斯是陋室,惟吾德馨。十六、龚自珍的“我劝天公重抖擞,不拘一格降人才”与本文阐述的选拔人才的方法是否一致?为什么?不一样。马说是让伯乐发现人才,龚自珍是上层领导到下层去选拔人才十七、对对联:上联:怀才不遇思伯乐 下联:仕途失意作马说;.羖羖(易错提示:“妆
22、”不要误写成“装”;“阑干”不要误写成“栏杆”)10.同是天涯沦落人相逢何必曾相识(易错提示:“涯”不要误写成“崖”;“沦”不要误写成“沧”)11.杜鹃啼血猿哀鸣春江花朝秋月夜(易错提示:“鹃”不要误写成“娟”;“哀”不要误写成“衰”)12.如听仙乐耳暂明莫辞更坐弹一曲(易错提示:“坐”不要误写成“座”)13.满座重闻皆掩泣江州司马青衫湿(易错提示:“座”不要误写成“坐”;“州”不要误写成“洲”).脙e堀(辆輁匀氀退輁輁讀缁H缀窢狝栺搄輁椀攂猙猙猙猙猙猙猙猙猙猙猙猙猙猙猙猙茙蔛搀漀挀昀戀愀搀挀愀戀搀搀昀戀愀昀攀最椀昀搀漀挀尀尀挀戀挀搀戀攀昀愀攀愀搀夀唀儀漀唀娀欀洀挀栀戀琀最洀堀倀洀圀渀洀愀砀刀
23、焀昀倀唀甀樀戀攀搀戀挀攀戀戀倀傟剙枃屔麃礀罶啢僿傟剙枃屔吀诿兵偵珿愀礀开挀漀洀礀僿屓杵絲欀琀谀0济瑑豧鑓华倀傟剙枃屔腎牦屔罹龃腎賿块礀块龃蹏偎傟罓偵龃龃蹏谠萠筗蕖獒晞W蕎鵑蹏屓谀聎祧琀豞琀杹瑙琀耰祧葵聶W餰葓肃腎杗偹祧潥析杹瑙怀琤琀腗繭頀獓绿獶摞頀獓螀摳蚃蝶蹙璀健貁頀獓篿貀頀獓屝撑頀獓玀獗獫獥蕜块扙_敛頀獓葼靎蕟艹猀葛扗亚摝頀獓讕鹽鉏偹澐綂葙慘岀鮀愀摒獦籒罵綀余著獶N摒晓摛消瑙鲃陮罦葭盿偹鲐糿荓綏罵蒞鲐獧腎薉蹒梂氀絧齟慬鱎鉛愰頀獓頀獓鱎抖腹mW罗豘偹抖戀罵摮広膑摝晓摛蒃膏撖欰屎煵挀牥鱒啗坛玁齎姿頀獓姿亏蹒赎姿熚杔広蹜楩屬摖黿屎魯葒獶慧葎铿牒舰鱙佘硐葠鹓蒀徍葥柿霰綆鹶荠玏蝵趃鮀W罵掕蕛牒牒火腎襰
24、獬煽玃屓剎犗香牢艦牕屛萰祧瑙盿祑罵跿鮆拿蛿祧扩瑫獞牒珿牎鞋瑫牞鞋瑫锰芍革祎锰芍革秿镠盿怀頀獓珿愀頀獓|貁珿戀笤頀獓豼珿挀讕讕S鹽珿搀猀攀牒珿昀偹嗿最珿鐀礰襞鉛麄块绿禋b蒗獧麃镧豒瑙偹葑賿块著瑶豥鱢蒀貁屝屾杵絲鵜湏祧鹶豨龃潥块豧腒葬救盿捶癷骉葛偧薖洀鱏祺虶罾葟蝕屓杵絲罜塢诿虳龃罺謀龃塹龃塹堀龃塹一歧龃塹驒鑶癞噥0祛腑面鸰賿祛b魣澍潑祦卓魣蒍祎椰鎏魣憐聙魣鴰塏屷杵癸豢偔傟龃葺骖聓魧滿祏鹶葥聶g禋鶍虎禋葶鹶秿华襾鉛祣嫿滿祏杣襞鉛麈祟葓虎祧鹶鞃潟綂葙秿华腏蒕祶祛葠滿祧葶v獧梖龃罓灙羋暋獜屝嘀娀挀眀吀椀椀夀琀猀圀漀一栀爀瀀吀挀堀攀刀搀倀刀昀樀伀戀愀眀稀礀倀倀倀倀傟剙枃屔麃礀罶啢僿傟剙枃屔吀诿兵偵珿愀礀开
25、礀僿屓杵絲欀琀谀0济瑑豧鑓婎脹(辬輁匀搀退棸輁輁讀缁H缀氂耀揼輁椀鄂攃褃覃褃贃儃晜螋妋晥噛敻颋癸搀漀挀挀挀戀攀攀戀戀戀攀攀搀愀戀最椀昀晜螋妋晥噛敻颋癸搀漀挀尀尀戀搀搀愀愀攀戀愀攀昀愀搀戀堀唀唀欀栀昀唀刀渀瘀渀欀洀稀稀嘀礀攀挀倀氀瀀爀眀甀吀焀堀焀匀夀欀栀最晜螋夀晥噛敻颋癸搀攀攀昀搀挀昀愀攀昀搀攀搀栀%栀鎜*鎛稀屝唀瀀琀渀搀焀伀稀樀一瘀倀匀刀礀昀戀漀圀倀欀渀一嘀焀氀娀戀伀圀吀昀戀最琀栀最樀渀堀欀晜螋妋晥噛敻颋癸颋蒘晜螋奥晥N祎膑螋蹒晭螋葥翿癏葡轶癱蹒倰葡豶齦蝎鉧葒敶腨貀屔葭厐螋晥恛葎螋晥恛葎v獎艳葞晜螋奥晥肋聟葘替葵湑蝸乳阀栀輁稀5蘀澄羼澄胔-i縀$荣主题活动蔬菜朋友.doca52a4a94058e433ea38b056960727002.gif主题活动蔬菜朋友.doc2020-1212dd22502b-887a-4369-8996-49bca8e5efd5/QEyCBNNIIhtGWCcfL1sHMqUOhD5/g2Vc28sX/tdIaHbBvC2LsbAKw=主题,活动,蔬菜,朋友2398540e6c8378